1 / 27

Komplement

Komplement. Štruktúra a funkcia komplementu. Aktivácia a regulácia. Metódy stanovenia. História komplementu. objavený v 1893 Julesom Bordetom a nazvaný „alexín“ v 1899 ho Paul Ehrlich premenoval na komplement (kompletizuje funkciu protilátok)

redford
Download Presentation

Komplement

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Komplement Štruktúra a funkcia komplementu. Aktivácia a regulácia. Metódy stanovenia

  2. História komplementu • objavený v 1893 Julesom Bordetom a nazvaný „alexín“ • v 1899 ho Paul Ehrlich premenoval na komplement (kompletizuje funkciu protilátok) • netvorí ho jedna látka ale komplex rôznych molekúl

  3. Nomenklatúra • zložky komplementu sa označujú písmenom C + číslo v poradí, v akom boli objavené • C1 má 3 podjednotky (C1q,2xC1r a 2xC1s) • fragmenty proteolytického štiepenia zložiek sa označujú „a“ (menší fragment) a „b“ (väčší fragment) – výnimka C2 • ďalšia degradácia fragmentu b sa označuje c, d, ... • zložky komplementu resp. komplex zložiek označené nad svojím názvom vodorovnou čiarou majú enzýmovú aktivitu (napr. C4b2b) • zložky označené ako faktory (faktor B, D, P, H, I) patria k alternatívnej ceste aktivácie alebo k regulačným proteínom • fragment so stratenou biologickou aktivitou sa označuje na začiatku „i“ (napr. iC3b) • niektoré zložky majú označenie podľa funkcie (MBP, ...)

  4. Zložky komplementového systému

  5. Zložky komplementového systému

  6. Zložky komplementového systému

  7. Aktivácia komplementu • všetky zložky okrem faktora D sa syntetizujú v neaktívnom stave • aktivácia je kaskádový proces na základe limitovanej proteolýzy • amplifikácia signálu • aktivácia je prísne regulovaná • 3 cesty aktivácie • klasická (imunokomplexy, agregáty IgG al. IgM,...) • lektínová (Man, NAcGlc, NaAcMan, Glc na povrchu) • alternatívna (baktérie, huby, vírusy, nádory, IgA, IgE,...) • od vytvorenia C3b je zvyšok cesty rovnaký • výsledok – tvorba MAC

  8. Aktivácia komplementu

  9. Klasická cesta aktivácie • objavená ako prvá • závislá na protilátkach a ich reakcii s antigénom • spúšťaná tiež retrovírusmi, mykoplazmami, E. coli, Klebsiella pneumoniae, pneumokokovým polysacharidom, polyaniónmi (heparín, protamín, dextran) • dochádza k časovému posunu naštartovania o 4-5 dní • CRP má niektoré podobné vlastnosti ako protilátky (opsonizuje cudzorodé častice a spúšťa aj klasickú cestu aktivácie) a vzniká do 1-2 dní

  10. Klasická cesta aktivácie • protilátka naviazaná na antigén mení svoju konformáciu • C1q sa viaže na protilátku a spôsobí konformačnú zmenu • zmena sa prenesie na C1r, ktorý sa autokatalyticky pretransformuje na aktívny enzým – serínovú proteázu • C1r štiepi C1s a robí ju aktívnou

  11. Klasická cesta aktivácie • C1s štiepi najprv C4 na C4a (anafylatoxín) a C4b • C4b má exponovanú tioesterovú väzbu, ktorá ho kovalentne naviaže na blízke bunkové povrchy • C2 sa naviaže na C4b a je štiepený C1s na aktívnu serínovú proteázu C2a, ktorá zostáva v komplexe s C4b

  12. Klasická cesta aktivácie • C4b2a (C3-konvertáza) štiepi C3 na C3a (anafylatoxín) a C3b (hlavný opsonín) • C3b podlieha konformačnej zmene s expozíciou tioesterovej väzby a následne sa viaže na povrchy • časť C3b sa viaže na C4b2a a vytvára C5-konvertázu (C4b2a3b)

  13. Klasická cesta aktivácie • C4b2a3b štiepi C5 na C5a (anafylatoxín) a C5b • tu sa končí enzýmové pôsobenie • C5b je labilný a bez C6 sa do 2 min inaktivuje

  14. Klasická cesta aktivácie • C5b naviaže C6 a následne C7 • prechádza zmenami štruktúry, ktorých výsledkom je expozícia hydrofóbnych častí a integrácia do membrán • ak reakcia prebieha na imunokomplexe dochádza k lýze „nevinne sa prizerajúcich buniek“ • C5b67 viaže jednu molekulu C8, dôjde k reštrukturalizácii a vytvoreniu asi 10 Åotvoru

  15. Klasická cesta aktivácie • posledný krok je polymerizácia 10-16 molekúl C9 • vytvorenie otvorov s priemerom 70-100 Å • strata homeostázy, prienik enzýmov • C5b6789n je označovaný ako MAC (membrány atakujúci komplex

  16. Usmrtenie buniek

  17. Tioesterová väzba

  18. Lektínová cesta aktivácie • objavená ako posledná • makrofágy po pohltení baktérií produkujú cytokíny, ktoré indukujú tvorbu zápalových proteínov v pečeni • kolektín MBP (manose binding protein) sa viaže na sacharidy vo forme tetraméru alebo hexaméru (analóg C1q) • následne sa viažu MASP-1 a MASP-2 (MBP asociated serine protease sú analógy C1r a C1s) • zvyšok lektínovej cesty je rovnaký s klasickou cestou • proteíny lektínovej cesty sú fylogeneticky staršie

  19. Alternatívna cesta aktivácie Schopnosť aktivácie ihneď po vstupe cudzorodých buniek • agregovanými IgG, IgA a IgE • polysacharidmi (dextrán, zymozán, inulín, agar) • LPS (G-), kys. teichoovou (G+) • polyaniónmi, DNA • vírusmi • hubami (kvasinky, plesne) • parazitmi • mnohými nádorovými bunkami Vyžaduje sa prítomnosť C3b (môže byť aj hydrolyzovaná forma C3(H2O) resp. C3(NH3))

  20. Alternatívna cesta aktivácie • C3b viaže faktor B (analóg C2) • stáva sa terčom proteázy – faktora D • štiepenie na Ba a serínovú proteázu Bb • C3bBb (C3-konvertáza) štiepi C3 za vzniku ďalších C3bBb ale aj C3bBbC3b (C5-konvertáza) • stabilizácia pomocou properdínu (syntetizovaný neutrofilmi) • ďalší postup je rovnaký

  21. Zopakovanie aktivácie

  22. Regulačné proteíny komplementu

  23. Regulácia komplementu

  24. Receptory pre fragmenty komplementu CR1 a CR3 charakterizujú profesionálny fagocyt

  25. Látky, tvoriace kanály

  26. Vrodené poruchy komplementu SLE systémový lupus erythematosus, CHPI chronické pyogénne infekcie

More Related