1 / 23

Szerzett thrombophilia

Szerzett thrombophilia. Muszbek László Debreceni Egyetem, Orvos és Egészségtudományi Centrum, Klinikai Kutató Központ. Szerzett thrombophiliák. 1. Postoperatív állapot 2. Terhesség, ösztrogén therápia, orális anticoncipiens 3. Malignus megbetegedés 4. Immobilizáció

rene
Download Presentation

Szerzett thrombophilia

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Szerzett thrombophilia Muszbek László Debreceni Egyetem, Orvos és Egészségtudományi Centrum, Klinikai Kutató Központ

  2. Szerzett thrombophiliák 1. Postoperatív állapot 2. Terhesség, ösztrogén therápia, orális anticoncipiens 3. Malignus megbetegedés 4. Immobilizáció 5. Billentyű protézis 6. Varicosus vénák 7. Pitvar fibrillatio 8. Syncumar necrosis 9. Heparin indukálta thrombocytopenia 10. Anti-phospholipid syndroma

  3. Antiphospholipid syndroma (APS) Olyan autoimmun betegség, melyben a foszfolipid-ellenes (?) antitestek direkt szerepet játszanak a thrombosis, a magzati károsodásés egyéb klinikai tünetek kialakulásában. 1/ Primaer APS (önállóan, más kísérő megbetegedések nélkül), 2/ Secondaer APS (SLE-vel más autoimmun vagy daganatos megbetegedéssel, illetve egyéb patológiás állapotokkal együtt fordul elő).

  4. Az APS klinikai kritériumai 1/ Vasculáris thrombosis (artériás, vénás, kis erekben objektív módszerrel diagnosztizálva) 2/ Terhességi morbiditás morfológiailag normál fetus megmagyarázatlan halála a 10. héten vagy utána, b) Morfológiailag normál újszülött koraszülése a 34. hét előtt ecclampsia, vagy súlyos preecclampsia vagy placentális insufficiencia miatt, c) 3 vagy több nem megmagyarázott spontán abortus a 10. hét előtt (anyai anatómiai vagy hormonális rendellenesség, szülői kromoszóma rendellenesség ki lett zárva).

  5. Az APS laboratóriumi kritériumai Lupus antikoaguláns (LA): Legalább 12 hetes időközökben két vagy több alkalommal az ISTH SSC lupus antikoaguláns/FL-függő antitestek albizottsága iránymutatása szerint diagnosztizálva. Antikardiolipin antitest (ACA): IgG és/vagy IgM izotípusú, közepes vagy magas titerben legalább 12 hetes időközökben két vagy több alkalommal standardizált ß2 glikoprotein I-dependens ELISA-val kimutatható ACA. ß2 glikoprotein I ellenes antitest Kimutatása a fenti kritériumok szerint.

  6. Az LA és más anti-foszfolipid antitestek bizonyos fehérjéken lévő epitópok ellen irányulnak, leggyakrabban - ß2 glikoprotein I - protrombin ellen. Az epitópok anionos foszfolipidekhez, vagy negatívan töltött felületekhez történtő kötődés hatására exponálódnak.

  7. Lupus antikoaguláns (LA): 1/ Foszfolipid függő alvadási tesztekkel interferáló immunglobulinok (IgG/IgM vagy mindkettô). 2/ Nem alvadási faktorok, hanem fehérje-foszfolipid komplex ellen irányulnak (epitóp a fehérjén). 3/ In vitro anticoagulans, in vivo thrombosis hajlamot jelenthet.

  8. A keringő antikoagulánsok osztályozása - specifikus neutralizáló nem neutralizáló - nem specifikus lupus antikoaguláns paraproteinek FDP - globális heparinszerű anyagok

  9. Vérzékenység LA esetében csak ha együtt jár: - hypoprotrombinaemiával - thrombocytopeniával - thrombocyta diszfunkcióval - uraemiával

  10. Az LA laboratóriumi diagnosztikájának kritériumai 1/ FL-függő alvadási teszteknél megnyúlt alvadási idő, 2/ A megnyúlást okozó inhibitor kimutatása keveréses vizsgálattal, 3/ Az inhibitor FL-függésének kimutatása, - relatív korrekció emelt mennyiségű FL-lel, - a hatás fokozódása a FL hígításával 4/ Ha a diagnózis bizonytalan egyéb coagulopathiak kizárása (faktor hiány, alvadási faktor-ellenes inhibitor).

  11. Az LA diagnózisának fázisai 1. Megnyúlt foszfolipid függő alvadási teszt. 2. A megnyúlást inhibitor okozza. 3. Az inhibitor foszfolipid ellen irányul. 4. Ha szükséges faktorhiány, vagy faktor ellenes inhibitor kizárása.

