150 likes | 231 Views
A mutagenezis célja, haszna. Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT. Mutáció. Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára. A TIP120 fehérje néhány jellemzője. 1230 AS, szimpla polipeptid Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével
E N D
A mutagenezis célja, haszna Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Mutáció Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára
A TIP120 fehérje néhány jellemzője • 1230 AS, szimpla polipeptid • Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével • Az iniciációs komplex összeszerelődését serkenti • A funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-a • A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, Coenorhabditisban, Drosophilában, emberben, Arabidopsisban
I.A TIP120 fehérje szerepe a FehérjeszintézisbenII. A TIP120 fehérje szerepe a fehérjedegradációs folyamatokban
mRNS DNS Fehérje A génkifejeződés Szakaszai Transzkripció = „átírás” Transzláció = „fordítás”
POLII TIP120 TFIIF TATA A transzkripciós iniciációs komplex kialakulása TFIIE TFIIH TFIIB TFIIA TBP
Az ubiquitin-protein ligázok • Fontos típusuk az SCF-komplex (ROC1-SKP1-cullin1/cdc53-F box protein) • SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-transzdukcióban fontos fehérjék
Nd8 cul1 roc SKP1 E2 Ub F szubsztrát
A CAND1 fehérje szerepe az SCF komplex működésében • Gátolja a cul1-SKP1 interakciót • SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1; CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1 • CAND1 kiütése RNS-interferenciával:SKP1-cul1 komplex mennyisége nő
Nd8 cul1 roc SKP1 CAND1 E2 cul1 Ub F ROC szubsztrát SKP1 A CAND protein gátolja az SCF komplex működését
T-DNS LB RB Növényi gén promóter 5' UTR exon/intron 3' UTR Funkcióvesztéses mutáció Inszerciós mutagenezis T-DNS inszerció
A H911 vonal Columbia: normál fenotípus H911/4: törpe fenotípus
T-DNS inszerció pozíciója a H911 vonalban R L 2. Krom., BAC T8K22 T-DNS inszerció: 13. exon (3301bp) Gén: At2g02560 Protein: feltételezett TBP kölcsönható fehérje (120 kD) (TBP Interacting Protein, TIP120)