70 likes | 543 Views
RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism. Marie ÄŒerná, Markéta ÄŒimburová, Marianna Romžová. RFLP –polymorfizmus délky restrikÄnÃch fragmentů. restrikÄnà analýza DNA pomocà jejÃho Å¡tÄ›penà restrikÄnÃmi endonukleázami (RE) ve specifických restrikÄnÃch mÃstech.
E N D
RFLPRestriction Fragment Length Polymorphism Marie Černá, Markéta Čimburová, Marianna Romžová
RFLP –polymorfizmus délky restrikčních fragmentů restrikční analýza DNA pomocí jejího štěpení restrikčními endonukleázami (RE) ve specifických restrikčních místech
RFLP –polymorfizmus délky restrikčních fragmentů pokud sekvenční diference (polymorfizmus) vytváří nebo ruší specifické místo pro RE, vznikají po restrikci fragmenty odlišných velikostí
Princip • výchozí DNA (genomická DNA, PCR produkt) • štěpení restrikčním enzymem na fragmenty různých velikostí • elektroforetická separace fragmentů
Restrikční endonukleázy (RE) • známo asi 2100 bakteriálních RE • RE rozpoznávají různě krátké sekvence nukleotidů (4,6,8), v kterých pak štěpí kovalentní fosfodiesterové vazby
??? • Štěpí častěji RE, které rozpoznávají kratší nebo delší sekvence? • Co je úlohou RE v přirozených systémech?