1 / 48

Thesisvoorstellen opleiding Farmaceutische Wetenschappen Academiejaar 2008-2009 Dienst FABI

Thesisvoorstellen opleiding Farmaceutische Wetenschappen Academiejaar 2008-2009 Dienst FABI. Prof. J. Smeyers-Verbeke Prof. Y. Vander Heyden Prof. J. Plaizier-Vercammen. Vakgroep Analytische Scheikunde en Farmaceutische Technologie. Prof. J. Smeyers-Verbeke Prof. Y. Vander Heyden

nicola
Download Presentation

Thesisvoorstellen opleiding Farmaceutische Wetenschappen Academiejaar 2008-2009 Dienst FABI

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Thesisvoorstellenopleiding Farmaceutische WetenschappenAcademiejaar 2008-2009Dienst FABI Prof. J. Smeyers-Verbeke Prof. Y. Vander Heyden Prof. J. Plaizier-Vercammen

  2. Vakgroep Analytische Scheikunde en Farmaceutische Technologie • Prof. J. Smeyers-Verbeke • Prof. Y. Vander Heyden • Prof. J. Plaizier-Vercammen

  3. Vakgroep Analytische Scheikunde en Farmaceutische Technologie Farmaceutische Technologie Scheidings- technieken Chemometrie Metrologie • Wat doen wij?

  4. Vakgroep Analytische Scheikunde en Farmaceutische Technologie Doel onderzoek: Evaluatie van nieuwe methodologieën in scheidingstechnieken • Methodeontwikkeling en -optimalisatie • Technieken: HPLC, CE, capillaire electrochromatografie • Toepassingen: Chirale scheidingen, “snelle” scheidingen, fingerprinting, geneesmiddelenanalyse Experimenteel design • Data evaluatie - Voorspellen membraanpassage van geneesmiddelen - Voorspellen van anti-oxiderende eigenschappen van plantenextracten

  5. Thesisvoorstel • professor • Plaizier-Vercammen

  6. Capillaire Electrochromatografie Indiana Tanret

  7. Technieken verbeteren? • HPLC Miniaturisatie  CLC: capillair • CE Meer affiniteit door toevoegen van stationaire fase •  CEC ≈ combinatie HPLC + CE

  8. CEC: toestel EOF • Je leert hoe • monolieten • gemaakt worden SF in capillaire kolom: monolieten

  9. Polymere monolieten BMA BMA META + BMA EDMA EDMA META + BMA META + BMA

  10. Polymere monolieten BMA BMA META + BMA PFS PFS PFS EDMA EDMA META + BMA META + BMA PFS EDMA EDMA BMA META + BMA  Poreus medium

  11. Doel thesis • Applicatie-ontwikkeling • Transfereren van een bestaande HPLC-applicatie naar (p-)CEC • of • Ontwikkelen van een farmaceutische applicatie op een monolitische SF in p-CEC en/of CEC Je ontwikkelt een strategie, voert ze uit en je verwerkt je resultaten

  12. Doel thesis HPLC Voordelen: ↑ efficientie? ↑ selectiviteit? ↑ resolutie? snellere runs? ... CEC

  13. Experimenteel design in methode optimalisatie Bieke Dejaegher

  14. Experimenteel design • Experimenteel design • set-up waarbij de onderzochte factoren tegelijkertijd gevariëerd worden  factoren één voor één variëren

  15. Experimenteel design • Experimenteel design • set-up waarbij de onderzochte factoren tegelijkertijd gevariëerd worden  factoren één voor één variëren • In optimalisatie • « screening » factoren met grootste invloed of effect op de onderzochte respons(en) bepalen • belangrijkste factoren verder onderzoeken mbv « response surface designs » • Modelleren van de respons als functie van de factoren • Voorbeelden: three-level full factorial designs, central composite designs, Box-Behnken designs, Doehlert designs, uniform designs

  16. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken, welke meest geschikt? • 3 factoren  verschillend aantal experimenten ! • Three-level full factorial designs: 33=27 exp. • Central composite designs: 23+6+min1= min 15 exp. • Box-Behnken designs: 13 exp. • Doehlert designs: 13 exp. • Uniform designs: 6 exp.

