510 likes | 741 Views
Morfologie bacteriana. Dr. Carmen Costache. 1.Structuri obligatorii : Nucleoid, Citoplasma, Membrană citoplasmatică, Perete celular. 2.Structuri facultative * neesenţiale pentru multiplicare * conferä proprietäţi de patogenitatea Capsulă, Glicocalix; Pili comuni, pili de sex,
E N D
Morfologie bacteriana Dr. Carmen Costache
1.Structuri obligatorii: Nucleoid, Citoplasma, Membrană citoplasmatică, Perete celular 2.Structuri facultative * neesenţiale pentrumultiplicare * conferä proprietäţi de patogenitatea Capsulă, Glicocalix; Pili comuni, pili de sex, Flageli (Cili), Spori STRUCTURA
NUCLEOID • nu are • nucleoli, • membrana nucleară. • Se evidenţiază: • prin coloraţii speciale: • coloraţia Feulgen, • acridin orange; • microscopia electronică (aspect fibrilar).
NUCLEOID • Un singur cromozom = o moleculă dublu catenară de ADN circulară • 50-65 bucle supraspiralizate, pliată, răsucită, • fibrilar, de arici sau ghem • legat de membrana citoplasmatică prin mezozomi • Informaţia genetică - haploidă (gene pentru un caracter într-un singur exemplar). • contact direct între ADN şi ARN, important pentru transcrierea şi traducerea inf.genetice • sediul de acţiune al unor AB: • Quinolone • Nitrofurani, imidazoli • Rifamicine
NUCLEOID • studiirecente => Cz lineari • Borrellia burgdorferi, • Streptomyces spp • Nr. copii de AND/cz la un moment dat • Depind de stadiul ciclului celular
Material genetic extracromozomial • autonom sau integrat în cz bacterian • Plasmidele • Bacteriofagii
Material genetic extracromozomial • Plasmidele • molecule de ADN circulare. • se pot transmite de la o bacterie la alta = conjugarea bacteriană • Codifica nr variabil de gene • virulenta. • Feuelgen pozitiv
Material genetic extracromozomial Bacteriofagii • Structuri virale • infecteaza bacteriile. • 2 tipuri: • litici, capabili de replicare => liza bacteriei • lizogeni (temperaţi) – • se pot integra în cz. = profag => proprietăţi noi: ex. producerea unor toxine.
CITOPLASMA BACTERIILOR • necompartimentată, • fără organite: • reticul endoplasmatic, • aparat Golgi, • mitocondrii, • 2 zone distincte • Periferica, amorfa • Interna (nucleoidul)
CITOPLASMA BACTERIILOR • 1.Ribozomi: mii, 70 S • subunităţile : 50 S (Large) şi 30 S (Small) • sediul sintezei proteice • ţinta de acţiune a unor antibiotice => inhiba selectiv sinteza proteica bacteriana dar nu si cea eukariota ! • Chloramfenicol, • Erithromicina (M) 50 S • Clindamicin, • Tetracicline • Aminoglicozide 30 S
CITOPLASMA BACTERIILOR • 2.Granule/Incluzii: • masă lichidă de substanţe nutritive, • delimitate de membrană • Colorate specific de anumiti coloranti • Ex. Volutina = corpuscul metacromatic (albastru de metilen=> rosu)
CITOPLASMA BACTERIILOR • 3. ARN în cantitate mare, • reprezentat de r ARN (9%), m ARN, t ARN. • 4. Molecule: 3000 – 4000 molecule diferite; • apă, săruri minerale, ioni, acizi nucleici • 5. Incluzii: material nutritiv de rezervă, • format în condiţii nefavorabile de mediu • 6. Plasmide
MEMBRANA CITOPLASMATICA • strat subţire (10 -20 nm) • sub peretele celular => greu de evidenţiat. Structura membranei citoplasmatice • modelul mozaicului Singer: • masă fosfolipidică, • plutesc insule de proteine, • dispuse spre interior, exterior • sau în masa fosfolipidică. • model dinamic => reciclată permanent.
