1 / 24

MOLEKÜLER GENETİK VE REKOMBİNANT DNA TEKNOLOJİSİ

MOLEKÜLER GENETİK VE REKOMBİNANT DNA TEKNOLOJİSİ. Prof.Dr.Öztürk ÖZDEMİR 2005-2006. The Tools of Molecular Biology. REKOMBİNASYON. Rekombinasyon: Yenibileşim - yenidenoluşum. Bir molekülün-hücrenin, atasal “wild type” yada ilkin(orijinal) yapısından farklılık göstermesi durumudur.

irma-valentine
Download Presentation

MOLEKÜLER GENETİK VE REKOMBİNANT DNA TEKNOLOJİSİ

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. MOLEKÜLER GENETİK VEREKOMBİNANT DNA TEKNOLOJİSİ Prof.Dr.Öztürk ÖZDEMİR 2005-2006

  2. The Tools of Molecular Biology

  3. REKOMBİNASYON Rekombinasyon: Yenibileşim - yenidenoluşum. Bir molekülün-hücrenin, atasal “wild type” yada ilkin(orijinal) yapısından farklılık göstermesi durumudur. I - In vivo rekombinasyon II- In vitro rekombinasyon

  4. Klon (Clone); Bir tek atasal diploid hücreden mitoz bölünme yoluyla birden fazla hücre eldesine denir. Rekombinant DNA teknolojisi ile sentezlenen identik DNA/gen kopyalarına denir. ”Gene cloning”

  5. Genetik Klonlamada TarihçeGelişme Araştırıcı Yıl  Deniz hayvanlarında döllenme O.Hertwig 1875  İlk kez anne rahmi dışında döllenme L.Schenk 1878  Tüp ortamında insan yumurta hücresi döllendi MF Menkin 1944  Dondurulmuş sperm ile inek yumurtası döllendi 1952  Deney tüpünde döllenen bir memeli yavru doğdu 1959  Dondurulmuş embriyodan yavru fareler elde edildi 1972  Louise Brown isimli bebek deney tüpünde döllendi anne rahmine yerleştirilerek sağlıklı doğum yaptırıldı 1978  Avusturalyada donmuş embriyodan sağlıklı bir kız çocuğu elde edildi 1984

  6. Genetik Klonlamada TarihçeGelişme Yıl  Kiralık anne Mary Beth bebeğini vermeyi redetti. 1986  Embriyo hücrelerinin çoğaltılmasıyla çok sayıda kuzu elde edildi 1987  İnsan embriyosu klonlandı çok tepki aldı J.Hall 1993  Dolly klonlandı I.Wilmut 1997  Fransada bir dananın 63 klonu elde edildi 1999  Totipotent stem hücrelerinden deneysel organogenezis 2000  Farede gen klonlama yöntemiyle insan kulağı gelişimi sağlandı 2001  Avusturalyada bir at klonlama ile Coada eşek doğurdu 2002  Amerikada ex vivo yapay rahim geliştirildi 2002

  7. Klonlama Tipleri  DNA /Gen düzeyinde klonlama  Hücre düzeyinde klonlama  Organizma /çekirdek düzeyinde klonlama

  8. Başarılı Klonlama Yapabilmek İçin Gen; Bağımsız olarak replike olabilmeli Konak hücreye kolaylıkla transfer edilebilmeli Seleksiyona olanak tanımalı

  9. Memeli Hücrelerine Gen Transfer Teknikleri Microinjection***DAAE-Dextran MediatedElectroporationLipofection Calcium Phosphate*** Protoplast Fusion Polyprene Viral infection*** (Lentivirus, Retrovirus, Adenovirus) *: Yaygın kullanılan yöntemler

  10. Genetik Klonlamada Kullanılan Vektörler  Plazmid 5-10 kb  Bakteriyofaj 20 kb  Cosmid 50 kb  YAC 100 kb  Baculovirus 150 kb  BAC 200 kb  PAC 250-300 kb  Lentivirus ** ~ 100-200 kb

  11. The construction of Mammalian Transfection Vector For Expression of Cytosine- 5 Specific DNA Methyltransferase Gene M.Msp1 In Cultured CellsOzturk OZDEMIRReceived 01.05.1997

  12. STOPLAZMİK KALITIM(YUMURTA HÜCRESİ) • Regülatör - modülatör proteinler • Yumurta polarity genler • Segmentasyondan sorumlu genler (25 adet) • Yumurta hücresindeAnterioposterior gradiyent farkı • Remodelling faktörler ; • zigotik effect • integrinler • transkripsiyon faktörleri • pair-rule genler • segment polarity genler • Homeodomeik, Hox (Homeobox) fetusa ait genler

  13. Nükleer Transplantasyon • Wilmut ve arkadaşları donör hücre olarak 6 yaşında sağlıklı bir koyunun meme epitel hücresi ve resipient hücre olarak ise aynı koyunun metafaz II evresinde bekletilmiş enucleated yumurta hücresi kullandılar. Klonlama sonrası elde edilen ve annesiyle %100 aynı genotip ve fenotipte olan sağlıklı kuzuya DOLLY adını verdiler.

  14. DOLLYDoç.Dr.Öztürk ÖZDEMİR

  15. Nükleer KlonlamanınÖnemi  Yumurta hücresinin embriyogeneziste spermden farklı artı(+) öneminin olduğu,  Ökaryotik hücrenin G0 evresinde totipotent kromatin organizasyonu kazandıği,  Metafaz II evresinde yumurta hücresinin klonlama için en uygun stage olduğu,  Memelilerde eşeysiz üremenin mümkün olduğu,  Bir gen yerine çekirdeğin tamamının transplante olabileceği gösterildi

  16. KlonlamaSonrasında;  Unipotent hücrenin totipotent hücreye dönüştürülmesi,  Sinir hücrelerinin rejenerasyonu,  Telomerlerde ” end replicatin problem”giderilerek, yaşlanmanın geciktirilmesi,  Stem hücrelerinden spesifik doku eldesi,  Epigenetik modifikasyonu ile kanser tedavisine yeni bir yaklaşım, “Ex vivo gene replacement” ile genetik tedavi ve  İnsan genom projesi önemli bir ivme kazanmıştır.

  17. Goals of DNA Technology • Isolation of a particular gene or sequence • Production of large quantities of a gene product • Protein or RNA • Increased production efficiency for commercially made enzymes and drugs • Modification/improvement of existing organisms • Correction of genetic defects

More Related