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Jornadas de Endocrinología de Zona Norte Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología

Jornadas de Endocrinología de Zona Norte Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología Dr. Gustavo Maccallini 21 de Agosto de 2014. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología. Evolución de las mediciones hormonales Características de los métodos utilizados en endocrinología

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Jornadas de Endocrinología de Zona Norte Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología

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  1. Jornadas de Endocrinología de Zona Norte Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología Dr. Gustavo Maccallini 21 de Agosto de 2014

  2. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos utilizados en endocrinología • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  3. Evolución de las Mediciones Hormonales • Desarrollo de métodos competitivos • Desarrollo de métodos no competitivos que utilizan Acs. Monoclonales. Mejoramiento en especificidad • Incorporación de señales no radiactivas de alta actividad específica. Aumento de sensibilidad • Introducción de sistemas automáticos de procesamiento

  4. Sistemas de Medición • Marca Radioactiva: RIA/IRMA • Marca Enzimática: EIA/ELISA • Marca Fluorescente: FIA/IFMA • Marca Quimioluminiscente QLIA/ICMA

  5. Métodos de Medición • Hormonas Proteicas: Métodos no competitivos • Hormonas Esteroideas: Métodos competitivos

  6. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos Sensibilidad Especificidad Diferencia entre métodos • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  7. Métodos de Medición de Hormonas • Sensibilidad: Mínima concentración medible • Especificidad: Reconocimiento de la molécula a medir.

  8. Fase sólida TSH Ac. Captura Ac. Señal Señal Ensayos Inmunométricos Sistemas IMA

  9. Métodos de Medición de TSH • 1º Generación : 1 - 2 uUI/ml. • 2º Generación : 0.1 - 0.2 uUI/ml. • 3º Generación: 0.01 - 0.02 uUI/ml.

  10. Relación entre TSH y T4L TSH mUI/L 1000 100 10 4 Rango de Referencia de TSH 1.0 0.4 0.1 0.01 Indetectable Hipotiroidismo Rango de Referencia de T4L Hipertiroidismo T4L 1.8 ng/dl 0.7 Spencer, JCEM 70: 453, 1990

  11. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos Sensibilidad Especificidad Diferencia entre métodos • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  12. Reacción Cruzada en la Medición de 17 OH P4 • 17 OH Pregnenolona Sulfato 2.00 % • 17 OH Pregnenolona 0.79 % • Progesterona 0.39 % • 11 Desoxicortisol 0.28 %

  13. Reacción Cruzada en 17 OH Progesterona en Recién Nacidos Extracción con Eter Etílico

  14. Reacción Cruzada en la Medición de Cortisol • Aldosterona 0.01 % • Cortisona 0.6 % • 11Desoxicortisol 0.25 % • 21 Desoxicortisona 0.04 % • Dexametasona 0.53 % • Prednisolona 46 % • Prednisona 3.1 % • Progesterona 0.15 %

  15. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos Sensibilidad Especificidad Diferencia entre métodos • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  16. Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol Mujeres que reciben terapia con gonadotrofinas (Rep. Asist)Mu 0,1 1 10 100 1000 Log de la Concentración de Estradiol (pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

  17. Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol Mujeres que reciben terapia con gonadotrofinas (Rep. Asist)Mu Mujeres PremenopáusicasMu 0,1 1 10 100 1000 Log de la Concentración de Estradiol (pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

  18. Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol Mujeres que reciben terapia con gonadotrofinas (Rep. Asist)Mu Mujeres PremenopáusicasMu Mujeres Postmenopáusicas/ HombresMu 0,1 1 10 100 1000 Log de la Concentración de Estradiol (pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

  19. Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol Mujeres que reciben terapia con gonadotrofinas (Rep. Asist)Mu Mujeres PremenopáusicasMu Mujeres Postmenopáusicas/ HombresMu Niños Prepuberales/Púberesu 0,1 1 10 100 1000 Log de la Concentración de Estradiol (pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

  20. Desafíos Técnicos en la Medición de Estradiol Mujeres que reciben terapia con gonadotrofinas (Rep. Asist)Mu Mujeres PremenopáusicasMu Inmunoensayo Directo 1° Gen LC/MS-MS Inmun. Directo 2° Gen Mujeres Postmenopáusicas/ HombresMu MS-MS con Mayor vol . Inmun. Indir. Niños Prepuberales/Púberesu 0,1 1 10 100 1000 Log de la Concentración de Estradiol (pg/ml) Rosner W, JCEM 2013, doi:10.1210, 1-12

