EVALUACIÓN DE LA HEMOSTASIA

1. EVALUACIÓN DE LA HEMOSTASIA

2. RECUENTO DE PLAQUETAS

3. METODOS • Manual • Automatizado

4. RECUENTO MANUAL DE PLAQUETAS

5. RECUENTO MANUAL DE PLAQUETAS • Método de referencia. • Contraste de fase. • Muy adherentes. • Pequeñas.

6. PROCEDIMIENTO • Dilución 1:100. • Dejar 15’ en cámara húmeda. • Objetivo de 40x. • Contar cuadro del centro: 1mm2. • Se deben contar ambos lados de la cámara • Cálculo no x 10 x 100. • Verificación con el F.S.P.

7. ERRORES • Mezcla inadecuada • Muestra defectuosa. • Suciedad de instrumentos. • Recuentos de plaquetas bajos: menor dilución. • Recuentos de plaquetas altos: mayor dilución. • Satelitosis plaquetaria. • Citrato dilución 1.1

8. SATELITOSIS PLAQUETARIA

9. EXÁMEN MICROSCÓPICO • Aumento de 10X. • Aumento de 40X. • Aumento de 100X.

12. RECUENTO PLAQUETARIO EN EL F.S.P. • Objetivo de inmersión. • 10 campos. • Promedio de plaquetas x 20000. • Anemia o eritrocitosis. • NO de plaquetas X RTO de eritrocitos 200

13. RECUENTO PLAQUETARIO AUTOMATIZADO • Exactitud • Precisión • Volumen mínimo. • Diagnóstico y tto oportuno

16. FUNCION PLAQUETARIA Pruebas • Recuento de plaquetas. • Revisión del extendido de sangre.

17. CUANDO SE DEBEN REALIZAR • Síntomas hemorrágicos • Petequias, epistaxis con recuento de plaquetas normales

18. ¿PORQUE SE DEBEN REALIZAR? • Trastornos hereditarios – raros • Trastornos adquiridos – comunes

19. TRASTORNOS ADQUIRIDOS • Enfermedad hepática, renal • Síndromes mieloproliferativos • Síndromes mielodisplásicos. • Mieloma múltiple. • Uremia. • Autoinmunidad. • Anemia. • Tratamiento con fármacos

20. MORFOLOGIA PLAQUETARIA • Plaquetas grandes grises. • Intercambio plaquetario rápido. • Plaquetas gigantes o con forma bizarra.

21. TIEMPO DE SANGRIA • Diagnostica trastornos de sangrado. • Evalúa la adhesión y agregación. • Se prolonga en enfermedades vasculares.

22. TIEMPO DE SANGRIA Tiempo que tarda en detenerse la hemorragia de un corte estándar en profundidad y longitud en la piel. • DUKE (1912) • IVY (1941)

23. TIEMPO DE SANGRIA(Lóbulo de la oreja) • Presión intracapilar. • Espesor cutáneo. • Tamaño y profundidad de la herida

24. TIEMPO DE SANGRIA ESTANDARIZADO

26. TIEMPO DE SANGRIA RESULTADOS/INTERPRETACION • Normal hasta 8 minutos. • Un resultado anormal debe ser repetido. • Al continuar la hemorragia mas de 10’ informar mayor de 10’. Suspender la prueba • Advertir la formación de cicratiz

27. TIEMPO DE SANGRIA PROLONGADO • Trombocitopenia. • Enfermedad de von Willebrand. • Trombastenia de Glanzman. • Síndrome de Bernard Soulier. • Enfermedad de almacenaje.

28. TIEMPO DE SANGRIA PROLONGADO • Esenciales el fibrinogeno y el FV. • Dificultades de ellos T.S.P. • Fármacos que contienen aspirina

29. RETRACCION DEL COAGULO Da información sobre el numero y la función plaquetaria. Cuando el coagulo se retrae, el suero es liberado y se puede medir el grado de retracción del coagulo

31. RESULTADOS/ INTERPRETACION Valor de 40 – 65% Valores anormales en: • Trombastenia de Glanzmann. • Trombocitopenia. • Disfibrinogenemia. • Hipofibrinogenemia.

