680 likes | 1.17k Views
Enzymy. Vladimíra Kvasnicová. Enzym je biokatalyzátor :. reakce. Obrázek převzat z http://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/enzymology.htm (prosinec 2006).
E N D
Enzymy Vladimíra Kvasnicová
Enzym je biokatalyzátor: reakce Obrázek převzat z http://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/enzymology.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat zhttp://stallion.abac.peachnet.edu/sm/kmccrae/BIOL2050/Ch1-13/JpegArt1-13/05jpeg/05_jpeg_HTML/index.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat zhttp://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/enzymology.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat z učebnice: Devlin, T. M. (editor): Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 4th ed. Wiley‑Liss, Inc., New York, 1997. ISBN 0‑471‑15451‑2
Enzymy • snižují aktivační energii reakce (EA) • zkracují čas dosažení rovnovážných koncentrací • se nespotřebovávají, z reakce vycházejí nezměněny • umožňují uskutečnění reakce při T, p a pH lidského těla • jsou specifické • mohou být regulovány • neměníG dané reakce • nemění rovnovážné koncentrace samostudium
Struktura a vlastnosti - většina enzymů jsou proteiny Obrázek převzat zhttp://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/enzymology.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat zhttp://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/enzymology.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat zhttp://stallion.abac.peachnet.edu/sm/kmccrae/BIOL2050/Ch1-13/JpegArt1-13/05jpeg/05_jpeg_HTML/index.htm (prosinec 2006)
Každý enzym má teplotní optimum pH optimum určitou afinitu k substrátu Obrázek převzat zhttp://stallion.abac.peachnet.edu/sm/kmccrae/BIOL2050/Ch1-13/JpegArt1-13/05jpeg/05_jpeg_HTML/index.htm (prosinec 2006)
Obrázek převzat z http://www.carleton.ca/biology/2200/schedule.html(prosinec 2006)
Některé enzymy jsou produkovány ve formě prekurzorů(= PROENZYMY nebo ZYMOGENY) Obrázek převzat z: http://wine1.sb.fsu.edu/bch4053/Lecture26/zymogen.jpg (prosinec 2006)
nebo musí být nejprve aktivovány (např. fosforylací): Obrázek převzat zhttp://fig.cox.miami.edu/~cmallery/150/memb/c11x11enzyme-cascade.jpg (prosinec 2006)
Izoenzymy (izozymy) jsou enzymy, které katalyzují stejnou reakci, ale liší se strukturou a fyzikálně-chemickými vlastnostmi. • Izoenzymy • jsou kódovány různými geny(= pravé izoenzymy) • nebo vznikají různou posttranslační modifikací(= izoformy) • se nachází vrůzných kompartmentech buňky • se nachází v různých tkáních organismu • mohou být oligomery různých podjednotek
př.5 izozymů (různý poměr jednotlivých monomerů) Obrázek převzat zhttp://wine1.sb.fsu.edu/bch4053/Lecture26/isozymes.jpg(prosinec 2006)
multienzymové komplexy samostatné enzymy mtb dráhy Figure 17.6 z Garrett, R.H.; Grisham, C.M. Biochemistry; Saunders: Orlando,1995; str. 553, nalezený na http://www.uwsp.edu/chemistry/tzamis/enzyme_complex.html (prosinec 2006)
př. multienzymový komplex dehydrogenázy 2-oxokyselin Obrázek převzat zhttp://faculty.uca.edu/~johnc/pdhrxns.gif(prosinec 2006)
př. multienzymový komplex dehydrogenázy 2-oxokyselin Obrázek převzat zhttp://faculty.uca.edu/~johnc/pdhrxns.gif(prosinec 2006)