  21. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos Sensibilidad Especificidad Diferencia entre métodos • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  22. Evaluación de 16 métodos para la medición de TSH Thienpont L, ClinChem 56:6; 902-911, 2010

  23. Fase sólida TSH Ac. Captura Ac. Señal Señal Medición de TSH en Suero Los fabricantes desarrollan ensayos con diferentes AcsMonoclonales La especificidad de los mismos determinan qué isoformas son detectadas en suero Preparación internacional (IRP 80/558) obtenida de hipófisis humanas

  24. Thi

  25. Thienpont L, ClinChem 56:6; 902-911, 2010

  26. Thienpont L, ClinChem 56:6; 902-911, 2010

  27. Thienpont L, ClinChem 56:6; 902-911, 2010

  28. Thienpont L, ClinChem 56:6; 902-911, 2010

  29. Programas de Armonización

  30. Programas de Estandarización

  31. Porqué es importante Estandarizar/Armonizar métodos • Seguridad del paciente • Guías Clínicas • Confianza del paciente • Registros electrónicos de resultados

  32. Desafíos en el Laboratorio de Endocrinología • Evolución de las mediciones hormonales • Características de los métodos utilizados en endocrinología • Interferencias - Limitaciones • Variabilidad de resultados

  33. Interferencia Analítica (IFCC) • Error sistemático de la medición, causado • por un componente de la muestra, que • por sí mismo no produce una señal en el • sistema de medición

  34. Minimizando el riesgo de interferencia Puntos clave • Sustancias presentes en muestras de pacientes pueden interferir en inmunoensayos. Falsos resultados elevados o disminuidos • Interferencias endógenas pueden poner en riesgo el cuidado del paciente, resultados falsos a) No son detectados en general por procedimientos de control de calidad del laboratorio b) Son reproducibles dentro del sistema de análisis c) Puede dar resultados posibles d) Son relativamente raros

  35. Minimizando el riesgo de interferencia Puntos clave • La industria diagnóstica ha introducido estrategias robustas para reducir los interferentes • Los laboratorios deben incluir a la robustez en la selección de plataformas analíticas

  36. ¿Cuándo sospechamos Interferencia ? • Cuando existe discordancia entre resultados de Laboratorio • Cuando existe discordancia entre resultados y datos clínicos de los pacientes

  37. Interferencias en los Inmunoensayos • Reacción cruzada • Autoanticuerpos • Anticuerpos Heterófilos/HAMA • Factor Reumatoideo

  38. Interferencias en los Inmunoensayos • Reacción cruzada • Autoanticuerpos • Anticuerpos Heterófilos/HAMA • Factor Reumatoideo

  39. Interferencias por Auto Anticuerpos

  40. Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas • La prevalencia en la población general varía en función del método utilizado para su detección ( Interferencia ~ 2 %) • Aumenta la prevalencia en enfermedad tiroidea autoinmune • La frecuencia de detección es mayor para T4 que T3 • La concentración fluctúa en el tiempo • La interferencia genera resultados falsamente elevados Després N, ClinChem 1998; 44: 440-454

  41. Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas • T4 total : 15,7 ug/dl (5,5-12,5) Quimio DPC • TSH : 2,47 uUI/ml (0,5-5) “ “ • AFM : 1/400 (hasta1/400) Aglutinación

  42. Datos Clínicos • Mujer. 52 años. Diabética tipo II • Antecedentes de tratamiento por hipotiroidismo • Sin tratamiento en los últimos 10 años • Clínicamente eutiroidea • Medicación: metformina

  43. Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas • T3 : 124 ng/dl (70-200) Quimio DPC • T4 total : 14,8 ug/dl (5,5-12,5) “ “ • T4 libre : > 6 ng/dl (0,8-1,9) Análogo 1 paso • TRH/TSH : 1,9/ 17,2 / 15,2 uUI/ml

  44. Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas • T4 libre (análogo de 1 paso) : > 6 ng/dl (0,8-1,9) • T4 Libre (eq. de diálisis) : 1,3 ng /dl (0,8-2,7) • Inmunoprecipitación con PEG-25% : 45 % (hasta 5%) • Diagnóstico: Anticuerpos Anti T4

  45. Anticuerpos Anti Hormonas Tiroideas • T4 Libre Centaur : Mayor de 12 ng/dl (Un paso) • TSH Centaur: 4,52 µUI/ml • T4 Libre Architect : 1,13 ng/dl (Dos pasos) • T4 Libre Centaur – 2º Muestra: 9,0 ng/dl

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