Présentation d’un projet de recherche pour le concours de l’Ecole Doctorale de Bordeaux II

1. Présentation d’un projet de recherche pour le concours de l’Ecole Doctorale de Bordeaux II par Stéphanie COCHAUD

2. Plan de la présentation 1ère partie : Présentation de la candidate Curriculum Vitae Initiation à la Recherche 2ème partie : Présentation du projet de Recherche Introduction Méthodologie Conclusion

3. Curriculum Vitae 2005-2006 : Master 2 Recherche Biologie, Santé et Agronomie. Mention B Faculté des Sciences Fondamentales et Appliquées, POITIERS (86). 2004-2005 : Master 1 Biologie, Santé et Agronomie. Parcours : Biologie Moléculaire et Génétique. Mention B Faculté des Sciences Fondamentales et Appliquées, POITIERS. 2003-2004 : Licence Physiologie, Biologie Cellulaire et Moléculaire. Mention B Faculté des Sciences Fondamentales et Appliquées, POITIERS. 2001-2003 : DEUG Sciences de la Vie. Mention B Faculté des Sciences Fondamentales et Appliquées, POITIERS.

4. Initiation à la Recherche H157-Ctl H157-S1 H157-S2 40,0 30,0 Pour 1000 de GAPDH 20,0 10,0 0,0 IGFBP-rP1 Transgéline Palladine • 2 Stages effectués en Master 1 et Master 2 Recherche : • Etude de l’expression de gènes par RT-PCR classique et/ou quantitative.

5. Initiation à la Recherche 20µm 20µm 20µm Milieu + SEMA3F Milieu contrôle - Etude de l’organisation du cytosquelette d’actine - Dosage de l’interleukine IL-1β par ELISA

6. Les tétraspanines Forment une superfamille de protéines Schéma des tétraspanines Impliquées dans de nombreuses fonctions Levy et Shoham, Physiology (2005).

7. La tétraspanine KAI1/CD82 Protéine ubiquitaire Identifiée au cours de l’étude de l’activation des cellules T Supresseur de métastases : 1- corrélation inverse entre l’expression de KAI1 et les pouvoirs métastasique et d’invasion des cellules cancéreuses 2- KAI1 inhibe la migration cellulaire et l’invasion in vitro 3- KAI1 empêche la formation de métastases in vivo

8. Fonctions de la tétraspanine KAI1/CD82 KAI1/CD82 Intégrines β1 FAK CAS Baisse de l’adhérence cellulaire Baisse de la dégradation de la matrice extracellulaire MMP9 Jee et al., BBRC (2006) Intégrine α6β1 P Src P P Inhibition de la migration cellulaire Sridhar et Miranti, Oncogene (2006) He et al., J. Biol. Chem. (2005)

9. Les objectifs 1. Etudier le pouvoir anti-métastasique de KAI1/CD82 dans un modèle du cancer du poumon in vivo. 2. Déterminer les mécanismes moléculaires mis en jeu

10. Méthodologie : l’étude in vivo H12999? (Carcinome de poumon à non petites cellules) Transfection Clone contrôle Clone(s) réexprimant KAI1 Injection orthopique Mettre image de rats (pcDNA3.1) Etudier la survie des rats Etudier la formation de métastases Etudier le volume et la vascularisation de la tumeur

11. Méthodologie : l’étude in vitro Perte de l’adhérence : (- test d’adhérence) (- test de migration) Intégrines β1 P CAS DOCK180 Crk Anticorps 8A2 Anticorps P5D2 KAI1/CD82 ? Src P P CAS (Immunoprécipitation) FAK P SU6656 Rac-GDP Réorganisation de l’actine (migration cellulaire) Rac-GTP (Pull-Down) (Immunofluorescence)

12. Conclusion Montrer la fonction anti-métastasique de KAI1/CD82 in vivo Déterminer la voie de signalisation mise en jeu Par la suite : Influences des interactions entre KAI1 et KASP et entre KAI1 et Kitenin?

13. KAI1/CD82 : un supresseur de métastases Merci de votre attention