300 likes | 653 Views
Úvod do fyziologie , experiment Fyziologie buňky. MUDr. Marián Liberko. Fyziologie Studium funkce orgánů , orgánových soustav a organizmu jako celku Normální x patologická Úzký vztah k anatomii a biochemii Historie J.E.Purkyně (1787-1869) C. Bernard (1813-1878)
E N D
Úvod do fyziologie, experimentFyziologiebuňky MUDr. Marián Liberko
Fyziologie • Studiumfunkceorgánů, orgánových soustav a organizmu jako celku • Normální x patologická • Úzkývztah k anatomii a biochemii • Historie • J.E.Purkyně (1787-1869) • C. Bernard (1813-1878) • K. Landsteiner (1868-1943) • J. Janský (1873-1921) • A. Carrel (1873-1944) • J. Watson + F. Crick • Metody • Pozorování v přirozenémprostředí • Pozorování v nepřirozenémprostředí (behavioristickýprincip), experiment • Srovnávacífyziologie
Experiment • In vitro • In vivo • Krátkodobé x dlouhodobéstudie • Koncept 3R (Russel 1959) • Reduction • Replacement • Refinement • Responsibility
Vývoj buňky • prokaryotickábuňka • Před 3,5 mld let • Pouzdro +/-, buněčnástěna, plazmatická membrána, kruhová DNA volněuložena v cytoplazmě = „prokaryotickýchromosom“ - nukleoid • „extrachromosomální“ DNA - plasmidy • Žádné membránou ohraničené organely • Ribosomy – 70S • Rozmnožovánídělením • Dnes: bakterie G+/G-, sinice
eukaryotickábuňka • Před 1,5 mld let • Zvětšováníbuňky • Formování membránou ohraničených organel • Vchlipováním plazmatické membrány • Endosymbiotickáteorie • DNA uložena v jádru • Vývoj cytoskeletu
Eukaryotickábuňka • Plazmatická membrána • Buněčnéorganely • Jádro, ER, GA, mitochondrie, lyzosomy, peroxisomy, ribosomy, inkluze • Cytoskelet • Mikrotubuly, mikrofilamenta, intermediárnífilamenta
Plazmatická membrána • Odd. buňku od zevníhoprostředí • Struktura • Dvouvrstvafosfolipidů, cholesterol • Polární x nepolárníčást • Proteiny • Integrální x periferní
Buněčnéjádro • Uložena genetická informaceveformě DNA • Regulace, diferenciace, maturace a funkcebuňky • Syntéza RNA • mRNA • tRNA • rRNA • Části • Jaderná obálka • Vnitřní x zevní membrána (laminy), perinukleární cisterna, póry • Chromatin • komplex DNA a protein, složkachromosomů • Euchromatin x heterochromatin • Jadérko • Membránou neohraničená struktura, syntéza rRNA, asociace s proteiny za vzniku nezralýchribosomů • Nukleoární organizátor, parsfibrosa, parsgranulosa
Ribosomy • Ribosomy/polyribosomy • Komplex rRNA a ribosomálnichproteinů • Volné x vázané • Proteosyntéza
Endoplasmatickéretikulum • Systém kanálků a cisteren • V těsném kontaktu s buněčnýmjádrem • Granulární x agranulární • Syntéza proteinů a posttranslační úpravy x syntéza lipidů a biotransformacexenobiotik
Golgiho aparát • Lamely, cisterny • V úzkemvztahu k ER • Modifikace, třídění, distribuce – enzymylyzosomů, peroxisomů, sekreční granula • Cis x transčást
Lyzosomy a peroxisomy • Lyzosomy • Buněčné trávení: heterofagie/autofagie • Množství v buňcev závislosti na jejífunkci • Hydrolytické enzymy, H+ ATP-áza • Primární x sekundární • Peroxisomy • Kataláza, peroxidáza • Oxidacelátekbuňce nebezpečných (H2O2)
