METODOLOGÍA DE ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN HEREDITARIA

1. METODOLOGÍA DE ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN HEREDITARIA Dra. Adriana Mimbacas

2. CITOGENETICA HISTORIA CRONOLOGIA

3. 1866: Mendel describe las unidades fundamentales de la herencia • 1925: se descubre que la actividad del gen está relacionada con su posición en el cromosoma. • 1953: se propone la estructura en doble hélice del ADN • 1956: Tijo y col.: Nº real de cromosomas = 46 • 1959: Lejeune y col. describieron la primera aberración cromosómica numérica (síndrome de Down)

4. METODOS DE ESTUDIOS • inclusión en parafina y cortes con micrótomo, • técnica de aplastado • cultivo celulares "in vitro".

5. Existen múltiples factores que inciden en la obtención exitosa de un cultivo: • esterilidad, • medios de cultivos apropiados y sus aditivos, • dispositivos apropiados para el cultivo, • temperatura, • pH, • tensión del gas.

6. CULTIVOS IN VITRO Permiten obtener células en el estadio de metafases en la división mitótica

7. MORFOLOGÍA DE LOS CROMOSOMAS METAFÁSICOS • Se observan diferentes regiones: estrechamientos o constricciones. • Primarias • Secundarias

8. CONSTRICCION PRIMARIA HUMANOS: Centrómero localizado Centrómero difuso: holocéntrico (ej: insectos, arácnidos primitivos).

9. CONSTRICCIONES SECUNDARIAS: Estrechamientos constantes en posición y tamaño. En ciertos casos están íntimamente relacionadas al organizador nucleolar (evidenciadas por hibridización "in situ" con ARN ribosomal)

10. SATELITES segmento cromosómico presente entre el organizador nucleolar y el telómero (grupo D humano).

11. CONSTANTES CROMOSOMICAS Caracterizan a una especie. Se evidencian fundamentalmente en metafase. Las más importantes son:

12. número cromosómico el complemento somático diploide (2n) del ser humano es 46 formado por el aporte haploide de cada gameto (23 cr=n) (n23+n23=2n46).

13. tamaño cromosómico característico de cada especie. Se tiene en cuenta la longitud relativa con respecto a la suma de la longitud de un conjunto cromosómico haploide

14. morfología cromosómica • Presentan 2 brazos cromosómicos • Brazo corto: p • Brazo largo: q • Se clasifican de acuerdo a la posición del centrómero en: • Metacéntricos • Submetacéntricos • Acrocéntricos • Telocéntricos (no existen en el hombre)

16. BRAZO CORTO METACENTRICO CENTROMERO CENTRAL CENTROMERO BRAZO LARGO SUBMETACENTRICO BRAZOS DESIGUALES CENTROMERO ACROCENTRICO CENTROMERO EN POSICION SUBTERMINAL (UN BRAZO MUY CORTO) CENTROMERO Morfología cromosómica

18. CARIOTIPO Es un arreglo sistematizado de los cromosomas de una célula la cual es fotografiada y ordenada de acuerdo a las normas establecidas (tamaño, morfología). Es característico de un individuo y no cambia.

20. BANDEO G: • Bandas transversales claras y oscuras . • Localización fija, • Su nombre se debe a que la tinción se realiza con Giemsa • Corresponden a: • genes de replicación tardía ricas en AT (oscuras) • Genes de replicación tempranaricas en GC (claras)

24. 2 1 3

27. IDIOGRAMA: Es la representación en forma de diagrama del cariotipo y su construcción se realiza en base a valores promedios.

29. Los métodos de obtención e bandas cromosómicas son variados y pueden agruparse en: • métodos salinos, • enzimáticos (tripsina, pronasa), • técnicas varias en las que se incluyen sustancias como urea, permanganato de potasio).

30. Bandeo G: • Es el bandeo que se utiliza en la nomenclatura de los cariotipos

32. NOMENCLATURA Sigue ciertas normas establecidas por convención • Número de cromosomas seguidos de una coma • cromosomas sexuales, seguidos de una coma • alteraciones encontradas: • del = delección • t = translocación • ins = inserción • I = isocromosoma • r = anillo Seguidos de paréntesis cromosoma involucrado(s), bandas afectadas

33. ejemplos mujer normal: 46, XX hombre normal 46, XY mujer con alteración numérica: 45, XX, -8 hombre con alteración estructural: 46, XY, t(8,14) mujer con alteración estructural: 46, XX, del(9p12)

34. ALTERACIONES DEL COMPLEMENTO CROMOSOMICO El complemento cromosómico puede experimentar variaciones debido a: • modificaciones en el número de los cromosomas que lo constituyen: alteraciones numéricas • Modificaciones en la estructura de los cromosomas: alteraciones estructurales

35. ANOMALIAS NUMERICAS HETEROPLOIDIA: cualquier alteración en el número normal del cariotipo 1. HAPLOIDIA: 1 sólo juego crom. (monoploide) 2. POLIPLOIDIA: aumento por duplicación del complemento cromosómico entero (poliploide) 3. ANEUPLOIDIA: organismos o células que tienen uno o más cromosomas que el número básico de la especie.

36. Aneuploidía Monosomías: ausencia de un cromosoma del par de homólogos = 2n - 1 (viable 45 X0) Trisomías: presencia de más de un cromosoma en el par de homólogos = 2n +1 (producen abortos aunque existen algunas que son viables con diferente grado de sobrevida: tri 21, tri 13, tri 18, 47XXY) Mosaicos: coexistencia de células normales y alteradas

37. Anomalias numéricas

38. Síndrome de Down 47, XX, + 21

39. Síndrome de Patau: 47,XX, + 13

40. Síndrome de Edwards: 47, XY, +18

41. Síndrome de Turner 45, X0

42. Mujer tri-X: 47, XXX

43. Síndrome de Klinefelter: 47, XXY

45. ANOMALIAS ESTRUCTURALES

47. ALTERACIONES ESTRUCTURALES • Los cambios de la estructura cromosómica pueden ser agrupados en dos grandes categorías: • cromáticas cuando afectan a una sola de las cromátidas y • cromosómicas cuando afectan a ambas cromátidas en el mismo punto.

48. cambios submicroscópicos: mutación génica o puntual • cambios microscópicos: afectan el número y/o el arreglo de los loci de los genes pérdida de un segmento aumento de un segmento reordenamiento intracromosómico reordenamiento intercromosómico