Interpretación de las Pruebas de Susceptibilidad Antibacterianas

1. Interpretación de las Pruebas de Susceptibilidad Antibacterianas Dr. Marco Luis Herrera H División de Microbiología Laboratorio Clínico Hospital Nacional de Niños “Dr. Carlos Sáenz Herrera”

2. Mecanismos de Acción de los Antibacterianos • Inhibidores de la Síntesis de Pared Celular • Alteradores de la membrana celular • Inhibidores de la síntesis de ácidos nucleicos • Inhibidores de la síntesis de proteínas • Antimetabolitos

3. Terminología • Espectro antimicrobiano • Rango de actividad de un antibiótico contra los diferentes microorganismos • Antibióticos de espectro reducido • Antibióticos de amplio espectro • CMI • Concentración Mínima de Antibiótico capaz de inhibir el crecimiento visible de un microorganismo • Es un valor eminentemente de laboratorio, que se extrapola al paciente e indica la mínima concentración de antibiótico que debe ser alcanzada en el sitio de la infección para lograr inhibir el crecimiento del agente • CMB • Concentración Mínima de un antibiótico capaz de matar el 99.9% de las células de un inóculo inicial

4. Terminología • Break Point • Punto de corte • Diferente para cada antibiótico • Es un valor matemático • Depende de la bio disponibilidad y la cinética del antibiótico • Estructura química del antibiótico • Puede variar según la cepa bacteriana • Se determina por un consenso de expertos, por lo que se revisan cada cierto tiempo • Tablas de la CLSI • Para la ampicilina el punto de quiebra es igual a 8 ug/ml • CMI arriba de 8 ug/ml: resistente • CMI abajo de 8 ug/ml: sensible

6. Resistencia Bacteriana • Resistencia natural • Predecible • Pseudomonasaeruginosapresenta resistencia natural a: • Pencilinas naturales • Ampicilina y amoxicilina • Septran • Cefalosporinas de primera y segunda generación • Ceftriaxone y Cefotaxime • Resistencia adquirida • Impredecible • Pseudomonasaeruginosacon resistencia a ciprofloxacina o ceftazidime o imipenem • Recombinación bacteriana • Plásmidos

7. Mecanismos de ResistenciaAntibiótica • Cuatro mecanismos: • Falta de penetración del antibiótico a través de la membrana exterior • Impermeabilización • Activación de bombas de eflujo • Espacio periplásmico • Fallo en la unión con las proteínas fijadores de penicilinas (PBPs) • Hidrólisis del Antibiótico • Producción de Beta Lactamasas • Simples o de amplio espectro (ESBL o BLEA) • Producción Enzimática • CloranfenicolAcetilTransferasa (CAT) • AminoglucosilTransferasa ( AAT)

8. Pared CelularBacterias Gram Negativo

9. Beta Lactamasa

10. Hidrólisis de un Anillo Beta Lactámico CH3 CH3 R-CONH S CH3 CH3 R-CONH S B-Lactamasa N N O O O CO2 Penicilina H Acido Penicilinoico

12. Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana • Que hay que controlar? • La cepa, el antibiótico y el medio de cultivo • Métodos manuales • Información cualitativa (S,I,R) • Bauer and Kirby • Uso de discos impregnados de antibióticos • Información cuantitativa (CMI / CMB) • Dilución en Agar o Caldo • Título Mínimo Inhibitorio • Epsilon Test • Etest • Métodos automatizados • Vitek • MicroScan • Información semicuantitativa • <1 ug/ml

13. Difusión en Agar

14. Concentración Mínima Inhibioria

15. ETest

16. Vitek

21. Terminología • Sensible • Cuando una cepa bacteriana se inhibe en su crecimiento, por la concentración de droga alcanzada, durante el curso normal de un tratamiento • Resistente • Cuando no se puede alcanzar, en el sitio de la infección, la cantidad de droga necesaria para inhibir el crecimiento bacteriano • Intermedio • Para cepas no sensible, pero que existe la posibilidad de realizar una concentración fisiológica de droga en el sitio de la infección

22. Resistente Concent. Droga PMAD Sensible Tiempo