  12. Minta kezelés Citráttal alvadásgátolt vér centrifugálása (2500 rpm) során thrombocyta szegény plazmát (PPP) nyerünk. Maradék thrombocyta eltávolítása: - ismételt centrifugálás - 0.22 m-es porusú szűrőn filtrálás A kontroll plazmát ugyanígy kell kezelni! A plazmát nem szabad fagyasztani!

  13. 1. Megnyúlt foszfolipid függő alvadási teszt. - alvadási idő szignifikánsan hosszabb mint a kontroll - APTI - LA szenzitív APTI - kaolin alvadási idő - hígított Russel Vipera méreg idő (RVMI)

  14. LA esetén a ritkán előforduló protrombin idő megnyúlás okai: - igen nagy mennyiségű FL ellenes antitest van a mintában - hypoprothrombinaemia

  15. 2. inhibitor kimutatása APTI, LA szenzitív APTI: keveréses vizsgálatok (1:1, 4:1) Inkorrigábilis APTI megnyúlás: 1/ APTIkeverék - APTIkontroll ›5 sec 2/ APTIkeverék - APTIkontroll APTIbeteg Hígított Russel Vipera Méreg Idő: beteg-kontroll plazma keverék RVMI kontroll plazma RVMI x 100 (Rosner index) ›15 ›1.2

  16. A klasszikus LA azonnal ható inhibitor. Néhány plazmában azonban az LA aktivitás időfüggést mutat (gyenge, ill. progresszív inhibitor). Ha a keverés korrigál a vizsgálatot a keverék, ill. a keverő kontroll plazma 1 órás 37 C-on történő inkubációja után meg kell ismételni.

  17. 3. Megerősítő tesztek az alvadási idő nyúlik a FL csökkentésével -hígitott thromboplasztin idő -RVMI hígított foszfolipiddel -APTI hígított foszfolipiddel az alvadási idő rövidül a FL növelésével -thrombocyta neutralizációs teszt (PNP) -neutralizáció hexagonális foszfolipidekkel -RVMI megerősítô tesztje

  18. az alvadási idő nyúlik a FL csökkentésével - hígított thromboplasztin idő (hPI) Beteg hPI Kontroll hPI az alvadási idő rövidül a FL növelésével - neutralizáció hexagonális foszfolipidekkel alv.idő FL nélkül – alv.idő hex.FL-del ≥ 8 sec - RVMI megerősítő tesztje Beteg plazma RVMI Beteg plazma RVMI PL-del ›1.2 ›1.2 A gátlás FL-függésének bizonyítása

  19. LA diagnosztikájának algoritmusa APTI, Kivizsgálás LA-ra LA-érzékeny APTI megnyúlt APTI nem-prolongált LA- érzékeny APTI APTI keverék LA kizárva korrigál nem korrigál hPI APTI keverék 1 óra 37 C-on ° ‹ 1.2 › 1.2 korrigál hexagonális LA FL teszt LA kizárva negatív Faktor pozitív meghatározás Egyéb gátlótest

  20. Foszfolipid ellenes antitest direkt kimutatása ELISA technikával • - anti-kardiolipin antitest (ACA) • screen (?), IgG, IgM, IgA közepes • vagy magas titerben (>40 GPL vagy MPL*, vagy >99 percentilis) • ß2 glikoprotein I-gyel reagáló antitest (IgG, IgM) (3-10%-ban csak ez pozitív). • *1 g/mL affinitás kromatográciával tisztított • antitest kardiolipin kötő aktivitása = 1 egység.

  21. Az anti-kardiolipin ELISA elve Reakció Reakció elegy Anti-kardiolipin antitest (szérumban) Peroxidáz-jelzett anti-humán immunglobulin 2-glikoprotein I (szérumban) Kardiolipinnel fedett felület

  22. ELISA a 2-glikoprotein I ellenes auto-antitest kimutatására Reakció Reakció elegy Peroxidáz-jelzett anti-humán immunglobulin Anti-2-glikoprotein I antitest (szérumban) 2-glikoprotein I (szérumban) 2-glikoprotein I a felületen

  23. Antikardiolipin antitestek vizsgálata lupus anticoagulans pozitív mintáknál ACA ScreenIgMIgGIgA 1. ++ - ++ ++ 2. +++ +++ +++ - 3. - - + - 4. ++ +++ +++ - 5. - - - - 6. +++ + +++ ++ 7. - - - - 8. - ++ - - 9. +++ - +++ - 10. - - - ++

More Related