Laboratorní vyšetření v hematologii

1. Laboratorní vyšetření v hematologii Ivana Hadačová

2. Laboratorní testy • Screeningové testy– testy vyhledávací, postihují část systému • Speciální testy– indikovány když: - screeningové testy jsou abnormální - je podezření na krvácivou chorobu

3. Screeningové testy • Počet trombocytů • krvácivost • Protrombinový test • Aktivovaný parciální tromboplastinový test • Trombinový test • PRO-C global, euglobulinová fibrinolýza…

4. Počet destiček • Stanovení z analyzátoru normální rozmezí: 150 – 400x109/l • Vyšetření pod mikroskopem Fragmentované erytrocyty– HUS,TTP, DIC Blasty – AL Pseudotrombocytopenie

5. Pseudotrombocytopenie • Chybný odběr • Makrocytóza destiček • Destičkový satelitismus • Shluky destiček

6. Pseudotrombocytopenie

7. Krvácivost Screeningový test primární hemostázy • Duke : normální hodnota < 5 min. • Template time : standardní incise standardní tlak normální hodnota < 9 min.

8. Protrombinový test (PT) Měří aktivitu zevního koagulačního systému a společné cesty F VII, V, X, II, FBG Vyjádření tNP: 10 – 15s tPP: tNP +-3s Aktivita: 75 – 120% PT-R (tPP/tPN): 0,8-1,2 INR: 0,8-1,2

9. PT - interpretace Falešné prodloužení Chybný odběr (pod rysku) Prodloužení • Deficit F. VII, V, X, II, FBG • DIC • Deficit vitaminu K • Jaterní onemocnění • Léčba warfarinem (přímým inhibitorem FX)

10. Aktivovaný parciální tromboplastinový test (APTT) Měří aktivitu faktorů vnitřní a společné cesty (na společné cestě méně citlivý) F XII, XI, IX, VIII (X, V, II, FBG) Vyjádření tNP: 28 – 38s tPP: tNP+-5s APTT R: 0,8 – 1,2

11. APTT - interpretace Falešné prodloužení • Chybný odběr (pod rysku) • Polycytémie, polyglobulie • Příměs heparinu a inf. roztoků Falešné zkrácení • Chybný odběr

12. APTT - interpretace Prodloužení • Deficit F. XII, XI, IX, VIII (X, V, II, FBG) • DIC • Deficit vitaminu K • Léčba warfarinem, heparinem • LA, paraproteiny • Specifické inhibitory Zkrácení • Aktivace v koagulačním systému, prokoagulační stav

13. Trombinový test - TT Závislý na kvantitě a kvalitě fibrinogenu Normální rozmezí: 12 – 16s Interpretace: • Hypofibrinogenémie • Dysfibirinogenémie • DIC (přítomnost FDP) • Léčba heparinem

14. Speciální testy • Faktory • Získané inhibitory • Fibrinové a fibrinogenové štěpné produkty • Přirozené inhibitory • Komponenty fibrinolytického systému • Destičkové funkce ….

15. Vyšetření faktorů • Fibrinogen • Faktory XII, XI, IX, VIII, V, X, VII, II • von Willebrandův faktor • F. XIII

16. Fibrinogen • Koagulační metoda– hladina fibrinogenu se stanoví pomocí modifikovaného TT (ředěná plazma, vysoká koncentrace trombinu) • Imunologické metody

17. Fibrinogen - interpretace • Normální rozmezí: 1,5 – 4g/l • Vysoká hladina: Zánět Nádorová onemocnění Těhotenství • Nízká hladina: DIC Hypofibrinogenémie

18. Vyšetření hladin faktorů • Koagulační metody měří aktivitu pomocí vzorku ředěného deficitní plazmou F. XII, XI, IX, VIII – APTT F. VII, V, X, II – PT • Imunologické metody– měří hladinu proteinu v plazmě

19. Vyšetření faktorů - interpretace Normální rozmezí: 80 – 120% • Nízká hladina: vrozený deficit porucha produkce specifický inhibitor F.II, VII, IX, X – deficit vitaminu K warfarin

20. von Willebrandův faktor vWF nutný pro adhezi destiček k endotelu, agregaci destiček a jako nosič a stabilizátor F VIII • Imunologické metody (vW Ag) • Funkční metody (vWRCo, RIPA….) Normální rozmezí: 80 – 120%

21. vWF vyšetření Interpretace: • Nízká hladina – vWD • Vysoká hladina – zánět nádorová onemocnění těhotenství

22. Vyšetření prekurzorů a štěpných produktů fibrinu • Parakoagulační testy měří fibrinové prekurzory v plazmě • D dimer test měří specifický štěpný produkt, vzniklý z fibrinového koagula

23. Parakoagulační testy • Etanol gelifikační test • Protamin sulfátový test Normální hodnota: negativ Interpretace: Aktivace v koagulačním systému

24. D dimer test • Imunologický test pomocí monoklonální protilátky Normální hodnota: < 250ng/ml Interpretace: DIC Trombóza, plicní embolie Pooperační období Těhotenství

25. Přirozené inhibitory • Antitrombin • Protein C • Protein S • Rezistence k aktivovanému proteinu C • Heparin cofactor II • PAI • C1esterase inhibitor

26. Antitrombin Hlavní přirozený inhibitor. Inhibuje aktivované FF II, X, IX, XI, XII, rekce se výrazně urychluje v přítomnosti heparinu • Koagulační metody • Chromogenní metody • Imunologické metody

27. Antitrombin Normální rozmezí: 80 – 120% novorozenci: 40 – 80% Interpretace Nízká hladina: jaterní léze protein loosing enteropatie nefrotický sy DIC vrozený deficit

28. Protein C Aktivován trombinem a v komplexu s trombomodulinem, endoteliálním receptorem a proteinem S inhibuje FF V a VIII • Funkční metody (chromogenní) • Imunologické metody

29. Protein C Normální rozmezí: 80 – 120% novorozenci: 30 – 80% Interpretace Nízká hladina: jaterní onemocnění nedostatek K vitaminu léčba warfarinem DIC vrozený deficit

30. Protein S Kofaktor proteinu C V plazmě volný –aktivní a vázaný na C4BP • Funkční metody(koagulační) • Imunologické metody – celková a volná forma • Normální rozmezí: 80 – 120% Novorozenci: 30 – 80% • Interpretace jako u proteinu C

31. Rezistence k aktivovanému proteinu C Dvoufázový test, měří inaktivaci F V po přidání APC • Koagulační test Normální hodnota: >2,1 Interpretace: FV Leiden přítomnost LA

32. Vyšetření fibrinolytického systému • Screeningový test: Test euglobulinové fibrinolýzy • Speciální testy: Plazminogen Tkáňový aktivátor plazminogenu PAI

33. Euglobulinová fibrinolýza Měří dobu rozpuštění koagula • Normální hodnota: >120 min. Interpretace. hyperfibrinolýza DIC F XIII deficit těhotenství

34. Anti Xa test • Používá se ke stanovení hladiny LMWH/SH • Chromogenní(koagulační )test – měří stupěň inaktivace Fxa • Preventivní rozmezí: 0,2-0,4U/ml • Léčebné rozmezí: LMWH 0,5-1,0U/ml SH 0,4-0,7U/ml

35. Které testy je nutné znát? • Počet destiček • APTT, PT, TT, FBG • D dimer • AT, PC, PS