180 likes | 282 Views
CIKLODEXTRINEK ALKALMAZÁSA SZERVES SZENNYEZŐANYAGOK BIODEGRADÁLHATÓSÁGÁNAK JELLEMZÉSÉRE. Kánnai Piroska Témavezető: Dr. Fenyvesi Éva Konzulens: Dr. Torkos Kornél. A szennyezőanyagok kockázatát a biológiai hozzáférhetőségük határozza meg. Biol ógiailag elérhető (lassan deszorbeálódó).
E N D
CIKLODEXTRINEK ALKALMAZÁSA SZERVES SZENNYEZŐANYAGOK BIODEGRADÁLHATÓSÁGÁNAK JELLEMZÉSÉRE Kánnai Piroska Témavezető: Dr. Fenyvesi Éva Konzulens: Dr. Torkos Kornél
A szennyezőanyagok kockázatát a biológiai hozzáférhetőségük határozza meg Biológiailag elérhető(lassan deszorbeálódó) Biológiailag hozzáférhető(a vizes fázisban oldott vagy könnyen deszorbeálódó) Biológiailag nem elérhető Nem deszorbeálódó
A szennyezőanyagok hozzáférhetősége Összes szennyezőanyag a talajban Kémiailag extrahálható mennyiség • Meghatározó tényezők: • Vegyület transzportja • Bejutása a sejtbe • Szennyezettség kora Biológiailag hozzáférhető mennyiség
Kitűzött céljaim: • A biológiai hozzáférhetőség és a mikrobiológiai lebontás folyamatainak modellezése egyszerű kémiai extrakciós lépésekkel • A lassú és költséges biotesztek kiváltása • PAH-vegyületek biodegradálhatóságának becslésére javasolt ciklodextrines extrakciós módszer kipróbálása keverék-szennyezőanyagokra: dízelolajra, transzformátorolajra és pakurára • Összefüggéskeresés a biológiai és a kémiai vizsgálatok eredményei között
A ciklodextrinekről (CD) HPBCD: hidroxipropilezett bCD RAMEB: random metilezett bCD
Alkalmazott módszereim • Biológiai módszerek a talajmikroflóra és a talajaktivitás jellemzésére: • Biodegradációs tesztek: • Zárt palack teszt • Átlevegőztetett rendszer • Szénhidrogénbontó- és aerob heterotrófsejtszám meghatározása • Ökotoxikológiai teszt • Kémiai extrakciós eljárások: • Kimerítő: • Hexán-aceton 2:1 • Nem kimerítő: • RAMEB ill. HPBCD • 10%-os vizes oldata
Ökotoxikológiai tesztek Folsomia candida (Collembola): Akut, egy fajt alkalmazó teszt A mikrobiális tevékenység hatására nő a szennyezőanyagok hozzáférhetősége (feltáródás) és megindul a lebomlás. Az előbbi a toxicitás növekedését, az utóbbi csökkenését okozza.
Biodegradációs teszt Zárt palack teszt O2 fogyasztást és ezzel nyomáscsökkenést mértem 5 napon keresztül Megállapítható: Toxikus hatású-e a szennyezőanyag, Gátolja-e a mikrobák működését, Adaptálódott-e a mikroflóra, és aktívan működik-e, Aktiválható-e a mikroflóra, Ha aktiválható, akkor milyen technológiai paraméterek szükségesek az optimális működéshez
Biodegradációs teszteredményei Nyomáscsökkenés az 5 napos zárt palack teszt során A dízelolaj sokkal gyorsabban és könnyebben bontható a nagyobb mólsúlyú komponenseknél
Módszer Ultrahang Ülepítés Vizes oldatok esetén szilárd fázisú extrakcióval vízmentesítés, elúció hexán-aceton 2:1 eleggyel Gázkromatográfia Extrakciós eljárások • Gázkromatográf: Shimadzu GC-17A • Detektor: Lángionizációs detektor (FID) • Mintaadagoló: Shimadzu AOC-5000 automata mintaadagoló • Injektor: Split-splitless • Gázok: • Vivőgáz: Hélium (99,999 %) • Segédgázok: Nitrogén (99,999 %) • Szintetikus levegő (99,999 %) • Hidrogén (Whatman Hidrogén generátorból) • Oszlop: BP1 (13m x 0,2mm x 0,11mm) • Hőfokprogram: A kolonnát 50 C-on tartjuk 3 percig, majd • 315C-ra fűtjük 10 C/min-es felfűtési sebességgel, 12 percig tartjuk • Injektor hőmérséklete: 325C • Detektor hőmérséklete: 325C • Split/splitless: Splitless, 0,5 min • Lineáris áramlási sebesség: 14 cm/sec • Injektált térfogat: 2 l
A vizsgált talajminták gázkromatografálható szénhidrogén tartalma (EPH) és gravimetriásan mérhető szénhidrogén tartalma (SEM)
Ciklodextrines extrakció- eredmények A biodegradáció 2. hetében megnövekedett a RAMEB-oldattal kiextrahálható szénhidrogén-tartalom A HEH folyamatosan csökken a kísérlet során REH: RAMEB-oldattal extrahálható szénhidrogén-tartalom HEH: HPBCD-oldattal extrahálható szénhidrogén-tartalom
Kromatogramok minőségi értékelése A kémiailag kinyerhető össz-szénhidrogén mennyisége fogy a kísérlet során A CD-k a kisebb C-atomszámú komponenseket extrahálják jobban A RAMEB -oldat számára kedvezőbb komponensek táródnak fel A HPBCD-oldat szelektívebb extrahálószer 600 540 480 420 360 300 240 180 120 60 0 Kiindulási 6 hét után • Hexán-aceton 2:1 eleggyel Kiindulási 6 hét után Kiindulási 6 hét után RAMEB -oldattal HPBCD -oldattal
Összefoglalás • A biológiai hozzáférhetőség becslésére nem kimerítő extrakciót alkalmaztam • Kimutattam, hogy a CD-k a kisebb C-atomszámú komponenseket extrahálják jobban, különösen a HPBCD • Eredményeit összevetettem a biológiai tesztekével • Megállapítottam: • a HPBCD -oldatos extrakció alapján becsülhető a biológiailag elérhető szennyezőanyag-frakció • Alkalmas a folyamatok követésére: nőtt a hozzáférhető szennyezőanyag koncentrációja, megindult a mikrobiológiai lebontás a kezelések hatására
KÖSZÖNÖM A FIGYELMET! Dr. Fenyvesi Éva (CycloLab Kft.) Dr. Torkos Kornél (ELTE) Balogh Klára (CycloLab Kft.) Dr. Molnár Mónika (BME) Dr. Szente Lajos (CycloLab Kft.) Dr. Gruiz Katalin (BME) Dr. Záray Gyula (ELTE)