1 / 20

Diagnostikk av Limb Girdle

Diagnostikk av Limb Girdle. The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen 27.10.05. Muskelbiopsi. Åpen biopsimetode Mer materiale, flere muligheter God kvalitet , korrekt diagnose. Det skjæres ca. 30 snitt i ulike nivå…. H&E Gomori trichrome

eliot
Download Presentation

Diagnostikk av Limb Girdle

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Diagnostikk av Limb Girdle The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen 27.10.05

  2. Muskelbiopsi • Åpen biopsimetode • Mer materiale, flere muligheter • God kvalitet , korrekt diagnose

  3. Det skjæres ca. 30 snitt i ulike nivå…. • H&E • Gomori trichrome • ATP (4.3-4.5- 9.4) • NADH • Sur phosfatase • Non-spesifikk esterase • PAS • Oil-red O • MHC1 • Ev. Metabolsk • Cox/SDH • PFK • AMP • Myophos

  4. Restmaterialet frysestil biobank • Dystrofin • Alfa-dystroglycan • Alfa-sarcoglycan • Beta-dystroglycan • Beta-sarcoglycan • Delta-sarcoglycan • Gamma-sarcoglycan • Dysferlin • Spectrin • Merosin (to ulike) • Emerin

  5. Muskel dystrofier Kongenitte myopatier Inflammatoriske myopatier Metabolske myopatier Sykdommer som skyldes defekt i den nevromuskulære forbindelsen (motorisk endeplate) Nevrogene muskelsykdommer Hvike grupper muskelsykdommer?

  6. Membranproteiner i muskelcellen(Dystrofin-relaterte proteiner) • Cytoskjelett forbindelser • Forbindelse mellom myofibriller og sarcolemma • Ved Z-linjene og M-linjene

  7. Dystrofin-relaterte proteiner

  8. Immunhistokjemi - dystrofin • Normal • Duchenne • Bærer

  9. Immunhistokjemisk analyse • Dystrofin • Alfa-dystroglycan • Alfa-sarcoglycan • Beta-dystroglycan • Beta-sarcoglycan • Delta-sarcoglycan • Gamma-sarcoglycan • Dysferlin • Spectrin • Merosin (80 and 300) • Emerin

  10. Western blot • Dystrophin • Calpain • Dysferlin • Merosin • Caveolin

  11. Resultat (siden 1994) • Alfa-sarcoglycan (adhalin) • Beta-dystroglycan • Beta-sarcoglycan • Delta-sarcoglycan • Gamma-sarcoglycan • Spectrin

  12. Calpain LG 2A Siden 1998 • Western blot: • 88 Normal bands • 10 pasienter med totalt manglende bånd • 17 pasienter med svake calpain bånd • DNA analyser: • 4 pasienter med calpain mutasjon

  13. CURRENT CLASSIFICATION OF LGMDBushby and Beckmann, 2003 DISEASE GENE LOCUS GENE PRODUCT MW (kDa) LOCALISATION LGMD2A 15q15 (1995) Calpain 3 94 LGMD2B 2p13 (1994) Dysferlin 230 Membrane LGMD2C 13q12 (1992) α- sarcoglycan 35 Transmembrane LGMD2D 17q11-q12 β-sarcoglycan 50 Transmembrane LGMD2E 4q12 (1995) γ-sarcoglycan 43 Transmembrane LGMD2F 5q33-34(1996) δ-sarcoglycan 35 Transmembrane LGMD2G 17q11-q12 (1997) Telethonin 19 Sarcomeric LGMD2H 9q31 (1998) TRIM32 72 LGMD2I 19q13 (2001) FKRP LGMD2J 2q 24-31 Titin4200 Sarcomeric

  14. Grunnlag for å gjøre FKRP DNA analyse for FKRP fra pasienter med: • Biopsier med svakt eller manglende calpain bånd • Biopsier med partiell merosin ekspresjon • Biopsier med manglende alfa-dystroglykan • Biopsier med uavklarte primære muskelsykdommer • Biopsier med uavklarte inflammatoriske myopatier

  15. Konklusjon: Pr. 19.10.05 • 36 pasienter med fukitin relatert protein (FKRP) mutasjon 826C > A) i Norge (analysert ved Medisinsk genetikk, UNN Tromsø) • 3 compound heterozygous (2 familier) Heterozygous • 33 homozygote fra 28 familier • Fra alle regioner i Norge

  16. Pasientene • Klinikk: • 10- 52 år • Lett til moderat forhøyet CK • Svær variasjon I klinisk bilde (fenotype) • fra et tidlig hurtig progredierende (Duchenne-like) • Voksen- langsom progredierende limb-girdle phenotype • Muskel biopsi • Diffuse non-spesifikke myopati forandringer • Nevrogene forandringer • Inflammatoriske funn • Metabolske funn

  17. abnorm expresjon avα-Dystroglycan α - Dys

  18. Inflammatoriske funn • Nekrotiske fibre • Mononukleær betennelses infiltrat • Positiv MHC1 farging

  19. Klassifikasjon av kongenitte muskeldystrofier (MDCS) Guppe II • Abnormal glycosylation of α-dystroglycan • Fukuyama MDC • Muscle-eye-brain-disease • MDC 1C/LGMD 2I • Walker-Warburg-syndrome • Others rare forms Ullrich CMD MDC1A FCMDMEBFKRP/MDC1CMDC1BWWS Intergrin-α7Deficiency DMD

  20. Konklusjon Pasienter med lenge pågående kronisk muskelsykdom: . Bruk nasjonalt muskelregister ! • Gjør immunfarging for: • α- Dystroglycan • α2 Laminin • Western blot for Calpain 3 • Så • Overvei DNA analyse for FKRP

More Related