EXTRACCION DE ADN DE PLATANO - GRUPO 2B

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL INFORME DE LABORATORIO EXTRACCIÓN DEL ADN DE UN PLÁTANO CURSO: Biotecnología INTEGRANTES: Segura Arias, Renato Dylan Diaz Zamudio, Iker Mathias Champi Ccallo, Jorge Mora Pino, Jose Joaquin Condori Casas, Alexander DOCENTE: Blgo. Soto Gonzales, Hebert Hernan Ilo, 11 de julio del 2023

2. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL ÍNDICE 1. INTRODUCCIÓN……………………………………………………………3 2. OBJETIVOS………………………………………………………………….4 3.1 OBJETIVO GENERAL…………………………………………………4 3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………..4 3. MARCO TEÓRICO………………………………………………………….4 4. EQUIPOS Y MATERIALES…………………………………………………6 5. PROCEDIMIENTO………………………………………………………….9 6.1 Paso 1……………………………………………………………………9 6.2 Paso 2……………………………………………………………………10 6.3 Paso 3……………………………………………………………………10 6.4 Paso 4……………………………………………………………………10 6.5 Paso 5……………………………………………………………………10 6. RESULTADOS………………………………………………………………..11 7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES……………………………15 8. CUESTIONARIO…………………………………………………………….16 9. BIBLIOGRAFÍA ……………………………………………………………..17

3. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL INTRODUCCIÓN El ácido desoxirribonucleico o ADN es el material genético de los seres vivos, ya que es la técnica nos permite adquirir el material genético de un ser vivo con el objetivo de examinarlo y analizarlo en un momento posterior, La extracción de ADN se realiza con la finalidad de hacer estudios genéticos, de forense y biología molecular. Para los estudios genéticos más profesionales, se requieren protocolos especiales con diversos pasos y materiales. Sin embargo, podemos hacer una extracción de ADN a partir de materiales que tenemos en casa, o que podemos hacer en el laboratorio de biotecnología de la Universidad Nacional de Moquegua. El aislamiento del ADN del plátano es usando el protocolo con sal común y detergente es una alternativa simple, fácil, rápida, económica y no contaminante. Se basa en las características fisicoquímicas del ácido nucleico.

4. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL ● Demostrar que las células del plátano portan ADN. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ● Extraer dicho ADN. ● Demostrar que puede extraerse el ADN de un plátano. MARCO TEÓRICO ADN El ADN es una molécula que se encuentra en las células y que contiene las instrucciones genéticas para el desarrollo, funcionamiento, crecimiento y reproducción de todos los organismos vivos conocidos. El ADN está compuesto de nucleótidos, que son los componentes básicos de la molécula, cada nucleótido consta de un azúcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una de cuatro bases nitrogenadas: adenina (A), citosina (C), guanina (G) o timina (T).

5. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Funcion del ADN La función del ADN es almacenar y transmitir la información genética en los seres vivos. El ADN es una molécula larga y en forma de hélice que se encuentra en el núcleo de las células de los organismos vivos, contiene la secuencia de nucleótidos que codifica las instrucciones para el desarrollo, el funcionamiento y el mantenimiento de un organismo. Estructura del ADN La estructura del ADN se compone de dos cadenas polinucleotídicas que se enrollan alrededor de un eje central formando una doble hélice. Cada cadena está formada por una secuencia de nucleótidos. Un nucleótido está compuesto por tres componentes básicos: un grupo fosfato, un azúcar llamado desoxirribosa y una base nitrogenada. La estructura de doble hélice del ADN es muy importante, ya que permite que se replique de manera precisa durante la división celular. Durante la replicación, las dos cadenas de ADN se separan y cada una sirve como molde para sintetizar una nueva cadena complementaria. Además de su función en la replicación celular, el ADN también es responsable de transmitir la información genética de una generación a otra. Extracción de ADN en frutas La extracción de ADN en frutas es un proceso que permite aislar el material genético presente en las células de las frutas, en este caso el ADN (ácido desoxirribonucleico). Ocurre debido a los fosfolípidos en el jabón, rompiendo la membrana celular de las células de las frutas.

6. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL EQUIPOS Y MATERIALES EQUIPOS Tubo de ensayo Vaso precipitado Mortero

7. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Colador Probeta Cuchillo

8. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Balanza analitica MATERIALES Plátano Sal de cocina

9. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Detergente Alcohol 70° Gasa PROCEDIMIENTO El procedimiento para realizar el aislamiento del ADN sigue los siguientes pasos: Paso 1: preparación de solución salina-jabonosa Preparamos una solución salina-jabonosa compuesta con 100 ml de agua (media taza), 10 ml de detergente (1 cucharada) y 13 gr de NaCl o sal de cocina (una cucharada).

10. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Paso 2: preparación de las frutas Si usamos plátano, lo pelamos y cortamos en cubos pequeños, luego lo trituramos en un mortero Paso 3: adición de la solución de sal y detergente a la fruta En el mortero con la fruta triturada (o en la bolsa con las fresas) vertemos la solución salina-jabonosa y continuamos el proceso de romper las frutas. Opcionalmente, podemos colocar el preparado en un baño de María a 37ºC durante 15 minutos para facilitar la extracción. Paso 4: separación del material sólido, proteínas y lípidos . Pasamos por un colador o papel de filtro para retirar el grueso de la sopa de fruta y luego, a través de la gasa o algodón, hasta obtener 5 ml del líquido filtrado en un tubo de ensayo o 50 ml en un frasco. El jugo de fruta salado-jabonoso se cuela y se filtra para quitar los sólidos, proteínas y lípidos a la solución acuosa del ADN. Paso 5: precipitación del ADN por acción del alcohol Sobre el jugo de fruta, vertemos lentamente por las paredes del tubo de ensayo etanol o isopropanol frío. Dejamos reposar unos minutos. Debe aparecer una capa blanquecina gelatinosa.

11. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Si introducimos una varilla de vidrio o un palito de madera, con movimientos circulares podremos recuperar el ADN enrollado en la varillas RESULTADOS

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15. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL La extracción exitosa del ADN del plátano se logró utilizando una combinación de métodos químicos y físicos para romper las membranas celulares y liberar el ADN contenido en las células de esta fruta. Los resultados obtenidos fueron consistentes con lo esperado, lo cual implica que se logró obtener una solución acuosa de ADN que no contiene proteínas ni lípidos, y además se observó la precipitación del ADN en forma de una capa gelatinosa de color blanquecino. CONCLUSIONES ● Se logró extraer ADN del plátano utilizando una combinación de métodos químicos y físicos. ● El uso de papel de filtro y algodón ha posibilitado la separación de la sustancia sólida, las proteínas y los lípidos de la solución acuosa del ADN mediante un proceso de filtrado. ● El ADN extraído del plátano es visible a simple vista y tiene una apariencia similar a una sustancia pegajosa y filiforme. RECOMENDACIONES ● Es fundamental considerar que la calidad y pureza del ADN obtenido pueden diferir según la calidad y frescura del plátano empleado. Se aconseja emplear plátanos maduros y frescos con el fin de lograr resultados óptimos. ● Durante el procedimiento de trituración del plátano, se recomienda evitar la formación de burbujas de aire, ya que estas pueden afectar negativamente la subsiguiente precipitación del ADN. ● La extracción de ADN en el plátano es un proceso importante que permite a los científicos comprender la estructura genética de esta fruta, investigar sus genes y proteínas.

16. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL CUESTIONARIO ¿Cuál es el papel de la trituración? La trituración realiza un papel crucial en el procedimiento de obtención de ADN, ya que contribuye a la ruptura de las células y a la liberación del material genético contenido en su interior. ¿Cuál es el papel de la adición del detergente? El detergente desempeña un papel importante en el aislamiento y purificación del ADN. Cuando se desea extraer ADN de células o tejidos, es necesario romper las membranas celulares y los núcleos para liberar el material genético. ¿Cuál es el papel de la sal cloruro de sodio? El cloruro de sodio se emplea para crear una solución salina con propiedades jabonosas que facilitan la ruptura de las células y la liberación del ADN, el cloruro de sodio se utiliza en la preparación de soluciones tampón que se utilizan para mantener un pH constante durante la manipulación del ADN. ¿Para qué sirve el alcohol en la extracción del ADN? El alcohol se utiliza en el proceso de extracción del ADN para precipitar y aislar el ADN de otros componentes celulares, la adición de alcohol en la extracción de ADN ayuda a separar el ADN de las proteínas y otros contaminantes presentes en la muestra.

17. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL BIBLIOGRAFÍA Martín, L. M. (2015 ). extracción dna . http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%A Dnez%20Mart%C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf. REYES, J. D. (2019 ). BIOLOGÍA . https://blogsaverroes.juntadeandalucia.es/iesdoctorajosefadelosreyes/practica- de-biologia-extraccion-del-adn-de-un-platano/.