200 likes | 556 Views
SULARIN MİKROBİYOLOJİK ANALİZİ P rof. Dr. Kadir HALKMAN Ankara Üniversitesi Mühendislik Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü 17 Ekim 2007, SARTORiUS. Mikrobiyolojik Analizler. Sayım Var/ Yok testleri Biyolojik stabilite Toksin Testleri. Sayım.
E N D
SULARIN MİKROBİYOLOJİK ANALİZİ Prof. Dr. Kadir HALKMAN Ankara Üniversitesi Mühendislik Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü 17 Ekim 2007, SARTORiUS
Mikrobiyolojik Analizler • Sayım • Var/ Yok testleri • Biyolojik stabilite • Toksin Testleri
Sayım Varlığına izin verilen gruplara uygulanır • Koloni sayımı • EMS yöntemi • Membran filtrasyon • Diğer Yöntemler
Var/ Yok Testleri Patojenlere ve indikatörlere uygulanır • Salmonella • Listeria monocytogenes • E. coli • Ozmofil maya
Biyolojik Stabilite Ürünü bozmayacak mikroorganizma, ürün içinde kalabilir. • Salça, ketçap • Reçel • Az sayıda olmalıdır. • Patojen olmamalıdır.
Toksin Testleri İntoksikasyon da önemlidir. • Staph. aureus toksini • Cl. botulinum toksini • Mikotoksinler (Aflatoksin vb.) • Mikroorganizma varlığı önemli değildir. • Toksin yapacak koşullar da gereklidir.
Yok Ne Demek? • Gerçekten yoktur. • Belirlenebilecek limitlerin altındadır. • Analiz hatalı yapılmıştır. • Yok demek yanlış olur. • “Belirlenebilir limitlerin altında” • Limitler giderek düşürülüyor (çıta yükseltiliyor).
Laboratuvar Güvenliği • Personel sağlığı her şeyden önce gelir. • Analiz doğru yapılmalıdır. • Doğru yöntem • Doğru yorumlama • Laboratuvar dizaynı önemlidir. • Islak/kuru alan • Nem, mikroorganizma yükü vb. • Çevreye saygı gösterilmelidir.
Mikroorganizma Sayımı Koloni Sayımı EMS Membran Filtrasyon Metabolizmaya Dayalı Testler Spiral Plater Mikroskobik Teknikler
Koloni Sayımı Dökme Yöntemi ; 1 mL Yayma Yöntemi ; 0,1 mL Damlatma Yöntemi* ; 0,01 mL Özel Durum: 14 cm ‘lik Petri : S. aureus sayımında kullanılır. Alternatif: 3 Petri kutusuna toplam 1 mL yayılmasıdır. Koloni sayımında alt ve üst sınırlar vardır.
EMS Yöntemi Gıdalarda koliform ve S. aureus sayımı için en uygun yöntemdir. Önemli olan pozitif tüplerin değerlendirilmesidir. E. coli ‘de MUG ile floresan ışımayla değerlendirilir, Listeria ve Salmonella için de EMS ile sayım yapılabilir Tablo okumak (seyreltme faktörü) önemlidir.
1; 0,1 ve 0,01 mL: orijinal örnek, 10–1 ve 10-2 seyreltilerden 1’er mL ekim anlamına gelir. Sıvı gıdada doğrudan bu EMS tablosu kullanılır. Katı gıdaların 10-1 seyreltisi sıvı gıda gibi düşünebilir. Bu durumda çizelge aynı şekilde kullanılır ancak, 10–1 seyreltideki sayı bulunmuş olur. Sonuç 10 ile çarpılır.
Membran Filtrasyon Düşük sayıda mikroorganizma içeren berrak sıvılar için idealdir. Pulplu meyve sularında ve yağlı sütte OLMAZ İçme suyu, yüzme ve kullanma suyu, berrak meyve suları, şarap ve bira, proses suyu için en uygun analiz yöntemidir. Sularda yasal uygulama!
Metabolizmaya Dayalı Testler Metilen Mavisi İndirgeme Resazurin Kondüktans CO2 oluşumu
Spiral Plater Bakım, kalibrasyon, yedek parça ve onarım sözleşmesine dikkat !!!
Mikroskobik Testler Maya Sayımı Çiğ Sütte Bakteri sayımı (Breed Yöntemi) Çiğ Sütte Somatik Hücre Sayımı
Amaca göre Besiyeri Seçimi -Hangi mikroorganizma aranacak/ sayılacak? -Sayım yöntemi nedir? (yayma/ dökme/ EMS) -Gıdanın özelliği nedir? (kuru/ sıvı/ rengi vs) -Analiz ne kadar sürede tamamlanacak? -Refakatçi flora yoğunluğu nedir? -Analiz ekonomisi yapıldı mı?
Tanımlama -Koloni Morfolojisi -Basit Biyokimyasal Testler -İleri Biyokimyasal Testler