Interactie tussen Verticillium tricorpus en Verticillium longisporum bij bloemkool

1. Interactie tussen Verticillium tricorpus en Verticilliumlongisporumbij bloemkool Cindy Lecluyse Promotor: Bart Quartier Stagementoren: Soraya França Sarah Van Beneden Stagegever: Prof. dr. ir. Monica Höfte

2. Inhoudsopgave • Verticillium • In vitro pathogeniciteit • In vivo pathogeniciteit + interactie • Detectie • Species-Specifieke PCR • Tellen van aantal kiemkrachtige microscleroten in grond • Besluit

3. Verticillium • Veroorzaakt vasculaire aandoeningen • De belangrijkste Verticilliumspp. in dit werk: • V. longisporum= plantpathogene schimmel die de asymmetrische vergeling, verwelking en dwerggroei bij bloemkool veroorzaakt. • V. tricorpus = zwakke pathogeen, mogelijk biologische bestrijder van V. longisporum. vorming microscleroten = overlevingsstructuren die tot 15 jaar in de grond kunnen overleven

4. Verticillium – Levenscyclus

5. Verticillium in België • Nog geen effectieve bestrijding tegen • Verticilliumverwelking • In West-Vlaanderen: sporadische aantasting • Voorgaande veldexperimenten: • naast V. longisporumook aanwezigheid van V. tricorpus. • In velden met aanwezigheid van beide species  geen aantasting! • In Klein-Brabant: veel aantasting, nauwelijks aanwezigheid van V. tricorpus DOEL: Interactie tussen V. tricorpus en V. longisporum bestuderen  V. tricorpus mogelijke biologische bestrijder van V. longisporum

6. In vitro pathogeniciteit • Gamborg B5 Medium in cultuurbuizen • Inoculatie van bloemkoolras ‘Clapton’ met V. longisporum en V. tricorpus • Geen uiterlijke symptomen zichtbaar • Vers gewicht van de in vitro planten (‘Clapton’) Groeistimulatie door V. tricorpus

7. In vitro pathogeniciteit • Worteloppervlak ‘Clapton’ bedekt door • microscleroten (%) V. longisporum V. tricorpus Meer microscleroten bij behandeling met V. tricorpus→ resistentie reactie plant?

8. In vitro pathogeniciteit • Microscleroten binnenin de wortelcortex van • plant ‘Clapton’ geïnoculeerd met V. tricorpus

9. In vivopathogeniciteit + interactie • Bloemkolen van het ras ‘Cornell’ • Grond bevloeiingsmethode, inoculatie met sporensuspensie • 4 behandelingen:

10. In vivopathogeniciteit + interactie • Na 4 weken: eerste symptomen van Verticillium zichtbaar

11. In vivopathogeniciteit + interactie • Eindevaluatie: zwartverkleuring van de xyleemvaten (score 03) Verdeling van de scores: Combinatie hier geen effect op bescherming van de plant.

12. Detectie van Verticillium in grondstalen • Telling van aantal microscleroten op MSEA (Modified Soil Extract Agar) • Nadelen: • Tijdrovend • Soms moeilijk onderscheid tussen microscleroten van verschillende species • Species-specifieke PCR biedt mogelijk een oplossing • Voordelen: • Snel • Nauwkeurig

13. Species-specifieke PCR • Optimalisatie van de species-specifieke PCR van V. longisporum en V. tricorpus. • Snel en nauwkeurig opsporen van deze species in grondstalen Eerste stap van optimalisatie is afgerond. L 1 2 3

14. 200 µm Bepaling aantal kiemkrachtige microscleroten in grondstalen • Bevestiging van voorgaande tellingen • Grondstalen • Klein-Brabant • West-Vlaanderen • Drogen, natte zeving, uitplaten op MSEA • Na 4 weken: telling Microscleroten V. longisporum Microscleroten V. tricorpus 200 µm

15. Bepaling aantal kiemkrachtige microscleroten in grondstalen • West-Vlaanderen: praktisch in alle grondstalen aanwezigheid van V. tricorpus. • Klein-Brabant: slechts één grondstaal met aanwezigheid van V. tricorpus.

16. BESLUIT • In vitropathogeniciteit: • V. tricorpus groeistimulatie in ‘Clapton’, • Meer microscleroten bij behandeling met V. tricorpus → resistentie reactie plant? • In vivopathogeniciteit + interactie: • V. tricorpus kon de plant hier niet beschermen tegen V. longisporum • Species-specifieke PCR: • PCR van V. longisporum en V. tricorpus geoptimaliseerd. • Bepaling aantal microscleroten in grondstalen: • In West-Vlaanderen: aanwezigheid van V. tricorpus in praktisch alle grondstalen • In Klein-Brabant: slechts in één grondstaal aanwezigheid van V. tricorpus

17. Bedankt voor jullie aandacht! • Stagementoren: SorayaFrança Sarah Van Beneden • Promotor: Bart Quartier • Stagegever: Prof. dr. ir. MonicaHöfte • Het lectorencorps van BLT

18. Vragen?

19. Interactie tussen Verticillium tricorpus en Verticilliumlongisporumbij bloemkool Cindy Lecluyse Promotor: Bart Quartier Stagementoren: Soraya França Sarah Van Beneden Stagegever: Prof. dr. ir. Monica Höfte