  17. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken, welke meest geschikt? • 3 factoren  verschillend aantal experimenten ! • Three-level full factorial designs: 33=27 exp. • Central composite designs: 23+6+min1= min 15 exp. • Box-Behnken designs: 13 exp. • Doehlert designs: 13 exp. • Uniform designs: 6 exp.

  18. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken, welke meest geschikt? • 3 factoren  verschillend aantal experimenten ! • Three-level full factorial designs: 33=27 exp. • Central composite designs: 23+6+min1= min 15 exp. • Box-Behnken designs: 13 exp. • Doehlert designs: 13 exp. • Uniform designs: 6 exp.

  19. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken, welke meest geschikt? • 3 factoren  verschillend aantal experimenten ! • Three-level full factorial designs: 33=27 exp. • Central composite designs: 23+6+min1= min 15 exp. • Box-Behnken designs: 13 exp. • Doehlert designs: 13 exp. • Uniform designs: 6 exp.

  20. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken, welke meest geschikt? • 3 factoren  verschillend aantal experimenten ! • Three-level full factorial designs: 33=27 exp. • Central composite designs: 23+6+min1= min 15 exp. • Box-Behnken designs: 13 exp. • Doehlert designs: 13 exp. • Uniform designs: 6 exp.

  21. Doel • Verschillende « response surface designs » in optimalisatie vergelijken • Gebruikte toepassing? • Optimalisatie scheiding HPLC/CE • Optimalisatie derivatisatiereactie • Invloed van ↓ aantal exp ? Welk optimum wordt voorspeld uit elk design? • Welke voorspelde optima leveren praktisch ook goede resultaten op? • Vergelijken voorspelde waarde met experimentele waarde bij gevonden optima

  22. VINGERAFDRUKANALYSEvan kruiden d.m.v. HPLC/DAD Goedele Alaerts Christophe Tistaert

  23. Vingerafdruk analyse van kruiden • Belang onderzoek • kwaliteit van kruiden: Vermageringskuur op basis van chinese kruiden Nefropathie: • nierdialyse • niertransplantatie 1990-1992 Verwisseling Aristolochia fangchi i.p.v.Stephania tetrandra

  24. Vingerafdruk analyse van kruiden • Nood aan • identificatie kruiden • kwaliteitscontrole kruiden Kruid = complex mengsel ! ? Bepaling enkele componenten Onvoldoende voor intrinsieke kwaliteit

  25. Vingerafdruk analyse van kruiden • Oplossing: fingerprints • Karakteristieke vingerafdruk • Infra Rood (IR) • Massa spectrofotometrie (MS) • Dunne laag chromatografie (DLC) • Hoge druk vloeistofchromatografie (HPLC) • Capillaire Electroforese (CE) • Chromatografische fingerprint • Geaccepteerd door WHO !

  26. Vingerafdruk analyse van kruiden • Experimenteel deel: Fingerprint ontwikkeling en optimalisatie d.m.v. HPLC/DAD • Dataverwerking: • Hoe  kruiden onderscheiden op basis van hun fingerprints ? (Correlatiecoëfficienten of PCA) (Goedele) • Modelleren van antioxiderende / cytotoxische activiteit i.f.v. de fingerprints en identificatie van de componenten die voor de activiteit verantwoordelijk zijn. (Christophe)

  27. Vingerafdruk analyse van kruiden

  28. Vingerafdruk analyse van kruiden Fam. Umbellifera • Rhizoma Chuanxiong Rhizoma Ligustici <<< 0.05 % ferulic acid > 0.05 % ferulic acid

  29. Vingerafdruk analyse van kruiden Chuanxiong Ligustici

  30. Vingerafdruk analyse van kruiden • Experimenteel deel: Fingerprint ontwikkeling en optimalisatie d.m.v. HPLC/DAD • Dataverwerking: • Hoe  kruiden onderscheiden op basis van hun fingerprints ? (Correlatiecoëfficienten of PCA) (Goedele) • Modelleren van antioxiderende / cytotoxische activiteit i.f.v. de fingerprints en identificatie van de componenten die voor de activiteit verantwoordelijk zijn. (Christophe)

