1 / 37

GRUPO DE PATÓLOGOS DEL NOROESTE REUNIÓN ACADÉMICA 2013 BIOLOGÍA MOLECULAR BÁSICA PARA EL PATÓLOGO

GRUPO DE PATÓLOGOS DEL NOROESTE REUNIÓN ACADÉMICA 2013 BIOLOGÍA MOLECULAR BÁSICA PARA EL PATÓLOGO. Luis Muñoz Fernández Centenario Hospital Miguel Hidalgo Biopath México Aguascalientes, Ags. López-Corella E. Patología 1991; 29: 65-66. EL CONOCIMIENTO DEL CÁNCER A LOS LARGO DEL TIEMPO.

giulio
Download Presentation

GRUPO DE PATÓLOGOS DEL NOROESTE REUNIÓN ACADÉMICA 2013 BIOLOGÍA MOLECULAR BÁSICA PARA EL PATÓLOGO

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. GRUPO DE PATÓLOGOS DEL NOROESTEREUNIÓN ACADÉMICA 2013BIOLOGÍA MOLECULAR BÁSICA PARA EL PATÓLOGO Luis Muñoz Fernández Centenario Hospital Miguel Hidalgo Biopath México Aguascalientes, Ags.

  2. López-Corella E. Patología 1991; 29: 65-66.

  3. EL CONOCIMIENTO DEL CÁNCER A LOS LARGO DEL TIEMPO DeVita VT et al. Primer of the Molecular Biology of Cancer 2011: 4-5.

  4. EL CONOCIMIENTO DEL CÁNCER A LOS LARGO DEL TIEMPO De Vita VT el al. Primer of the Molecular Biology of Cancer 2011: 4-5.

  5. LiVolsi V, Upton MP. Am J Clin Pathol 2012;137: 341-342.

  6. DIAGNÓSTICO MOLECULAR Blakey GL, Farkas DH. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 62.

  7. BIOMARCADORES • Es una característica que se mide objetivamente como un indicador de: • Un proceso biológico normal. • Una enfermedad. • Las respuestas farmacológicas a una intervención terapéutica. • Tipos: • Biomarcador pronóstico: evolución. • Biomarcador predictivo: sensibilidad a cierto tratamiento. • Biomarcador de monitorización: respuesta a un tratamiento. Jaffe CC. Arch Pathol Lab Med 2009; 133: 547-549.

  8. BIOMARCADORES • Biomarcadores pronósticos: • La mayoría de los que detectamos en patología. • Un buen ejemplo son los índices mitósicos o de proliferación (PCNA, Ki 67). • Biomarcadores predictivos: • Her2-neu en cáncer de mama. • Mutación de KRAS en cáncer de colon. • Biomarcadores de monitorización: • Fluorodesoxiglucosa en tomografía por emisión de positrones (PET scan). Jaffe CC. Arch Pathol Lab Med 2009; 133: 547-549.

  9. BIOMARCADORES PRONÓSTICOS EN NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Bahler D. Molecular Pathology of Hematolymphoid Diseases 2010: 66.

  10. FIJADORES USADOS EN PATOLOGÍA Hunt JL. Arch Pathol Lab Med 2008; 132: 251.

  11. TÉCNICAS MOLECULARES EN TEJIDOS FIJADOS EN FORMOL Y EMBEBIDOS EN PARAFINA • Hibridación in situ fluorescente o cromógenica (FISH, CISH). • Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). • Secuenciación del ADN. • Pruebas en ARN, como la PCR con transcripción reversa (RT-PCR). • Microarreglos para determinar la expresión génica. Dry, S et al. Am J Clin Pathol 2012; 137: 346-355.

  12. DEGRADACIÓN DEL ADN EN TEJIDOS FIJADOS EN FORMOL Y EMBEBIDOS EN PARAFINA • Para los estudios moleculares, el tiempo de fijación en formol debe ser entre 6 y 24 horas. • El formol establece enlaces cruzados con el ADN, las histonas y otras proteínas, fraccionando las moléculas: • Este proceso prosigue en los bloques tisulares a lo largo de los años: • Después de 10 a 20 años, la degradación puede impedir la amplificación con PCR. Dry, S et al. Am J Clin Pathol 2012; 137: 346-355.