Mitochondrie • Endosymbiotickáteorie, semiautonomníorganely • Struktury • Zevní x vnitřní membrána, intermembranózníprostor, mitochondriálnímatrix: enzymydýchacíhořetězce, DNA – matroklinnídědičnost, ribosomy • Energetická továrnabuňky • Krebsův cyklus, β-oxidace mastných kyselin, dýchací řetězec – oxidativnífosforylace a tvorba ATP
Dýchací řetězec • Tvorba ATP • Chemiosmotickáteorie • ATP jako zdroj energie pro práci • Mechanickou • Chemickou • Transportní
Cytoskelet -miktotubuly, mikrofilamenta, intermediárnífilamenta • Mikrotubuly • Podjednotky: α a βheterodimery • Mikrotubulyjakosoučást: centriolů, bičíků • +/- konec, polymerace/depolymerace
Úloha mikrotubulů v buňce • Transport látek v buňce – např. axoplazmatický transport (kinesin, dynein) • Součástdělícíhovřeténka • Pohyb buňky – flagellum • Mikrofilamenta • Podjednoty: monomerG-aktin • Polymerací: aktinovéfilamentum – provazce, 2D, 3D sítě • Význam • Tvar , pohyb buňky, endocytóza, exocytóza
Intermediárnífilamenta • Skutečnýcytoskelet • Mechanicky stabilizujíbuňky • Typy: cytokeratin, desmin, vimentin, lamin
Typy spojení mezibuňkami • Adhezivní • Zonulaeadherentes, desmozonmy, hemidesmozomy • Utěsňující • Zonulaeoccludentes • Komunikační • Nexy (gapjunctions)
Transport látekpřesmembránany • Paracelulární • V závislosti na typu přítomnýchmezibuněčnýchkontaktů • Tenké střevo, proximálnítubulusledvin • Transcelulární • Prostá difuze, facilitovanádifuze, primární a sekundárníaktivní transport, endocytóza, exocytóza, iontové kanály
Prostá difuze • Hydrofóbní látky, neutrální molekuly O2, CO2 • Facilitovanádifuze • I hydrofilní látky • Přenašeč (GLUT), saturovatelnost, specificita, kompetitivníinhibice • Primárněaktivní transport • Spotřeba ATP • Na+/K+ATP-áza, Ca2+ATP-áza, Na+/H+ATP-áza
Sekundárněaktivní transport • Kotransport • Symport – SGLT 1 • Antiport – Na+/H+
Endocytóza a exocytóza • Transport makromolekul do/z buňky • Endocytóza • Pinocytóza x fagocytóza • př. LDL cholesterol • Exocytóza • Př. Hormonypankreatu, neurohypofýzy, neurotransmitery!!!
Iontové kanály • Stále otevřené • Gapjunctions • Napěťověřízené • Na+, K+ kanály membrány neuronůpři vzniku AP • Chemicky řízené • a) receptor je přímosoučástíiontového kanálu • Př. AchRpostsynaptické membrány • b) receptor nenísoučástíiontového kanálu • Př. G-proteiny • Gs, Gq, Gi – tvorba „secondmessengers“ → kaskáda dějůfosforylace/defosforylace a aktivaceiont. kanálu • Napěťově a chemicky řízené • Mechanicky řízené
profáze interfáze prometafáze Mitoza 2n 2n 2n • metafáze telofáze anafáze
Regulacebuněčného cyklu • Cykliny • Cyklicky syntetizovány v průbehubuněčného cyklu • Cyklindependentniproteinkinazy (Cdk) • Trvale přítomny v buňkách • Aktivacevazbou s cykliny→ fosforylaceřadyproteinůúčastnícíchseřízeníbuněčného cyklu – přechod G1/S, G2/M • p21 • Inhibitor komplexu cyklin/Cdk • Aktivován p53 • Poškození DNA →p53→p21→cyklin/Cdk→zástava cyklu (replikace) • Reparace • Ano? – pokračování cyklu • Ne? – apoptóza x nádor!!!
Buněčnásmrt • Nekróza • Nefyziologická smrtbuňkyvlivem fyz., chem., biolog. faktorů • Apoptóza • Fyziologická smrtbuňky • Význam • Eliminacebuněk s poškozenou DNA • V průběhuontogeneze • Činnost imunitného systému
Nekróza x apoptóza • Spotřeba ATP • DNA • Chromatin • Velikostbuňky • Plazmatická membrána • Zánětliváreakce