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Tema 27. Recombinación y mapas genéticos en virus. contenido. 27. Recombinación y mapas genéticos en virus. • Trabajando con virus bacterianos (bacteriófagos = fagos) • Mapas gen éticos en virus • Peculiaridades de la recombinaci ón en virus. fagos. infecci ón. halos de lisis.
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contenido 27. Recombinación y mapas genéticos en virus • Trabajando con virus bacterianos (bacteriófagos = fagos) • Mapas genéticos en virus • Peculiaridades de la recombinación en virus
halos de lisis césped bacteriano Halos de lisis
r+: halos pequeños, de bordes difusos; r- (lisis rápida): halos grandes, de bordes lisos h+: infectan E. coli B (y no B/2); h-: infectan E. coli B y E. coli B/2
¿cómo se determina la posición de un gen en el genoma de un fago? B técnica de indicadores mixtos Delbruck, 1945 B + B/2
Mutantes h y r del fago T2 E. coli B y E. coli B/2
Mapa genético en T2 Hershey y Rotman, 1949 descendientes frecuencias h+r+ hr+ h+r hr parentales 0,24 0,12 0,0168 h x r1 12 42 34 12 h x r7 5,9 56 32 6,4 h x r13 0,74 59 39 0,94 mapas posibles h r13 r7 r1 r13 h r7 r1 r1 r13 h r7 r1 h r13 r7 r7 x r13 = r+ estos recombinantes x 2 < recombinantes (h x r7) quedan anulados 2º y 3º mapas Solución final: 1 y 4 eran lo mismo
Las recombinaciones se dan en varios ciclos repetidos Infección con tres fagos T2 particularidades de fagos +++ ++r h++ +m+ h+r hm+ +mr hmr h m+ r+ x h+ m r+ x h+ m+ r 25 22 17 12 9 5 7 2 h m r+ x h+ m r x h m+ r 3 5 6 10 17 19 14 26 La recombinación en fagos es un fenómeno de población (intercambio por rotura y reunión) FR máxima en fagos = 25% 1/2 encontrar otro genoma diferente X 1/2 cuando genes muy lejanos = 0,25 FR máx en fagos de E. coli: T2 y T4 ≈ 30% (varios ciclos de intercambio) ; ≈ 15% (un sólo ciclo)
5+13 = 3,62 coef. de coincidencia = = RDo RDe 0,0382 X 0,0622 X 2091 ,0382 ,0622 s c m m +++ scm s++ +cm sc+ ++m s+m +c+ scm x +++ 975 924 30 32 61 51 5 13 En los fagos se da interferencia “negativa” Interferencia = 1 - 3,62 = -2,62 • Interferencia negativa en fagos debida a: • múltiples ciclos de apareamiento e intercambio (interferencia negativa baja) • concentración de enzimas de recombinación (interferencia negativa alta) Heterocigosis en fagos Fagos son ‘n’, excepto para los genes en redundancia terminal Heterodúplex, formados en el proceso de recombinación s-c = 0,0382 c-m = 0,0622 s-m = 0,0832
problemas capítulo 9 problemas: 1-12 aprox. 1h de clase