  31. Vingerafdruk analyse van kruiden • Vragen / info : Goedele Alaerts Bureau G 037 Tel 02/477 45 13 Goedele.Alaerts@vub.ac.be Christophe Tistaert Bureau G 041 Tel 02/477 47 26 Christophe.Tistaert@vub.ac.be

  32. SCHEIDEN VAN CHIRALE GENEESMIDDELEN Promotor: Y. Vander Heyden J. Smeyers- Verbeke Co-Promotor: H. Ates

  33. OVERZICHT • Wat is chiraliteit? • Belang? • Thesisvoorstel

  34. CHIRALITEIT • Centraal C-atoom • 4 verschillende substituenten • Spiegelbeelden niet identiek  Enantiomeren!

  35. BELANG • Verschillend gedrag van enantiomeren in chirale media • Gevolg • Minder werking • Geen werking • Antagonistische werking • Toxische werking

  36. THESISVOORSTEL • Wetgeving FDA en EMEA • Distomeer als onzuiverheid in eutomeer • Scheiden racemische mengsels • Gebruikte techniek in thesis • HPLC met polysaccharide gebaseerde SF (NPLC, RPLC, POSC)

  37. THESISVOORSTEL • Toepasbaarheid van bestaande strategieën controleren • Nieuwe kolommen implementeerbaar? • Nieuwe strategieën definiëren indien nodig

  38. THESISVOORSTEL

  39. Voorspellen van de anti-oxiderende capaciteit van groene thee aan de hand van fingerprints Promotoren: Prof. Vander Heyden en Prof. Smeyers-Verbeke Co-promotor: Melanie Dumarey

  40. 1. INLEIDING: fingerprints • Identificatie • Kwaliteitscontrole • Kwantitatieve eig. Fingerprint = chromatografisch patroon van een extract, waarin enkele farmacologisch actieve en/of chemisch karakteristieke componenten worden weergegeven

  41. 2. DOEL AO capaciteit! TEAC assay AO capaciteit? Fingerprints AO capaciteit? Groene thee Dissimilaire fingerprints

  42. 3. THEORIE: multivariate calibratie Technieken 1. Stepwise MLR 2. PCR 3. PLS 4. UVE-PLS 5. O-PLS Calibratieset (X) Respons (y) 3258 2850 4436 3798 3061 Calibratie model: y = f(X) AO capaciteit (TEAC assay) Fingerprints thee Voorspellen y + calibratie model X (nieuw theestaal)

  43. 4. Praktisch • AO capaciteit bepalen van groene theestalen m.b.v. de TEAC assay • Fingerprints ontwikkelen op 2 dissimilaire chromatografische systemen (HPLC) • Wiskundige technieken toepassen om AO capaciteit te voorspellen gebaseerd op de fingerprints (individuele en gecombineerde fingerprints)

  44. Enhancing sensitivity of a CE separation method for viral compounds Iulia Oita, Bieke Dejaegher

  45. What & How? Picornaviridae CE analysis Separation based on differential migration in an electrical field Reasonable/Short analysis time Low sample&reagent volume Poliovirus (PV)  50 nm “Gentle and suitable for labile compound and microorganisms” (Glynn 1998) • Model organism: • small, • readily available, • easy to manipulate, • safe • well known Electropherogram of a PV sample 0.5 μg/100 ml IS - + PV -

  46. Enhancing CE sensitivity using LIF detection –NH–C=S R R R R R R – S=C–NH NH –N=C=S –NH–C– – NH2 – NH– –NH = NH2– S –NH2 –NH–C=S NH–C=S NH NH – – NH2 NH2 – 488 nm LIF = laser induced fluorescence Laser beam Fluorescein isothiocyanate Fluorescent poliovirus particles NH2– reactive amino groups on the virus capsid Labeled virus

  47. Student work • Find optimal conditions for: • Derivatization of viral sample using fluorescein isothiocyanate • Purification of labeled virus using size exclusion chromatography • Transfer CE method using UV detection to LIF detection

  48. Bedankt voor jullie aandacht !! • OVERZICHT op http://www.vub.ac.be/fabi •  Thesis proposals (linker kolom)

More Related