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Examen directo

KOH. KOH - NaOH 20 – 40X. Examen directo. Piel - Uñas. Hifas hialinas septadas con o sin ramificación a veces se fragmentan en artroconidios Hifas toruloídeas o hifas alteradas. Pelos: 3 tipos de parasitismo. Ectotrix: artroconidios en el exterior del pelo. (Microsporum canis).

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Presentation Transcript

  1. KOH KOH - NaOH 20 – 40X Examen directo

  2. Piel - Uñas • Hifas hialinas septadas con o sin ramificación a veces se fragmentan en artroconidios • Hifas toruloídeas o hifas alteradas

  3. Pelos: 3 tipos de parasitismo Ectotrix: artroconidios en el exterior del pelo. (Microsporum canis) Ectotrix

  4. Endótrix artroconidios e hifas en el interior del pelo Fávico burbujas de aire en el interior del pelo, hifas y artroconidios en el interior y exterior.

  5. 4. Cultivo • Sabouraud (Sb) glucosado • Agar papa (PDA) • Lactrimelpigmentos y fructificación • DTM (Dermatophyte test medium)rojo de fenol que en presencia de metabolitos alcalinos producidos por los dermatofitos vira el color del medio amarillento a rojo • Agar Miel de Sabouraud

  6. 4. Cultivo Incubación: 25-28ºC 35-37ºC Tiempo: h\ 15 días con antibióticos (cloranfenicol \ estreptomicina) con y sin cicloheximida Inhibe especies de Scopulariopsis, Fusarium, Endersonula, Trichosporon, Aspergillus

  7. Identificación Observación Descripción Detalle

  8. Morfología macroscópica Identificación • Colonias alcanzan su madurez y estabilidad entre 2-3 semanas. Se debe considerar: • Textura(glabra, algodonosa granular, pulverulenta, etc) • Topografía (rugosa, crateriforme, verrucosa, plegada) • Colorde la superficie y reverso de la colonia • Velocidad de crecimiento • Difusión de pigmento

  9. MORFOLOGIA MICROSCOPICA Macro conidios (15-90 micras) • Hifashialinas septadas, ramificadas. • Conidios:Macroconidios y microconidios. Micro conidios (2-5 micras) Permiten la diferenciación en 3 géneros

  10. Género Microsporum Macroconidios: paredes gruesas, rugosas, fusiformes de tamaño variable, multiseptados (1-15 septos), Microconidios: - sésiles, pedicilados o clavados, escasos o ausentes (en algunas especies) - generalmente se disponen solitarios a lo largo de la hifa. (abundantes)

  11. M. canis

  12. M. gypseum

  13. Género Epidermophyton E. floccosum Macroconidios : ampliamente clavados, extremos redondeados, paredes lisas y delgadas con 1-4 septos (gralmente abundantes) nacen solitarios o en racimos. No produce microconidios

  14. E. floccosum

  15. Trichophyton Microconidios: - globosos, piriformes, clavados, sésiles, pedicilados, - nacen solitarios a lo largo de la hifa o como racimos de uvas. Macroconidios: Paredes delgadas y lisas , 1-12 septos, nacen solitarios o en racimos. Forma: variable, elongados (làpiz), clavado, fusiforme, cilindrofusiforme, extremo distal romo. (abundantes)

  16. Trichophyton rubrum

  17. Trichophyton mentagrophytes

  18. T. interdigitale

  19. Trichophyton mentagrophytes

  20. Determinación de caracteristicas fisiológicas o bioquímicas Prueba de la ureasa contiene rojo de fenol, cuando se hidroliza la urea, se libera amonio, alcalinizando el medio Agar urea de Christensen: diferencia T rubrum de T. mentagrophytes Positivo : aparición de color rojo donde se inoculó la cepa incógnita • Interpretación : • T rubrum : negativo • T mentagrophytes : positivo Incubar a 25° y leer diariamente hasta el 7° día

  21. Perforación del pelo “in vitro” • Propósito : Diferenciar T.rubrum de T mentagrophytes • detecta la formación de órganos perforadores. • Técnica : • - Colocar 20-30 segmentos de pelo humano (pre-púberes ) de 15-20 mm en una placa de petri. Autoclavar 120°C por 15 min. • - Agregar 20 ml de agua destilada esteril y 2-3 gotas de extracto de levadura al 10% esterilizado previamente por filtración. • - Inocular las placas con la colonia en estudio . • -Incubar las placas a 25°C en oscuridad y examinar semanalmente durante 4 semanas. • Lectura : Observación microscópica del pelo. • Perforaciones en forma de cuña que penetran radialmente el pelo • Interpretación : • T. mentagrophytes: perfora el pelo. • T. rubrum: crece y no perfora.

  22. FIN!!!!!

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