230 likes | 442 Views
Sveučilište u Zagrebu Prehrambeno-biotehnološki fakultet. LIN- LOG KINETIKA ( seminarski rad iz kolegija “Matematičko modeliranje i optimiranje bioprocesa”). Ana Tušek 121/BT-BI. Matematički model. opis složenih biokemijskih procesa u mikroorganizmima
E N D
Sveučilište u Zagrebu Prehrambeno-biotehnološki fakultet LIN- LOG KINETIKA (seminarski rad iz kolegija “Matematičko modeliranje i optimiranje bioprocesa”) Ana Tušek 121/BT-BI
Matematički model • opis složenih biokemijskih procesa u mikroorganizmima • određivanje enzimske kinetike, pokusi in vitro • aproksimativni kinetički formati
Brzina enzimske reakcije • funkcija aktivnosti enzima, koncentracije metabolita i kinetičkih parametara • pojednostavljenje ili
Parametri lin-log modela • koeficijenti elastičnosti • definicija iz teorije analize regulacije metaboličkih putova (MetabolicControlAnalysis, MCA) koeficijent regulacije toka koncentracijski koeficijent regulacije
Lin-log kinetika metaboličkih puteva • uvrštavanjem koeficijenata elastičnosti i referentnih stanja u izraz za lin-log kinetiku: • za metaboličke puteve: i jedinični vektor Ex i Ec matrice elastičnosti zavisnih i nezavisnih metabolita x/x0 vektor relativnih koncnetracija zavisnih metabolita c/c0 vektor relativnih koncnetracija nezavisnih metabolita [e/e0] matrica relativnih količina enzima
Primjer: Lin-log format Michaelis-Menten kinetike • Michaelis-Menten kinetika: • koeficijent elastičnosti: • lin-log aproksimacija:
Određivanje koeficijenata elastičnosti (1) • iz podataka za koncentracije metabolita • metoda se bazira na masenim bilancama metabolita i na pretpostavci da je koncentracija enzima konstantna u vremenu prikupljanja eksperimentalnih podataka
Određivanje koeficijenata elastičnosti (2) • konstantna količina enzima: • bilance metabolita uz relativne koncentracije i relativne brzine reakcija:
Određivanje koeficijenata elastičnosti (3) • uvrštavanjem izraza za relativnu brzinu u bilancu mase: • integracija
Određivanje koeficijenata elastičnosti (1) • integracija bilanci • primjer za M1:
Određivanje koeficijenata elastičnosti (2) • opis sustava bilanci:
Usporedba koncentracijskih profila-minimizacija pogreške bilanci
Usporedba koncentracijskih profila-minimizacija pogreške koncentracija
Zaključci • Lin-log format kinetičkog modela pokazuje dobro opisuje promjene vrijednosti bilanci pojedinog metabolita tijekom vremena. • Usporedba rezultata simulacije pokazuje da lin-log kinetika ne opisuje dobro koncentracijske profile metabolita tijekom vremena. • Na osnovu vrijednosti koeficijenata elastičnosti može se zaključiti da najjače aktivacijsko djelovanje ima supstrat M3 na brzinu rekcije r4, dok inhibicijski efekt pokazuje AH na brzine reakcija 4 i 6
Literatura • Heijnen, J.J., van Gulik, W.M., Shimizu, H., Stephanopoulos, G. (2004) Metabolicfluxcontrolanalysisobbranchpoints: an improvedapproach to obtainfluxcontrolcoefficientsfromlargeperturbationdata.MetabolicEngineering, 6, 391-400. • Heijnen, J.J. (2005) Approximativekinticformatsused in metabolicnetworkmodeling. Biotechnology and bioengineering, 91(5), 534-545. • Kresnowati, M.T.A.P., van Winden, W.A., Heijnen, J.J. (2005) Determination of elasticities, concentrations and fluxcontrolcoefficientsfromtransient metabolite dana usinglinlogkinetics. MetabolicEngineering, 7, 142-153. • Mendes, P., Kell, D.B. (1998) Non-linearoptimisation of biochemicalpathways: application to metabolicengineering and paramterestimation. Bioinformatics, 14(10), 869-883. • Link, H., Weuster-Botz, D. (2007) Steady state analysis of metabolic pathways: comparing the double modulation method and the lin-log approach. MetabolicEngineering, 9, 433-441. • Nikerel, I.E., van Gulik, W.A., Heijnen, J.J.(2007) Linear-logarithmickinetics-a frameworkformodleingkinetics of metabolicreactionnetworks. Simulationnews E, 17(1), 19-26. • Visser, D., Heijnen, J.J.(2003) Dynamic simulation an metabolic re-design of branched pathway using linlog kinetics. MetabolicEngineering, 5, 164-176. • Wu, L. Wang, W., van Winden, W.A., van Gulik, W.M., Heijnen, J.J.(2004) A new frameworkfortheestimation of controlparameters in metabolicpathwaysusinglin-log kinetics. EuropeanJournal of Biochemistri, 271, 3348-3359.