Trade name: Orchid Callus Stem Cell Extract

1. Skin regeneration system Orchid Callus Extract for Skin Regeneration Trade name: Orchid Callus Stem Cell Extract 특허 출원번호: 10-2009-0045301 난초 캘러스 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 및 그 제조방법 피부 세포 성장 및 증식으로 인해 피부세포를 활성화 보습효과, 피부 재생 및 피부 진정에 탁월한 효과 ㈜ 인투메디 02-868-1921 WWW.INTOMEDI.NET기술제휴 : 바이오fdnc

2. Contents 1. 식물조직배양 & 전형성능 2. 식물조직배양과정 3. 식물생장조절물질 4. 식물조직배양기술의 장점 5. 난 캘러스 추출물의 항염 효과 6. Bio-FD&C 캘러스 목록

3. 식물조직배양 & 전형성능 식물조직배양(Plant Tissue Culture) - 식물의 전형성능을 이용하여 식물조직의 세포, 조직, 기관, 배, 종자 및 식물체의 일부를 영양소가 첨가된 배지에서 키우는 것 - 초기에는 번식이 주요목적이었으나, 현재에는 다양한 분야에 이용 전형성능(Totipotency) • 생물의 세포나 조직이 그 종의 모든 조직과 기관을 분화하여 • 완전한 개체를 형성하는 능력 • - 즉, 식물체를 구성하는 한 개의 체세포에서 새로운 식물이 복원한다는 것

4. Application of Plant Tissue Cultures in Phytoremediation Research Biotechnology and Bioengineering, Vol.103, No. 1, May 1, 2009

5. 식물조직배양과정 종자의 무균발아 종자를 70% EtOH로 1분간 소독 1% Sodium hypochlolite를 이용하여 5분간 멸균 멸균 증류수로 3 ~ 4회 세척 25℃, 3000 lux, 16/8h 광주기의 배양실에서 약 6~8주 동안 발아 배지 조성 3% Sucrose, 0.7% Agar 및 여러 가지 농도의 Auxin & Cytokinin이 첨가된 MS배지 식물 종에 따라서 카세인 가수 분해물 등의 천연 유기물질 등을 첨가 캘러스 유도 약 6~ 8주 정도 자란 유식물체의 잎을 절편체로 사용하여 캘러스 형성

6. 식물생장조절물질 Cytokinins Auxin : 생장 촉진 2,4-D 2,4,5-T Dicamba IAA IBA MCPA NAA NOA Picloram : 세포분열촉진 BAP 2iP Kinetin Thidiazuron Zeatin • - 생장조절물질로서의 옥신과 사이토키닌의 농도와 양자의 비율이 식물조직의 • 탈분화, 캘러스 증식 및 재분화 등을 지배 • 그 반응은 식물종에 따라 현저하게 차이가 있기 때문에 각각 독자적으로 검토해야함

7. Plant Growth Regulators & Tissue Culture The ratio of the auxin to the cytokinin determining the type of culture established or regenerated • - Intermediate ratio : callus production • A high cytokinin to auxin ratio : shoot formation • A high auxin to cytokinin ratio : root formation The effect of different ratios of auxin to cytokinin on the growth and morphogenesis of callus

8. Arabidopsis Explants Regenerating in Tissue Culture form Shoots, Calli or Roots depending on Culture Conditions • Explants were incubated on callus induction media • and then transferred to cytokinin-rich SIM, fresh CIM or auxin-rich RIM

9. 식물 조직배양기술의 장점 - 희귀성과 고부가가치성의 단점을 보완 - 일반화된 조직배양기술을 이용하여 대량증식 - 균일하고 우수한 품질의 난을 단기간 내에 적은 비용으로 대량 배양, 생산하여 다양한 분야에 이용 * 추출물 제조의 단점 배양, 회수, 세척, 건조, 침적, 숙성 및 여과 등을 포함하는 여러 단계를 통해 추출물을 수득하여 화장료 조성물로 이용하기 때문에 시간적, 경제적 비용면에서 불리 * 용매를 이용한 추출공법 또는 초임계 추출공법에 의한 추출물의 단점 단시간 내에 대량의 고순도의 성분 추출은 기대할 수 있지만, 추출된 성분들이 시간 경과에 따라 빛, 공기, 온도 등의 영향으로 자체 침전되거나, 색 변화가 발생하는 등의 안정성에 문제가 있어, 조성물에 첨가하였을 때 조성물의 성질에 영향을 미치는 단점 * 상기 추출물들은 충분한 숙성 기간을 거치지 않고 대부분 단기간 짧은 시간 동안 침적이나 숙성을 통하여 수득하므로 유용성분에 대한 충분한 추출효과를 기대하기 어려운 단점이 있고, 부가적인 분리 및 정제 단계를 거치지 않고서는 유용성분만을 다량으로 추출하지는 못하므로 추출물 자체만으로 높은 농도의 유용 성분을 함유하는 화장품을 제조하기에 불리

10. 춘 란(春蘭) • 동양란, 봄에 꽃을 피우는 난을 통칭 • 사계절 푸르름을 잃지 않고 잎선이 그리는 넉넉한 자태와 맑고 청아한 향기 • 선인들에게서 사군자 중의 하나로 분류 • 배양과 육성이 대중화되면서 새로운 문화, 즉 난 문화로 정착 • 지역적으로 한국춘란, 중국춘란, 일본춘란, 대만춘란, 중국 오지춘란으로 구분 • 일경일화: 꽃대 하나에 꽃 한 개, 한국, 중국, 일본, 대만에서 배양 • 일경구화: 꽃대 하나에 꽃을 피움, 중국에서 집중적으로 배양, 근래에는 한국의 남해 도서지방에서 배양 • 중국, 대만, 중국 오지 춘란은 춘란 고유의 여러 가지 향을 가지고 있으나 한국춘란과 일본춘란은 향기라기 보다 • 약간 비릿한 향기

11. 난 캘러스 추출물의 항염 효과 염증유발물질 LPS(1μg/ml)처리 LPS처리(1ug/ml) 0.5 % ~ 5 %의 Orchid Callus Extract 처리시 세포독성을 보이지 않으면서 NO 생성량이 두드러지게 줄어든 것으로 보아 항염효과를 확인할 수 있다

12. 난 캘러스 추출물의 세포증식효과 대조군과 비교하여 Orchid Callus Extract의 피부 세포 증식능으로 인한 피부세포활성 우수

13. 난초 캘러스 추출물의 보습효과 실험 난초 캘러스 추출물 함량이 틀어날수록 보습효과가 뛰어남 정제수와 비교하여 1%의 난초 캘러스 추출물의 뛰어난 보습효과 감사합니다.