  13. Hunt JL. Arch Pathol Lab Med 2008; 132: 250.

  14. PROTOCOLOS DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR Blakey GL, Farkas DH. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 62.

  15. EXTRACCIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS Hunt JL , Sanja D. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 70.

  16. FLUJO UNIDIRECCIONAL EN EL LABORATORIO DE PATOLOGÍA MOLECULAR Hunt JL. Arch Pathol Lab Med 2008, 132: 256. Blakey GL, Farkas DH. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 67.

  17. REACTIVOS DE LA PCR • Polimerasa termoestable: Taq polimerasa u otra: • Pfu, Pwo, Tgo, Tli, Tth. • Cebadores (primers). • Desoxinucleótidos. • Solución amortiguadora (buffer). • Magnesio. Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 77-78.

  18. PCR Hunt JL. Arch Pathol Lab Med 2008 132: 254.

  19. PCR: CICLOS TÉRMICOS Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 75.

  20. Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 74.

  21. Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 75.

  22. DETECCIÓN Y ANÁLISIS DE LOS PRODUCTOS DE LA PCR (“AMPLICONES”) Blakey GL, Farkas DH. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 62.

  23. VARIEDADES DE PCR • Hot start: mayor especificidad. • Nested: mayor producción y especificidad. • Específica para metilación. • Multiplex: se amplifican varias regiones simultáneamente. • PCR con transcripción reversa (RT-PCR): amplificación de secuencias de ARN. Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 78-79.

  24. PCR EN TIEMPO REAL Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 80.

  25. PCR EN TIEMPO REAL Dwight O. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 80.

  26. MATRICES DE ADN (MICROARRAYS) Quackenbush J. N Engl J Med 2006, 354: 2463-2472.

  27. MATRICES DE ADN (MICROARRAYS) http://www.columbia.edu/~bo8/undergraduate_research/projects/sahil_mehta_project/work.htm

  28. APLICACIONES DE LAS MATRICES DE ADN Blakey GL, Farkas DH. Basic Concepts of Molecular Pathology 2009: 66.

  29. Perou ChM et al. Nature 2000, 406: 747-752.

  30. PERFILES DE EXPRESIÓN GENÉTICA EN CANCER DE MAMA Lester SC. Pathologic Basis of Disease 2010.

  31. ONCOTYPE PARA CÁNCER DE MAMA http://www.oncotypedx.com/en-US/Breast.aspx

  32. CÁNCER COLORRECTAL: UNA ENFERMEDAD HETEROGÉNEA • Diferentes vías moleculares de la carcinogénesis: • Vía supresora convencional (60%): • APC/β-catenina/Wnt. • Vía de inestabilidad hereditaria de microsatélites (Lynch, 2 al 7%) : • MSH2, MLH1, MSH6, PSM2. • Vía de la mucosa aserrada (35%): • Silenciamiento epigenético (metilación de islas CpG). TGFβ y BAX. Shi Ch, Washington K. Am J Clin Pathol 2012, 137: 847-859.

  33. Shi Ch, Washington K. Am J Clin Pathol 2012, 137: 847-859.

  34. TRATAMIENTO DEL CARCINOMA DE PULMÓN QUE NO ES DE CÉLULAS PEQUEÑAS (NSCLC) • La neoplasia maligna que se diagnostica con mayor frecuencia en el mundo. • Más del 50% de los pacientes están en etapa IV cuando se les hace el diagnóstico. • En el 10 al 15% de los casos de carcinoma que no es de células pequeñas (NSCLC) existen mutaciones del EGFR: gefitinib, erlotinib. • Rearreglos del gen ALK (gen de fusión EML4-ALK) en el 5% de los NSCLC: crizotinib. Aisner DL, Marshall CB. Am J Clin Pathol 2012, 138: 332-346.

  35. Aisner DL, Marshall CB. Am J Clin Pathol 2012, 138: 332-346.

  36. TRATAMIENTO DEL CARCINOMA DE PULMÓN QUE NO ES DE CÉLULAS PEQUEÑAS (NSCLC) • La mutación de KRAS es un predictor negativo de las mutaciones de EGFR y de los rearreglos de ALK. • La amplificación de MET se asocia a la resistencia al tratamiento con inhibidores de EGFR. Aisner DL, Marshall CB. Am J Clin Pathol 2012, 138: 332-346.

More Related