Seminario de grupo 28-2-2013

1. Departamento Química Orgánica Universidad de Alcalá Síntesis y estudios de derivados de FMISO Seminario de grupo 28-2-2013 Elena Nieto Alonso

2. Estudio de Radiosíntesis Todos los estudios de radiosíntesis se llevaron a cabo por parte del grupo de investigación del Dr. Miguel A. Pozo en el Instituto Tecnológico PET (ITP) de Madrid.

3. Síntesis de derivados Precursores de FMISO

4. Radiosíntesis

5. Kryptofix 222 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane

6. A1 Ciclotrón H18F + H218O Kriptofix [2.2.2] (5,8 mmol) + K2CO3 (50,7 mmol) + MeCN/H2O (600 mL) 18O(p,n)18F 18F- 0,87 nmol Actividad inicial= 1500 mCi H218O CO32- 29.9 µmol Intercambio aniónico F- 0.87 nmol CO32- 29.9 mmol NITTP (5-20 mmol) + MeCN (2mL) A2 A3 [Kriptofix [2.2.2]. K]+18F- (0,87 mmol) + K2CO3 (50,7 mmol) Evaporación H18F + H218O + CO2 [Kriptofix [2.2.2]. K]+18F- (0.87 nmol) + K2CO3 (50,7 mmol) + MeCN/H218O (600 mL) [18F]FMISO

7. Figura 3.17. Diagrama del modulo para radiosíntesis de [18F]-FMISO. V1-acetonitrilo,V-2 precursor,V-3 HCl 1N, y V-4 NaOH 2N-tampon citrato, respectivamente.

8. Síntesis de derivados de FMISO

9. Radiosíntesis

11. Formación del diol H2O + K2CO3 → CO2 + 2 KOH (Ec. 1) R-CH2-OTs + KOH → R-CH2-OH + TsOK (Ec. 2)

12. Suehiro, M.; Yang, G.; Torchon, G.; Ackerstaff, E.; Humm, J.; Koutcher, J.; Ouerfelli, O. Bioorg. Med. Chem. 2011, 19, 2287-2297.

13. Modelo para las pruebas de radiosíntesis

14. suficientemente enérgicas como para considerar la hidrólisis el problema las diferencias en rendimiento de síntesis deben ser consecuencia de la etapa de fluoración. Entrada 1 y 2 :4 ciclos de destilación azeotrópica con MeCN a P reducida (8,4 min. en cada ciclo)

15. Conclusiones • Es posible la síntesis en frío de 2g en condiciones similares a las de radiosíntesis con buenos rendimientos. • El secado de la mezcla de reactivos que contiene K2CO3 es esencial para evitar la reacción del precursor con iones hidróxido.

16. Propuestas • Llevar a cabo una síntesis en frío en el ITP en las mejores condiciones, haciendo varios ciclos de evaporación azeotrópica. • Disminuir la cantidad de K2CO3 para reducir la formación de iones hidróxidos • Cuantificación de las muestras de síntesis según el método LC-MS-MS puesto a punto para este estudio

17. Ensayos in vitro de permeación de FMISO y análogos

18. Síntesis de derivados de FMISO

19. Clog P de derivados lipófilos de FMISO Clog P calculado con Marvin Sketch 5.11.3

20. Estudios de Permeación de FMISO y análogos colaboración con la Dra Maria L. de Ceballos

21. Placas de 24 pocillos con insertos

22. Sistema de doble cámara con 50000 células de linea epitelial b. End 5 + medio DMEM 10 mg/10µl Incubación 24 horas 37 ºC Incubación 0-24 horas 100 µl 600 µl Se toman muestras del compartimento de arriba y de abajo

23. Estudio de linealidad de FMISO Area = 21.28 C (μg/mL) + 1.832 ; r = 0.999 Figura. Rectas de regresión obtenidas del FMISO mediante patrón externo:

24. Análisis de las muestras para FMISO Figura. cuantificación de FMISO por HPLC

25. Derivados de FMISO Clog P calculado con Marvin Sketch 5.11.3

26. Sistema de doble cámara con 50000 células de linea epitelial b. End 5 + medio DMEM 10 mg/10µl Incubación 24 horas 37 ºC Incubación 0-1 hora 100 µl 600 µl Se toman muestras del compartimento de abajo

27. Estudio de Permeación de FMISO y análogos % Prod. que atraviesa la membrana Tiempo (min.)

28. Conclusiones La cantidad de producto que atraviesa la membrana parece estar en relación con la lipofilia.

29. Departamento Química Orgánica Universidad de Alcalá Síntesis y estudios de derivados de FMISO Seminario de grupo 28-2-2013 Elena Nieto Alonso