60 likes | 550 Views
Metoda RFLP. Polymorfismus délky restrikčních fragmentů (Restriction Fragment Length Polymorphism) je technika, která umožňuje diferenciaci genomů na základě spektra DNA fragmentů, které vzniknou po štěpení genomové DNA restrikčními endonukleázami. Postup při RFLP. Izolace DNA
E N D
Metoda RFLP Polymorfismus délky restrikčních fragmentů (Restriction Fragment Length Polymorphism) je technika, která umožňuje diferenciaci genomů na základě spektra DNA fragmentů, které vzniknou po štěpení genomové DNA restrikčními endonukleázami.
Postup při RFLP • Izolace DNA • Štěpení restrikčními endonukleázami • Elektroforéza • Hybridizace se specifickou sondou (Southern blotting) • Poskládání mapy, nalezení rozdílů (polymorfismů)
denaturace NaOH přenos DNA z gelu na membránu inkubace se značenou cDNA Southern blotting fragmenty DNA na elfo gelu filtrační papír membrána gel pufr otisk DNA na membráně vyvolání RTG filmu