32. PRUEBAS PARA EVALUAR HEMOSTASIA SECUNDARIA

33. MUESTRA • Sangre total venosa. • Aguja máximo calibre 21. • Jeringa o tubo al vacío. • Plástico o recubierto con silicona. • Evitar el uso del torniquete.

34. INFORMACION EN CADA TUBO DE MUESTRA • Nombre completo del paciente. • Número de identificación del paciente. • Fecha de recolección. • Hora de recolección (exacta). • Iniciales o código de recolección.

35. ORDEN DE EXTRACCIÓN (NCCLS-1988) • Hemocultivo • Tubo sin aditivos (tapón rojo) • Tubo para coagulación (tapón celeste). • Otros tubos con aditivos: • Tubo con gel o separador de suero (tapón dorado). • Tubo con heparina (tapón verde). • Tubo con edta (tapón lavanda). • Tubo con oxalato de potasio o floruro de sodio (tapón gris).

37. TUBOS PARA LA RECOLECCION • Tubos estériles con tapón azul. • Citrato de sodio 0,105-0,109 m (3.2%). • Relación sangre entera a anticoagulan- te: 9:1 • El citrato evita la coagulación al unirse con el calcio. • Relación citrato en sangre entera: 10,5-10,9 mmol/L

38. NUEVAS MUESTRAS

39. CORRECCIÓN DEL VOLUMEN DE CITRATO • En eritrocitosis, disminuye el volumen plasmático con respecto a la sangre entera elevándose la relación anticoagulante – plasma prolongándose falsamente los tiempos. C= (1.85x10-3).(100-H)V • C= Vol citrato en mL. • V=Vol sangre entera/solución de citrato en mL • H=Hematocrito.

42. TANSPORTE Y TO ALMACENAMIENTO • Mantenerlas tapadas y en posición vertical • Entre 18° - 24°c o a 2-4°C transporte • Conservación a menos de 4°C.

43. PLASMA DEFICIENTE EN PLAQUETAS - PDP • Plasma con recuento de plaquetas menor a 10x103 /uL. • Centrifugar a 1500g durante 15’ tapados.

44. CONSERVACIÓN POR PERIODOS PROLONGADOS • Transferir el PDP con pipeta plástica a un tubo seco, tapado. • Congelar a -20°C/2 semanas o -70°C /6 meses. • Descongelar a 37°C rápidamente. • Procesar durante la hora siguiente. • No recongelar. • Hasta 2h después del descongelamiento entre 2-4°.

45. REACTIVOS • Lábiles. • Reconstituir según instrucciones del fabricante. • Atemperar 30’ a T° ambiente. • Agregar el agua, mezclar por rotación 45’’. • Dejar en reposo 30’. • Utilizar en las mediciones y llevar a refrigeración.

46. PREPARACIÓN DEL POOL NORMAL

47. DETECCIÓN SISTEMÁTICA DE PROCOAGULANTES PLASMATICOS BASADA EN EL COÁGULO • Tiempo de coagulación de LEE-WHITE, 1913. • Primer procedimiento in vitro. • El intervalo desde la iniciación de la coagulación hasta la formación del coágulo visible.

49. TIEMPO DE PROTROMBINA (PT) • TROMBOPLASTINA: FACTOR TISULAR RECOMBINANTE SUSPENDIDO EN FOSFOLÍPIDOS MEZCLADOS CON UNA SOLUCIÓN DE CLORURO DE Ca 0,025M AMORTIGUADA. • Refleja la eficacia global de la vía extrínseca. • Es sensible a cambios en los factores V, VII y X. • Poco apropiada para detectar pequeños cambios en los niveles de fib. • Para controlar la anticoagulación por vía oral.