CNR

1. CNR Caratterizzazione di olii essenziali e di estratti di natura polifenolica di ecotipi toscani della Flora Mediterranea: rosmarino, ginepro comune e carciofo Convenzione A.R.S.I.A e C.N.R. Istituto di Genetica Vegetale – Firenze Collaboratori alla ricerca Cooperativa Agricola e Forestale ”La Mausolea” Dipartimento Scienze farmaceutiche – Firenze Associazione Medici Scandicci –AMES Consulente aromatiere

2. O O O O O • Studi: • Analisi della variabilità geografica dei profili terpenici dell’olio essenziale • 2) Effetto dell’epoca di prelievo sul profilo terpenico • 3) Caratterizzazione di chemotipi di pregio

3. Rosmarino

4. Analisi della variabilità geografica dei profili terpenici di rosmarino 1: (-)-a-pinene 2: (+)-a-pinene 3: camphene 4: (+)-sabinene 5: (-)-sabinene 6: myrcene 7: (+)-b-pinene 8: (-)- b -pinene 9: b -phellandrene 10: (-)-limonene 11: (+)-limonene 12: p-cymene 13: g-terpinene 14: 1,8-cineol 15: linalool

5. Analisi della variabilità geografica dei profili terpenici di Rosmarino

6. Effetto dell’epoca di prelievo sul profilo terpenico di Rosmarino 60 (%) 30 (-)-a-pinene 0 (+)-a-pinene Estate Inverno Autunno Primavera EPOCA

7. Effetto dell’epoca di prelievo sul profilo terpenico di Rosmarino 30 20 (%) 10 (+)-b-pinene 0 (-)-b-pinene Estate Inverno Autunno Primavera EPOCA

8. Effetto dell’epoca di prelievo sul profilo terpenico di Rosmarino

9. Cloni di Rosmarino

10. Profili terpenici di piante di Rosmarino allevate in vivaio

11. Chemotipi di Rosmarino

12. Analisi HPLC/DAD HPLC/MS Foglie + azoto liquido macinate finemente foglie fresche/solvente 5g/50 mL100 % EtOH per 2 volte. Concentratione Ultrasuoni; 35 KHz per un totale di 115 min Il metodo analitico HPLC/DAD/MS applicato in questa ricerca consente di monitorare diverse classi di composti tutti di rilevante interesse ai fini della valutazione dell’attività antiossidante degli estratti. Mediante l’accoppiamento delle varie metodiche di analisi sono stati separati 34 analiti diversi di cui una parte è stata identificata come riportato in Tabella

13. Ginepro comune

14. Analisi della variabilità geografica dei profili terpenici di Ginepro comune

15. Cloni di Ginepro comune

16. Profilo Cromatografico registrato a 280 e 330 nm Dall’indagine HPLC/DAD/MS è stato possibile separare fino a 20 diversi componenti di cui circa 15 appartengono alla classe dei flavonoidi in particolare derivati della isoscutellareina e ipolaetina. Fra questi composti sono presenti glucoramnosidi e pentosidi Complessivamente questa frazione flavonoidica del frutto può esercitare una attività antiossidante la cui valutazione sarà oggetto di ricerche future.

17. Carciofo

18. 11 mAU 2000 330 nm Foglie 4 1750 1500 1250 9 1000 7 750 1 14 13 500 5 2 250 0 0 5 10 15 20 25 30 35 min 11 330 nm mAU 500 400 Brattee 300 4 200 1 6 8 100 12 5 3 10 2 0 0 5 10 15 20 25 30 35 min 330 nm 11 mAU 2000 Capolini 1500 1000 4 14 1 500 0 0 5 10 15 20 25 30 35 min 330 nm mAU 11 2000 Gambi 1500 1000 4 1 6 10 500 0 10 15 20 30 0 5 25 35 min • Ciascun estratto e/o frazione ottenuta dopo frazionamento è sottoposto ad analisi HPLC-DAD per la valutazione quali-quantitativa del profilo polifenolico. Gli estratti sono stati analizzati con l’impiego di una colonna 150  3.9 mm, i.d. 4 m, Nova Pak C18 (Waters Corporation, Massachusetts USA, Waters) termostatata a 26°C. • Profilo cromatografico, registrato a 330 nm, di estratti idroalcolici ottenuti da diverse parti di carciofo. • Composti polifenolici: • 1. Ac. 1-O-caffeilchinico; • 2. Ac. 3-O-caffeilchinico; • 3. Ac. 4-O-caffeilchinico; • 4. Ac. clorogenico; • 5. Ac. caffeico; 6. Ac. dicaffeoilchinico; • 7. Luteolina 7-O-rutinoside; • 8. Luteolina 7-O-glucuronide; • 9. Luteolina 7-O-glucoside; • 10. Ac. dicaffeilchinico; • 11. Ac. 1,5-O-dicaffeilchinico; • 12. Apigenina 7-O-glucuronide; • 13. Luteolina malonilglucoside; • 14. Luteolina.

19. Tabella riepilogativa dei dati quantitativi delle due cultivar esaminate Composizione fenolica: Violetto di Toscana (V) and Terom (T). I dati sono la media di tre determinazioni sono espresse rispetto a peso fresco.

20. Caratterizzazione di olii essenziali e di estratti di natura polifenolica di ecotipi toscani della Flora Mediterranea: carciofo, rosmarino e ginepro comune Convenzione A.R.S.I.A e C.N.R. Istituto di Genetica Vegetale – Firenze CNR Prelievo campioni da diversi ecotipi toscani Analisi chimica Analisi sensoriale Elaborazione dati Caratterizzazione di chemotipi di pregio per la produzione di fitoterapici e prodotti agro-alimentari.

21. Indagini future • - Caratterizzazione variazioni epigenetiche • Studi di ereditabilità • Identificazione di marcatori chimici per la selezione di chemotipi di pregio

22. CollaborazioniIstituto Genetica Vegetale sez. Firenze, Consiglio Nazionale delle RicercheDott.ssa Cristina Vettori, Dott. Maurizio Capuana, Valentina Martini, Cinzia Mensuali.Dipartimento di Scienze Farmaceutiche, Università degli Studi di FirenzeProf. Franco Francesco Vincieri, Prof.ssa Nadia Mulinacci, Dott.ssa Catia Giaccherini, Prof.ssa Annalisa Romani, Dott.ssa Patrizia Pinelli, Valentina Rotellini.Donato Creti aromatiere, Direttore Tecnico Enrico Giotti S.p.A, Firenze.Associazione Medici di Scandicci (AMES)Dott. Massimo Tilli. Dott.ssa Enrica Campanini, Dott. Ferruccio Innocenti.Cooperativa Agricola e Forestale "LA MAUSOLEA" della Casa Generalizia degli Eremiti Camaldolesi in Toscana. Dott. Raffaello Resti. Caratterizzazione di olii essenziali e di estratti di natura polifenolica di ecotipi toscani della Flora Mediterranea: carciofo, rosmarino e ginepro comune Convenzione A.R.S.I.A e C.N.R. Istituto di Genetica Vegetale – Firenze CNR