A procura dos genes de resistência ao Mal-das-folhas

1. A procura dos genes de resistência ao Mal-das-folhas Dominique GARCIA CIRAD UMR-Développement et Amélioration des Plantes Universidade Estadual de Santa Cruz (Ilhéus-BA)

2. Desafio para a seleção de plantas perenes resistentes a pragas fúngicas • Selecionar resistências duráveis Parlevliet (2002). Euphytica. 124: 147-156.

3. Ciclo biológico do M. ulei

4. Como se identificar os indivíduos resistentes 1/ sobre o fenótipo de cada planta

5. 2/ Estudos da segregação dos carácters de resistência nas famílias WxWam Esquema do programa de melhoramento da seringueira para a obtenção de clones resistentes ao Mal-das-folhas Parents (Am or WAm) with resistances tested in fields and controled infectious conditions : FDR, FX, CD, CDC, MDX, MDF Hight rubber yield clones W Manual pollinations WAm x WAm and WAm x Am crosses W x WAm and W x Am crosses T 0 CES, Evaluation Seedling Field T 1 - 4 CCPE, Small Scale Clone Field T 5 - 11 CCGE, Large Scale Clone Field T 12 - 22 Clones recommandations

6. 3/ Mapeamento genético dos carácteres de resistência PB260 x FX3899 195 F1 descendentes 717 marcadores moleculares (RFLP, AFLP, SSR, isoenzimas) Teste de resistência ao M. ulei em condições controladas Quantitative trait loci (QTL) detecção Lespinasse et al. (2000). Theo. Appl Genet. 100: 975-984.

7. 4/ isolamento e caracterização dos genes relacionados com uma resistência durável : « o caso do clone MDF180 » Le Guen et al. (sumetido para publicação). Plant Disease.

8. 4/ isolamento e caracterização dos genes relacionados com a resistência durável : « o caso do clone MDF180 » Le Guen et al. (sumetido para publicação). Plant Disease.

9. A planta, o fungo e os sintomas PB 314 0 6 12 24 48 72 96h p.i. 10 16 22 28 34 40 46 52 58d p.i. MDF 180 Histologic illustrations from Sambugaro et al., 2003

10. Intron and Exon in Eukaryotic Cells exon exon exon intron intron 5’ 3’ 5’ 3’ DNA promotor stop codon start codon Transcription mRNA Processing cap poly A tail Splicing Intron deleted mature mRNA To cytoplasm Take place in nucleus Juang RH (2004) BCbasics

11. cDNA Is Reverse Transcribed from mRNA 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ Baltimore, Dulbecco, Temin (1975) mature mRNA poly A tail Reverse transcription TTTT 3’ 5’ RNA hydrolysis DNA polymerase 3’ CCC 5’ GGG 3’ Juang RH (2004) BCbasics

12. cDNA Library Genes in expression mRNA Reverse transcription Complete gene cDNA In the case of SALB resistance genes isolation, the ClontechTM SSH* technology was used to separate over expressed genes --------------- The cDNAs were sequenced and compared to NCBI data bank accessions Vector: Plasmid Juang RH (2004) BCbasics

13. Seqüências obtidas na biblioteca PB314 e MDF180 separadas em grupos funcionais. 0- 72 horas apos inoculação

14. Genes de stress/defesa identificados nas bibliotecas PB314 e MDF180

15. CIRAD MICHELIN BRASIL – CMB programa Plantação Michelin BA and MT, CIRAD UESC, CIRAD-MPL, CIRAD-Kourou CIRAD-MPL, CIRAD-Kourou Plantação Michelin MT Plantação Michelin BA and MT, CIRAD CIRAD-Kourou, Plantação Michelin BA UNICAMP, CIRAD, Plantação Michelin MT CIRAD-Kourou, Plantação Michelin BA, UEFS