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Cultures in vitro 1S. But du TP. Antisepsie. Asepsie. Travail en zone stérile. Mise en culture. Sources. But du TP:. Mettre en culture des fragments de St Paulia dans un ou des milieux nutritifs. La difficulté:.
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Cultures in vitro 1S But du TP Antisepsie Asepsie Travail en zone stérile Mise en culture Sources
But du TP: Mettre en culture des fragments de St Paulia dans un ou des milieux nutritifs La difficulté: Ne pas mettre en culture d'autres êtres vivants que le St Paulia (bactéries, champignons) D ’où la nécessité: -d'une stérilisation de la surface des fragments à implanter et des milieux de culture. C’est l’antisepsie -d ’empêcher les microorganismes de re-contaminer la culture après antisepsie. C’est le travail en asepsie.
Antisepsie Les moyens utilisés: antiseptiques (pour les plants) ou désinfectants (pour les outils) • L ’eau de Javel (hypochlorite de sodium). On ajoute un agent mouillant (détergent) à la Javel ou on utilise un produit du commerce (Domestos). • L’alcool • Le chauffage à la flamme ou le flambage des outils plongés dans l’alcool).
Zone protégée Asepsie • Lavage des mains et avant bras • Cheveux attachés (l’idéal est le port d’un bonnet) • Port du masque • Travail sous le cône stérile produit par un bec Bunsen
Rinçage 3 2 C B Domestos et fragment végétal A E 4 1 3 2 C B 3 2 4 1 C 4 1 Organisation de la zone stérile D Alcool et outils Rinçage 3 Rinçage 2
Sources Clonage de Saint Paulia: http://pagesperso-orange.fr/davidsandra/saintpaulia/X.htm