INTRODUÇÃO E OBJETIVOS

1. Expressão de miRNAs em pênfigo foliáceo. Simone Lenis FachinPibic/Fundação Araucária Maria Luiza Petzl-Erler INTRODUÇÃO E OBJETIVOS MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificadores que regulam a expressão gênica em nível pós-transcricional. Muitas evidências sugerem que certos miRNAs são cruciais para as funções das células do sistema imune. Desta forma, é possível que alterações no perfil de expressão destes miRNAs estejam envolvidas no desenvolvimento e manifestação da doença autoimune pênfigo foliáceo (PF). O objetivo deste estudo é investigar o perfil de expressão de um conjunto de miRNAs circulantes em pacientes de PF em diferentes estágios da doença e em controles, a fim de verificar se há uma associação entre certos miRNAs e o PF. RESULTADOS E DISCUSSÃO Esta primeira etapa do projeto consistiu principalmente na definição da metodologia. Dentro disto, foi feita a escolha do arranjo de miRNAs que será utilizado neste estudo. Visto que o PF é uma doença autoimune, acreditamos que miRNAs com funções relacionadas a imunidade possam estar envolvidos com a manifestação da doença. Desta forma, foi escolhido o arranjo contendo o maior número de miRNAs relacionados a regulação de genes envolvidos na resposta imune ou ao desenvolvimento de células do sistema imune. Para a comparação entre o perfil de miRNAs circulantes expressos em pacientes de PF e em controles é fundamental fazer o pareamento entre as amostras. Desta forma, foram pareados pacientes e controles do mesmo gênero, com idades próximas e expostos a condições ambientais semelhantes, visto que estes fatores podem influenciar na expressão gênica do indivíduo. A data da coleta das amostras também foi levada em consideração para fazer o pareamento, para isolar a influência do tempo de armazenamento nos resultados. MATERIAIS E MÉTODOS A extração dos miRNAs do soro está sendo feita com o kit miRNeasy Serum/Plasma (QIAGEN). Em seguida, será feita a transcrição reversa utilizando o kit miScript II RT (QIAGEN). Por fim, os cDNAs obtidos a partir dos miRNAs serão quantificados por PCR quantitativa em tempo real (RT-qPCR), utilizado o arranjo T-cell & B-cell Activation miRNA PCR Array (QIAGEN). CONCLUSÃO A definição da metodologia que será empregada no trabalho é muito importante para o bom funcionamento das técnicas e obtenção de resultados confiáveis, e por isso, muita atenção foi voltada para esta etapa do projeto. Investigar os perfis de miRNAs circulantes em pacientes de PF e controles pode nos ajudar a compreender melhor os mecanismos que levam a manifestação e ao desenvolvimento da doença. LENG, R. X.; PAN, H. F.; QIN, W. Z.; et al. Role of microRNA-155 in autoimmunity. Cytokine & Growth Factor Reviews, v. 22(3), p. 141-147, 2011.