Alosterický enzym: a) monomerní, b) oligomerní Obrázek převzat z učebnice: Devlin, T. M. (editor): Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 4th ed. Wiley‑Liss, Inc., New York, 1997. ISBN 0‑471‑15451‑2
Alosterický enzym v T a R konformaci: modulátory ovlivňují rovnováhu reakce aktivátory a substráty mají vyšší afinitu k R-konformaci inhibitorymají vyšší afinitu kT-konformaci Obrázek převzat z učebnice: Devlin, T. M. (editor): Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 4th ed. Wiley‑Liss, Inc., New York, 1997. ISBN 0‑471‑15451‑2
Enzymy v medicíně • stanovení aktivity enzymů v krvi • enzymové analytické metody • enzymoterapie
Stanovení aktivity enzymůz diagnostických důvodů nejčastěji je vyšetřována krev (sérum, plazma) zjištění přítomnosti a závažnosti tkáňového poškození jednotky: kat/L (= katalytická koncentrace enzymu) kat = katal 1 katal = 1 mol substrátu přeměněný enzymem za 1 sec. 1 kat = 10-6 kat
Enzymy nacházející se v plazmě: a) enzymy specifické pro plazmu (př. srážecí faktory) b) sekreční enzymy (př. amyláza, lipáza) c) buněčné enzymy Důležité je znát: 1) intracelulární lokalizaci enzymů 2) distribuci enzymů v orgánech a tkáních 3) zdroj enzymů nacházejících se v plazmě 4) cesty eliminace enzymů z krve
„ srdeční enzymy“ Obrázek převzat z učebnice: Devlin, T. M. (editor): Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 4th ed. Wiley‑Liss, Inc., New York, 1997. ISBN 0‑471‑15451‑2
ENZYMY Žádanka na biochemické vyšetření:http://spch.cz/kliniky/kbi/laboratorni_prirucka/zadanka_biochemie.pdf (prosinec 2006)
Názvosloví enzymů • -áza nebo -asa / -in • IUMB nomenklatura enzymů • doporučené názvy
IUMB nomenklatura enzymů EC nomenklatura * každý enzym má své EC číslo(Enzyme Commission of IUBMB) – 6 tříd enzymů: • EC 1.x.x.x oxidoreduktázy • EC 2.x.x.x transferázy • EC 3.x.x.x hydrolázy • EC 4.x.x.x lyázy • EC 5.x.x.x izomerázy • EC 6.x.x.x ligázy (syntetázy) → vychází z typu enzymem katalyzované reakce
systematické názvy * tvoří se podle specifických pravidel, specifikují reakci katalyzovanou enzymem příklad: ATP : D-glukóza fosfotransferáza (EC 2.7.1.2) přenáší (2)fosfát (7) na alkoholovou sk. (1) ATP + D-Glc ADP + D-Glc-6-fosfát (Glc-6-P)
doporučené názvy(= akceptované) * jednodušší než systematické, běžně se používají * velmi důležité! příklad: EC 2.7.1.2. = glukokináza(viz výše)
staré triviální názvy * bez vztahu ke katalyzované reakci * koncovka -in (pepsin, trypsin) * používají se pro enzymy objevené již dávno (dlouho používané názvy) zkratky enzymů * běžné v medicíně př. LD, ALT, ALP
Většina názvů enzymů obsahuje koncovku -áza a) název substrátu + -áza (př. amyláza) b) typ reakce + -áza (př. dehydrogenáza) = skupinový doporučený název, nejde o název konkrétního enzymu
IUBMB Enzyme Nomenclature EC 2.7.1.1 Accepted name: hexokinase Reaction: ATP + D-hexose = ADP + D-hexose 6-phosphate Other name(s): hexokinase type IV glucokinase; hexokinase D; hexokinase type IV; hexokinase (phosphorylating); ATP-dependent hexokinase; glucose ATP phosphotransferase Systematic name: ATP:D-hexose 6-phosphotransferase Comments: D-Glucose, D-mannose, D-fructose, sorbitol and D-glucosamine can act as acceptors; ITP and dATP can act as donors. The liver isoenzyme has sometimes been called glucokinase. Příklad odkazu z databáze enzymů: http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/EC2/7/1/2.html
