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MYCOPLASMA IST2. 2009. 6. 10. 윤 경 숙. MYCOPLASMA 검사법. 혈청부. 미생물. M.pneumonia Ab IgG,Ig M - ELISA 법 , 현증진단 ( 외부수탁 ) Mycoplasma Ab - PHA 법 , 유무파악 M.Pneumonia PCR - PCR 법 , 유무파악. Mycoplasma IST2 -Culture -Identification(U.u, M.h) -Indicative enumeration -Susceptibility.
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MYCOPLASMA IST2 2009. 6. 10. 윤 경 숙
MYCOPLASMA 검사법 혈청부 미생물 M.pneumonia Ab IgG,Ig M - ELISA 법 ,현증진단 (외부수탁) Mycoplasma Ab - PHA 법 ,유무파악 M.Pneumonia PCR - PCR 법 ,유무파악 Mycoplasma IST2 -Culture -Identification(U.u, M.h) -Indicative enumeration -Susceptibility
MYCOPLASMA 분류 OrderⅠ :Mycoplasmatales FamilyⅠ:Mycoplasmataceae GenusⅠ:Mycoplasma (M.Hominis외104species) GenusⅡ:Ureaplasma (U.Urealyticum외6species)
MYCOPLASMA의 특성 Very small likely virus 125nm Culture is difficult Anaerobes Cause of Chronic inflammation Absence cell wall resistant to β–lactam anti Pleomorphic microorganism Slow growth
PATHOGENIC ABILITY Increases with the number of partners Increases during pregnancy Pathogenic in the lower genital tract when the rate is over 104 *CCU/㎖ Pathogenic at any rate in the upper genital tract
OB PD Association with OB,PD 저출생 체중 호흡 곤란 증후군 폐렴 만성 폐질환 뇌 수막염 기관지폐 이형성증 선천적 감염 이환율 만성 중추신경계 감염 융모양막염 조산 조기양막파수 자연유산 습관성 유산 불임 사산 산욕열 산욕패혈증
GY URO Association with GY,URO 비 임균성 요도염 골반염 질염 백 대하증 과민성 방광,방광염 자궁 내막염 난관염 난관난소 농양 난소암,자궁암 만성 전립선염 비 임균성 요도염 부고환염 남성 불임증 전립선의 증식
1 2 2 3 Specimens Sperm (1cc 채취 냉장보관 Saline 1/10희석 R1 Vial에 200㎕ 주입) Sperm (1cc 채취 냉장보관 Saline 1/10희석 R1 Vial에 200㎕ 주입) Vaginal Swab Urethral Swab EPS (R1 Vial에 면봉을 섞음) Urine Gastric juice Amniotic fluid (R1 Vial에200㎕ 주입)
Mycoplasma IST2 R1 vial Lyophilized R2 vial 22cupules Strip 냉장보관 2~8℃
TRAY에 관한 설명 DOT JOS OFL ERY TET CIP AZI CLA PRI O Uu Mh Uu Mh > 10 > 10 4 4 Mycoplasma IST2 24h 24h/48h IDENTIFICATION SUSCEPTIBILITY 1 0.12 1 1 2 4 1 4 2 8 4 4 8 4 8 2 4 I II III I Identification of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis II Enumeration 104 CFU / specimen III Resistance testing to 9 antibiotics
SUSCEPTIBILITY TESTS Macrolide Erythromycin Azythromycin Clarithromycin Josamycin Pristnamycin Tetracycline 9 Antibiotics Tetracycline Doxycycline Quinolones Ciprofloxacin Ofloxacin
PRINCIPLE • R1(Mycoplasma Preparayion) • R2 (Urea-Arginine Borth) U. Urelytcum + Urea M.Horminis + Arginine Phenol red Acid (-) Yellow Alkali (+) Red 3. Three antibiotics + One antifungal agent 특이적인 배양가능 4. 동정, 반정량 계수,9가지 항생제 감수성 검사 결과
PROCEDURE 1 • 검체준비 • Urethral, vaginal swab과 sperm의 1/10희석액의 200ul를 R1(수송배지)에 넣어 잘 섞는다. • 용액 R1을 R2병에 옮긴다. • 침전물이 완전히 녹을 때까지 shaking한다. • (검체는 R1 배지에서 실온 5시간, 냉장 48시간 보관가능)
PROCEDURE 2 • 검사용 Strip에 접종 & 배양 • 준비한 R1+R2 용액을 22개의 검사용 cupules에 55ul씩 분주한다. • 분주한 각 cupules에 mineral oil을 분주한다. • 36℃±2℃에서 24시간 ~48시간 배양한다. • 남은 수송배지 병은 위 strip과 함께 배양하여 control로 사용가능
결과판독 • 색깔이 진 분홍색으로 변할 경우 양성 • U. u ≥10⁴ CFU 만 24시간 배양 후 판독 그 외 cupules은 모두 48시간 후 판독 • 반 정량 검사의 경우 연한 분홍색은 음성 (-) 동정 및 감수성 검사의 경우 연 분홍색은 양성 (+)
ID & Enumeration Exam Result ID & Enumeration Exam
ID & Enumeration ≤104CUF/specimen Result ID & Enumeration ≤104CUF/specimen
ID & Enumeration ≥104CUF/specimen Result ID & Enumeration ≥104CUF/specimen
Susceptibility Exam Result Susceptibility Exam
주의 사항 Reading 시간 엄수(24hrs,48hrs) A yeast contamination (Only C. albicans at 10*6 CFU/ml) is responsible for a tubidity medium (not Color change) All Resistant -If there is a contamination,it is probably with a bacteria (like Staphylococcus saprophyticus, Proteus at 10*6CFU/ml, color change) in these case it is recommended to do a dilution of the medium
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