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Classe Bio 2

Classe Bio 2. Briday Justine Joly Sandrine Lazzarin Nathalie. La chromatographie d'exclusion. Principe. La chromatographie d'exclusion permet la séparation des molécules à travers un gel poreux en fonction du poids moléculaire de la protéine. En fonction: -de la taille

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Presentation Transcript

  1. Classe Bio 2 • Briday Justine • Joly Sandrine • Lazzarin Nathalie

  2. La chromatographie d'exclusion

  3. Principe • La chromatographie d'exclusion permet la séparation des molécules à travers un gel poreux en fonction du poids moléculaire de la protéine. • En fonction: -de la taille • -de la forme • -poids moléculaire

  4. La phase stationnaire: elle est constituée de billes de polysaccharide La phase mobile:elle est constituée d'un éluant (eau,tampon pH),il sert à entraîner les molécules du mélange. Il existe 2 types de phases

  5. Passage à travers la colonne • Les grosses molécules sont éluées en premier car leur volume est supérieur à celui du volume des billes. • Les petites molécules sont exclus en dernier de part leur petit volume,elles subissent des frottements,leur migration est freinée.

  6. Durée de rétention dans la colonne • La durée de séjour dans la colonne augmente lorsque le poids moléculaire de la molécule diminue

  7. Choix du type de gel • Le choix du type de gel est effectué selon le domaine de fractionnement.

  8. Qu'est ce que le domaine de fractionnement? • C'est la gamme des masses molaires possibles pour lesquelles il y a : -diffusion partielle -diffusion totale -englobement de la masse molaire de la molécule

  9. Les différents volumes • Ainsi on note plusieurs volumes lors de la chromatographie: -le volume d'élution de la molécule -le volume d'exclusion du gel (volume d'élution d'une molécule non retardée par le gel) -le volume total du gel qui correspond au volume des billes.

  10. Conclusion • La chromatographie d'exclusion va permettre la séparation de différentes molécules selon leur taille.

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