Doporučené (triviální) názvy enzymů(používají se v biochemii) 1) oxidoreduktázy:Aox + Bred Ared +Box * dehydrogenáza (H- or H) * reductáza * oxidáza * peroxidáza (různé peroxidy) * oxygenáza (O2) * hydroxyláza (= monoxygenáza; -OH) * desaturáza (-CH2CH2- -CHCH-)
2) transferázy: A-x + B A + B-x * skupinatransferáza (př.aminotransferáza) * kináza(= fosfotransferáza) * fosforyláza * transketoláza * transaldoláza
3) hydrolázy: A-B + H2O A-H + B-OH * esteráza (R1-CO-O-R2) * fosfatáza (fosfát-O-R) Pi !!! * fosfodiesteráza (R1-O-fosfát-O-R2) * nukleáza, peptidáza, glycosidáza, lipáza
4) lyázy: A-x B + x * dekarboxyláza ( CO2) * dehydratáza ( H2O) * hydratáza (-CHCH- + H2O -CH(OH)CH2-) * syntáza
5) izomerázy: A izo-A * epimeráza (monosacharid jeho epimer) * mutáza (změna polohy fosfátové skupiny v molekule)
6) ligázy: A + B + ATP A-B + ADP + Pi * syntetáza * karboxyláza
ENZYMY Žádanka na biochemické vyšetření:http://spch.cz/kliniky/kbi/laboratorni_prirucka/zadanka_biochemie.pdf (prosinec 2006)
Doplňte třídu, do níž každý z enzymů patří: AST aspartátaminotransferáza ALT alaninaminotransferáza GMT gamaglutamyltranspeptidáza ALP alkalická fosfatáza ACP kyselá fosfatáza AMS -amyláza LPS lipáza CK kreatinkináza CHE cholinesteráza LD laktátdehydrogenáza
Kofaktory enzymů oxidoreduktázy: NAD+nikotinamidadenindinukleotid NADP+nikotinamidadenindinukleotid fosfát (prekurzor: niacin = kyselina nikotinová)H- FAD flavinadenindinukleotid FMN flavinmononukleotid (prekurzor: riboflavin = vitamin B2)2 H hem Fe3+ + e- Fe2+e-
transferázy: ATP adenosinetrifosfát / fosfát GTP guanosintrifosfát / fosfát TDP thiamindifosfát / C-fragment (prekurzor: thiamin = vitamin B1) PALP pyridoxalfosfát / -NH2 (prekurzor: pyridoxin = vitamin B6) THF tetrahydrofolate / C1-fragment (prekurzor: kyselina listová) CoA koenzym A (HS-Co-A) / acyl PAPS fosfoadenosinfosfosulfát/ sulfát
3´-fosfoadenosin-5´-fosfosulfát (PAPS) přenáší sulfát do substrátu při konjugačních reakcích (sulfatace) Obrázek je převzat z http://web.indstate.edu/thcme/mwking/amino-acid-metabolism.html (leden 2007)
Koenzym A = CoA-SH Obrázky převzaty z http://lxyang.myweb.uga.edu/bcmb8010/pic/NAD+.gif a http://oregonstate.edu/instruct/bb450/stryer/ch14/Slide26.jpg (leden 2008)
Deriváty tetrahydrofolátu Obrázek převzat z http://www.dentistry.leeds.ac.uk/biochem/postgrad/thftypes.gif (leden 2008)
lyázy: PALP pyridoxalfosfát (dekarboxylázy) ligázy: ATP adenosintrifosfát acyl-CoA-syntetázy aminoacyl-tRNA-syntetázy biotin = vitamin H (karboxylázy)
Enzymová kinetika • activita, jednotky • 1 katal = 1 mol substrátu přeměněný enzymem za 1 sec. • 1 IU = 1 μmol substrátu přeměněný enzymem za 1 min. 1 katal = 1 mol / 1 sec. = 106μmol/ 1 sec. = 60 x 106μmol/ 1 min (= 60 sec.) 1 katal = 6 x 107 IU
Aktivita se vztahuje na konstantní koncentraci enzymu: [E] = konstantní Obrázek převzat z http://www.steve.gb.com/science/enzymes.html (prosinec 2006)
! DŮLEŽITÉ ! Obrázek převzat zhttp://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255enz/gk3x15.gif (prosinec 2006)
Kinetika Michaelis-Mentenové • průběh křivky (hyperboly) může být popsán rovnicí: Obrázek převzat z http://www.steve.gb.com/science/enzymes.html (prosinec 2006)