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This study aims to define a protocol for the molecular identification of methanogenic archaea in anaerobic sludge, crucial for developing bioaugmentation strategies for landfill leachate treatment systems. Results show challenges in DNA extraction, necessitating new protocols for purity and yield improvement.
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Identificação molecular de metanogênicos presentes em lodo anaeróbio de tratamento de lixiviado de aterro sanitárioGabriela Morgado Deleu1, Maria Carolina Vieira da Rocha2; Felipe Carneiro2, Maria Cristina Borba Braga*Departamento de Hidráulica e Saneamento- DHS/UFPR1 aluna IC voluntária; 2 colaboradores; *professora orientadora (crisbraga@ufpr.br) Introdução/Objetivos Resultados/Discussão O produto de amplificação da PCR (Figura1) foi visualizado em gel de agarose 2%, entretanto, após corado, não foi possível observar bandas nítidas das sequências amplificadas; - Durante a corrida eletroforética, apenas duas amostras apresenta- ram amplificação (Figura 2); - Em outras amostras é possível verificar presença de ácido nucleico, mas não sua amplificação efetiva. O principal objetivo desse estudo é definir um protocolo para identificação molecular de arqueasmetanogênicas presentes em lodo anaeróbio. A caracterização desses microorganismos será utilizada para determinação de uma metodologia de bioaumento em sistemas de digestão anaeróbia para tratamento de lixiviado de aterro sanitário. Figura 1. Produto da PCR Método Figura 2.Corrida eletroforética em gel de agarose 2% Conclusões A falta de protocolos de extração de DNA metanogênico dificul- ta sua realização. Interferentes como presença de ácidos húmi- cos e polissacarídeos, além da grande diversidade microbioló- gica de amostras ambientais e similaridades entre sequências também podem afetar detecções moleculares. Novos protocolos serão testados para obtenção de DNA meta- nogênico com pureza e rendimento adequado. Referências Kingsley, D. H.; Richards, G. P. Applied and Environ- mental Microbiology,2001/ Brock, T.D.; Biology of mi- croorganisms,2000/ Sambrook,J.; Molecular cloning, a laboratory manual,1989.