MEMBRANA CITOPLASMATICA Prelungiri în citoplasmă: • 1. Mezozomi • Rol: • diviziunea bacteriilor; • replicare ADN-ului; • formarea endosporilor • 2. Oxizomi: prelungiri scurte • Rol: • procesele bioenergetice la bacteriile capabile de respiraţie: • aerobe, • aerob anaerobe facultative, • microaerofile.
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 1. Permeabilitate selectivă şi transport de substanţe: • transport pasiv = difuzia simplă, substanţecu GM mică • transportul activ • contra gradient de concentraţie, • cu consum de energie
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 2. Funcţie bioenergetică: • sediul transportului de electroni, a fosforilării oxidative (Oxizomii). • 3. Funcţie biosintetică: precursori PC • 4. Sediul enzimelor hidrolazice • hidrolizează polimeri organici: proteine, zaharuri, lipide în nutrienţi, care pot pătrunde în bacterie.
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 5.Ţinta de acţiune pentru detergenţi şi antibiotice (bactericid.)
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 6. Replicarea ADN cromozomial, plasmidic: • prin mezozomii septali • 7. Sediul motorului ciliar
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 8. Import de macromolecule • ex. fragment de ADN, de la bacterii donatoare = transformare
FUNCŢIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE • 9.Sediul receptorilor chemotactici: • deplasarea spre substanţele nutritive
PERETELE CELULAR BACTERIAN • prezent la majoritatea bacteriilor, • Excepţie: genul Mycoplasma.
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM POZITIVE • gros (15- 50 nm), darsimplu structurat: • straturi suprapuse de peptidoglican (40) şi • acizi teichoici ataşaţi 1.Acizi teichoici sunt heteropolimeri repetitivi • Rol - aderarea bacteriilor de celulele epiteliale ale mucoaselor • ex. streptococ ß hemolitic. • - antigene de suprafaţă • - captarea unor nutrienţi: ex. Mg. 2.Polizaharide de perete 3.Proteine de perete • Rar: proteina A a Stafilococului aureus • Lipidele sunt în cantitate mică (<1%); • excepţie Mycobacterium
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE • subţire (10 -15 nm)dar complex structurat • 1. Membrana citoplasmatica = interna • 2. Spatiul periplasmic cu Peptidoglicanul • 1- 2 straturi de peptidoglican, bidimensional • 3. Membrana externă • Stratul lipoproteic – schelet • LPZ
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE • Stratul lipoproteic • masă fosfolipidică fluidă, • proteine. • Proteinele majore (70%) şi minore (30%) • Proteine majore: Porine, Nonporine • Proteine minore (Outer membrane proteins - OMP) • NBP (nutrient binding protein), • PBP (penicillin binding protein), • FeBP (siderofor)
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE • 4. Lipopolizaharidul (LPZ) • Lipidul A • este endotoxina bacteriilor Gram negative • responsabilă de fenomenele toxice: • febră, diaree, greţuri, vărsături, scăderea tensiunii arteriale, • şoc endotoxic şi deces. • Componenta polizaharidică internă (core, sâmbure polizaharidic): • structurä comună la bacteriile Gram negative • Lanţurile oligozaharidice laterale: • proemină la suprafaţa bacteriei, ca spini şi sunt în număr mare • este antigenul O, responsabil de specificitate
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE • 5. Spatiul periplasmic • între membrana externă şi membrana citoplasmatică. • Deţine oligozaharide şi protein-enzime: • distrugerea bacteriilor bătrâne/moarte -autoliza • scindează substanţele nutritive cu G.M. mare, (polimeri organici) în monomeri: nutrienţi care pot pătrunde în bacterie.
FUNCŢIILE PERETELUI CELULAR • 1. Menţine forma • 2. delimitarea bacteriilor în 2 grupeGram. • 3. responsabil de acido - alcoolorezistenţă, • 4. creşterea şi diviziunea bacteriilor - primer pentru propria sinteză • 6. Intervine în nutriţia bacteriană • 7. Intervine în metabolismul bacterian, • sită moleculară • transportor de ioni • import şi export de proteine • 8. Este o barieră selectivă şi are rol protector.
