Cosa si intende per validazione

1. Approccio semplificato nella procedura di validazione del metodo per la ricerca dei residui di fitofarmaci nei prodotti di origine vegetale

2. Cosa si intende per validazione La conferma, sostenuta da evidenze oggettive, che i requisiti relativi ad una specifica utilizzazione o applicazione prevista sono stati soddisfatti. Il processo di validazione ha quindi l’obiettivo di dimostrare la validità di un metodo, mediante la valutazione di tutti i parametri utili a tale scopo (caratteristiche tecniche, applicabilità, performance analitiche, ecc.). I metodi analitici vengono solitamente valutati sulla base di tre caratteristiche affidabilità applicabilità praticabilità Quando vi sia la possibilità di scegliere diversi metodi, l’applicabilità di una determinata prova su un ampio spettro di matrici e la praticabilità del metodo all’interno del laboratorio, possono diventare preponderanti sulle caratteristiche di affidabilità del metodo.

3. Procedure per la validazione di un metodo interno • Chiarire gli obiettivi e i risultati attesi in modo da individuare i parametri da valutare ai fini della validazione Un metodo interno risulta pertanto come il compendio di una progettazione di cui la validazione costituisce il passaggio finale

4. Procedure per la validazione di un metodo interno: Caratteristiche degli analisti possesso di: • ottima padronanza della tecnica analitica • elevata esperienza professionale • conoscenza delle tecniche statistiche coinvolte nella determinazione dei parametri

6. Quando validare un metodo analitico

18. Procedura di validazione: Verificare i parametri appena visti nell’abbinamento matrice/parametro su almeno tre livelli di concentrazione

19. Decreto ministeriale del 27/08/2004prodotti fitosanitari: limiti massimi di residui delle sostanze attive nei prodotti destinati all'alimentazione.A) agrumi - Pompelmi- limoni- limette- mandarini (comprese le clementine)- arance- Pomeli- altri (tra cui bergamotti, cedri, tangerini, chinotto, arance amare, mapi, tangeli) Totale 14 matrici

20. Decreto ministeriale del 27/08/2004prodotti fitosanitari: limiti massimi di residui delle sostanze attive nei prodotti destinati all'alimentazione.Ortaggi a radice e tubero - Bietole rosse (o da orto)- carote- sedani rapa- rafano- topinambur- pastinaca- prezzemolo a grossa radice- ravanelli- Salsefrica (detta anche barba di becco)- patate dolci- Rutabaga (o navone)- rape- Igname- altri (tra cui cicorie da radice, scorzoneria, sisari, detti anche schervole, barba gentile, detto anche cardoncello) Totale 17 matrici

21. Decreto Ministeriale del 27/08/2004Prodotti fitosanitari: limiti massimi di residui delle sostanze attive nei prodotti destinati all'alimentazione. • Matrici complessive circa 250

22. Principi attivi determinabili con la tecnica multiresiduo • Circa 200

23. In ottemperanza alla norma ISO 17025 la validazione richiederebbe • a) 200 principi attivi • b) 250 matrici • c) 3 livelli di concentrazione • d) 3 ripetizioni • Supponendo di aggregare 20 P.A. per volta • 10 * 250 * 3 * 3 = 22500 prove

24. Risulta evidente che un simile approccio si dimostra inapplicabile per strutture come le nostre preposte al controllo dei residui dei prodotti fitosanitari negli alimenti È opportuno pertanto ricorrere a metodi di validazione alternativi ed efficaci semplificando opportunamente le procedure

25. Approccio semplificato nella procedura di validazione del metodo per la ricerca dei residui di fitofarmaci nei prodotti di origine vegetale • Metodo multiresiduo per l’analisi di antiparassitari in prodotti vegetali: estrazione con solvente e purificazione in fase solida

31. Combinazione matrice/principio attivo – valori in µg/kg Principi attivi Matrici: mele, arance, zucchine

32. In ottemperanza alla norma ISO 17025 la validazione richiede • a) 18 principi attivi • b) 3 matrici • c) 3 livelli di concentrazione • d) 3 ripetizioni • Aggregando i principi attivi in una unica miscela • 1 * 3 * 3 * 3 = 27 prove (minimo)

34. Dati grezzi - mele Valori normalizzati sul Recupero %

36. Dati grezzi - arance Valori normalizzati sul Recupero %

38. Dati grezzi - zucchine Valori normalizzati sul Recupero %

39. Azossistrobina - arance

43. Azossistrobina – parametri statistici

44. Distribuzione parametri statistici rispetto al totale Azossistrobina – raffronto parametri statistici