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REACCIONES DE AGLUTINACIÓN

REACCIONES DE AGLUTINACIÓN. Dr. Juan Carlos Aldave Médico Especialista en Inmunología Clínica y Alergología Comité de Inmunodeficiencias Primarias Asociación Latinoamericana de Inmunología. Objetivos de la práctica: Repasar los fundamentos de la respuesta inmunitaria de anticuerpos

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REACCIONES DE AGLUTINACIÓN

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Presentation Transcript

  1. REACCIONES DE AGLUTINACIÓN Dr. Juan Carlos Aldave Médico Especialista en Inmunología Clínica y Alergología Comité de Inmunodeficiencias Primarias Asociación Latinoamericana de Inmunología

  2. Objetivos de la práctica: • Repasar los fundamentos de la respuesta inmunitaria de anticuerpos • Conocer métodos de diagnóstico mediante reacciones de aglutinación

  3. BACTERIAS parásitos HONGOS cáncer virus

  4. Sistema inmunitario (sistema de defensas)

  5. SISTEMA INMUNITARIO • INMUNIDAD INNATA • INMUNIDAD ADAPTATIVA • Linfocitos T • Linfocitos B→ ANTICUERPOS: inmunidad humoral LINFOCITO B

  6. ¿Cómo se activan los linfocitos B? • Entrada del antígeno • Reconocimiento del antígeno: linfocitos B con gran variedad de receptores para antígenos • Activación del linfocito B • Independiente de linfocitos T • Dependiente de linfocitos T • Diferenciación, secreción de anticuerpos

  7. RECONOCIMIENTO DEL ANTÍGENO • Receptor del linfocito B: inmunoglobulina M/D de superficie

  8. Aglutinación • Agrupamiento de partículas o células provistas de antígeno luego de una reacción antígeno/anticuerpo (aglutinina) • Aplicación: • Determinación de grupo sanguíneo (lo vimos en la práctica anterior) • Diagnóstico de ciertas enfermedades infecciosas

  9. No aglutina Aglutina

  10. Práctica - materiales • Antígeno “O” • Antígeno “H” • Paratyphico “A” • Paratyphico “B” • Antígeno Brucella en placa • Placa de vidrio • Palillos mondadientes • Pipeta de 5, 10, 20, 40, 100 μL • Solución fisiológica • Gradilla y tubos de vidrio 13x100

  11. Práctica - procedimiento • Limpiar con algodón y alcohol, obtener sangre • Colocar 40 μL de la muestra dentro de los círculos de la placa de vidrio, preparar controles • Añadir sobre: • Primer círculo → 1 gota de antígeno O • Segundo círculo → 1 gota de antígeno H • Tercer círculo → 1 gota de paratyphico A • Cuarto círculo → 1 gota de paratyphico B • Quinto círculo → 1 gota de antígeno Brucella

  12. Práctica - procedimiento • Rotar cuidadosamente la placa de vidrio, evitando que se mezclen las muestras, por un aproximado de 4 minutos • Leer en el aglutinoscopio buscando la aglutinación producida en cualquiera de los antígenos

  13. Práctica - procedimiento • Aglutinación cuantitativa: • Dispensar 40, 20, 10, 5 μL de la muestra en los círculos de la placa de vidrio, tantas veces como antígenos a usar • Luego proceder a agregar el antígeno que ha aglutinado en la prueba cualitativa a todos los círculos que contiene las diferentes cantidades de muestras • Proceder como en la prueba anterior en la búsqueda de aglutinación

  14. Práctica - resultados • POSITIVO: presencia de aglutinación • NEGATIVO: ausencia de aglutinación El título será la máxima dilución donde ocurra la aglutinación

  15. Práctica - fundamento Anti-H Salmonella induce producción de anticuerpos frente a sus antígenos (Ej. anti-H)

  16. Práctica - fundamento H H H Anti-H H H Los anticuerpos en el suero del paciente aglutinarán el reactivo del antígeno H H

  17. “Que Dios los cuide mucho y bendiga su familia y trabajo” GRACIAS

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