Structura Peptidoglicanului Polimer • Peptide • Tipic 4 amino acizi, cross-lincati • Glicani • zaharuri • zaharuri • N-acetilglucosamina (NAG). • acid N-acetilmuramic (NAM). • NAG-NAM legaturi ß-1,4 • glicanul similar cu chitina
Proprietati particulare ale peptidoglicanului • contine aminoacizi in forma dextro- • Aminoacizi neobisnuiti: acid diaminopimelic • Sintetizat de o serie de enzime de la nivelul membranei citoplasmatice nu in ribozomi
sinteza peptidoglicanului • enzime = autolizine • 2 molecule carrier: • uridin difosfat • bactoprenol • Incepe in interiorul celulei • Constructia unitatii peptidice NAG-NAM • Traverseaza membrana, • Inserata in perete • PENICILLINA: blocheaza legaturile transpeptidice . • Se pierde rigiditatea viitorului perete
Efectul lizozimului si pencilinei • autolizine • taie peptidoglicanul • insereaza noul complex • “lipeste” taietura • Lizozimul – actioneaza similar. • secretii, mucoase • Mai activ pe Gram+ decat pe Gram- • Penicilina = antibiotic • blocheaza transpeptidarea • Nu are efecte secundare • De ce ??
Sferoplasti, Protoplasti, forme-L, Micoplasme • Celule fara perete celular. • Sferoplasti – daca provine din G (-) • Forme L = sferoplasti stabili • Protoplasti – daca provin din G (+) • rezista in mediu isotonic, • lizate in mediu hipotonic • Micoplasme = grup de bacterii fara perete. • Colonizeaza zone cu presiune osmotica crescuta • Ex.vagin. M. genitalium, M. pneumoniae.
G (+) & G (-) proprietati comune Lantul tetrapeptidic lateral: • Poz.1 - L-alanine • Legata de NAM • Poz.2 -D-glutamate • Poz.4 - D-alanine • Poz 3 ~ !!!!!!! • Majoritatea G(-) – acid diaminopimelic (DAP) • G (+) pot avea DAP, L-lizina, alti AA - L
COMPONENTE PARTICULARE ALE G(+) 1. Acizi teichoici si lipoteichoic/teichuronici • polimeri hidrosolubili • 2 tipuri : • acizi teichoici de perete • Legati de peptidoglican • acizi teichoici de membrana • Legati de membrana citoplasmatica • antigene majore de suprafata • Leaga ionii de Mg => celula.
COMPONENTE PARTICULARE ALE G(+) • 2.Polizaharidele • Zaharuri neutre: • manoza, • arabinoza, • galactoza, • rhamnoza, • glucozamina • Zaharuri acide • acid glucuronic • acid manuronic.
COMPONENTE PARTICULARE ALE G(-) • 3 componente – inafara stratului de peptidoglican • Lipoproteica, • Membrana externa (ME) + spatiul periplasmic • Lipopolizacharidul (LPZ) 1. Lipoproteina • proteina: 57 AA. • componenta lipidica • inserata ne-covalent in ME • Stabilizeaza structura
COMPONENTE PARTICULARE ALE G(-) 2. Membrana externa ≈ mb.citoplasmatica • Dublu strat fosfolipidic, • Proteine specifice • Majore: • a. porine de matrita • penetrante • Nespecifice => difuzie libera: molecule hidrosolubile • b. Porine inductibile - specificitate • Lamβ • c. Nonporine: OmpA • Se ancoreaza de peptidoglican • Receptorul pilului de sex in conjugarea bacteriana (F+F-) • Minore • transporta specific molecule mici • vitamina B12 • siderophori • Functioneaza similar sistemelor clasice de transport : NBP, FeBP, si PBP.
COMPONENTE PARTICULARE ALE G(-) 3. Lipopolizaharidul (LPZ) • Lipid A • Unitati dizaharidice (glucozamina) fosforilate • Acizi grasi cu lant lung • toxic = endotoxina bacteriilorG(-) • lizate • Polizaharidul • core = constant la toate speciile G(-). • antigen major de suprafata = antigenulO • Unitati repetitive terminale = specie specifice • Trizaharide lineare sau tetra-, pent- zaharide ramificate (tridimensionale) • confera specificitateaantigenica
COMPONENTE PARTICULARE ALE G (-) • Spatiulperiplasmic • Contine proteine • de legare • Enzime hidrolitice