Tema 25. Conjugación

1. Tema 25. Conjugación pelos o fimbrias pilus pelo F o pelo sexual receptora o hembra donadora o macho proceso unidireccional (Hayes, 1953)

2. 25. Conjugación • • Conjugación: descubrimiento y el proceso • • Factor F o factor de fertilidad: tipos sexuales • • Tipos de conjugación: • F+ X F-, Hfr X F-, F’ X F- • • Mapa genético por conjugación interrumpida • - mapa circular • - distintas estirpes Hfr • • Mapa de ligamiento

3. conjugación 108 células Lederberg y Tatum, 1946 (P. Nobel 1958)

4. tubo en U tubo en U pasa el medio pasan moléculas no pasan células no nutrición cruzada no transformación (1944)

6. pareja específica pareja efectiva

7. Factor F (Hayes): • - independiente de marcadores cromosómicos (se pierde y se transfiere en mayor proporción) • no un gen con dos alelos (aumentan F+ en función del tiempo) • F es un plásmido: círculo de DNA de doble cadena con replicación independiente del cromosoma

8. factor F o factor de fertilidad inserción en el cromosoma transferencia replicación Factor F

9. sfa parte de F en cromosoma (afines al factor sexual) Tabla: tipos conjugantes

10. F+ X F- 5’ puente de conjugación receptora donadora

11. F+ to Hfr F+ pasa a Hfr 1/1000 células F+ pasan a ser Hfr Hfr: alta frecuencia de recombinación (Cavalli-Sforza, 1950)

12. inserción de F: F+ pasa a Hfr ¡un único sobrecruzamiento!

13. Hfr X F- Hfr X F- dos sobrecruzamientos recombinación homóloga no recíproca

14. frecuencia de transferencia de material genético en conjugación F+ X F+ o F+ X Hfr: no hay contacto F+ X F- => genera un F+ (1/5) y baja recombinación (1/107) Hfr(1/103)X F- => receptora F- y alta tasa de recombinación (1/104)

15. Hfr genera un F’ Hfr genera un F’

16. excisión: Hfr genera un F’ puede generarse también una estirpe sfa

17. F’ X F-

18. merodiploide o merocigoto o diploide parcial Proceso: sexducción o F-ducción Regulación génica: dominancia/recesividad en células n, cis/trans Cartografiado: dos genes en un F’, es porque están juntos en cromosoma

19. Mapa genético por gradiente de transferencia (conjugación o apareamiento interrumpido, Jacob y Wollman 1955) Mapa por conjugación interrumpida

21. a mayor tiempo entran marcadores (genes) nuevos

22. transferencia secuencial y lineal de genes de Hfr a F- La conjugación es un proceso de transferencia de material genético unidireccional y orientada

23. porcentaje máximo gradiente de transferencia Mapa por conjugación interrumpida

25. mapa circular (Jacob y Wollman, 1957) orden relativo de genes siempre igual

26. distintas estirpes Hfr difieren en el lugar y orientación de la inserción de F (distinto origen y dirección de transferencia)

27. mapa genético de E. coli por conjugación interrumpida, 1963 hoy 100 min

28. Mapa de ligamiento: análisis de la frecuencia de recombinación selección de Leu+ (marcador tardío) y entre estos determinar los diferentes tipos de recombinantes ejemplo: problema 8.9

29. 5% -> 5 um leu-arg 5% -> 5 um arg-met ≈90% ≈0,25%

30. orden de los genes a----------------b-c ó a ----------------c-b ??? Partimos de dos estirpes: a+b+c- y a-b-c+ Cruzamientos recíprocos, con ambas opciones (a-bc y a-cb) Determinar recombinantes a+b+c+ Orden en función del número de recombinantes obtenidos en los dos cruzamientos recíprocos determinación del orden de genes cercanos: a partir de frecuencias relativas de recombinantes en cruzamientos recíprocos ejemplo: problema 8.7

31. Tabla: resultados conjugación

32. problemas capítulo 8 problemas: 7-13 aprox. 1h de clase