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FECUNDACIÓN EN PECES

FECUNDACIÓN EN PECES. Blga. Acui. Carmen Yzásiga Barrera Blga. Pesq. Eliana Zelada Mazmela. FECUNDACIÓN. Fenómeno por el cual se fusionan gametos femeninos y masculinos  Cigoto TIPOS a) Externa: - Ambos progenitores lejos. E.g.: trucha - se acercan en un verdadero apareamiento

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FECUNDACIÓN EN PECES

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  1. FECUNDACIÓN EN PECES Blga. Acui. Carmen Yzásiga Barrera Blga. Pesq. Eliana Zelada Mazmela

  2. FECUNDACIÓN • Fenómeno por el cual se fusionan gametos femeninos y masculinos  Cigoto • TIPOS • a) Externa: • - Ambos progenitores lejos. E.g.: trucha • - se acercan en un verdadero apareamiento • b) Interna: - Presencia de espermateca, falso pene, gonopodio • En el interior de la hembra • La fecundación = asociación gamética interna

  3. Eventos: • Ova cae al agua  adquiere forma, agua entra memb. del huevo y la masa central • Espermatozoide penetra por MICROPILO. • Formación del espacio perivitelino (exocitosis de alveolos corticales desde el micropilo hasta la zona vegetativa) • M. Vitelina se hace impermeable  reacción cortical • Micrópilo se cierra y se eleva • Sellado por sust. de la ves. de vitelo  • Hinchamiento egg. • Las vesículas de vitelo endurecen más la m. vitelina memb. de fertilización • Huevo turgente y duro al tacto • V. vitelo también endurecen al corión Tapón micropilar 1 – 2´externa 30´interna

  4. Antes de la fecundación : • Corión con agujeros • Corión con filamentos enrollados. (desenrollamiento de los filamentos es indicador de la activación del huevo). Depende de Sp

  5. Fertilización: Cuando ambos pronúcleos se fusionan, los cromosomas se juntan  amfinexis y se inicia proceso de desarrollo embrionario

  6. MICROPILO: • Abertura en la zona radiata • Abertura recta como un embudo • Canal micropilar • Un hoyo con un canal micropilar

  7. TIPOS DE OVAS: • Libres • Sobrenadantes p.e.< H2O • Flotantes p.e. Lig > H2O • Semiflotantes en la columna de H2O • Rodantes p.e.> H2O No pegajosos Pegajosos temporalmente Peso especifico depende de: volumen del espacio perivitelino y peso de la masa central Pesada: sin gotas de grasa Ligera: con gotas de grasa

  8. Sobrenadante Flotante Semiflotante Rodante

  9. b)Adherentes: • La membrana presenta una capa adhesiva que se activa al contacto con el agua: • a objetos entre sí : • Adhesividad  con So/oo y tiempo • Atherinidae: al pasar por el tracto genital sufren una descomposición y desenrollan sus filamentos adhesivos.

  10. SEGÚN VITELO: cantidad y distribución • En líneas generales el huevo puede variar de tamaño • La reducción de ova no a expensas de vitelo: • Dimensiones de la masa central • Espesor de la membrana • Espacio perivitelino

  11. Huevo mesolecito: mediano, con cierta cantidad de vitelo depositado en el hemisferio posterior Telolecito: mayoría, también en condrictios como tiburón. Mayor tamaño, vitelo representa mayor volumen En teleósteos actuales, huevos pequeños

  12. Espermatozoide: • Sin acrosoma. • No tiene motilidad hasta que entra en contacto con H2O  “activación” • pH . P.o. Contenido iónico • Arenque del Pacífico: 4 – 5 d. • H2O dulce no más de 2 – 3´ • Carpa común:> motilidad 30 – 60” desaparece luego de los 5´ • Motilidad no es garantía absoluta de fertilidad pero los que la han perdido ya no pueden fecundar

  13. Distancia recorrida: Turbot: 12mm; carpa: 4,8mm; trucha: 3mm Modelo de frec. golpeo  refleja su cap. para fecundar turbot: 40/seg Atractante químico Poder de fecundación: Duración e intensidad golpeo Densidad de esp. emitidos

  14. MANIPULACIÓN DEL ESPERMA • Machos poco considerados en reproducción inducida • Suspensión de espermatozoides en líquido seminal que resulta de la hidratación de testículos. Permanece inactivo dentro de pez. Se activa en H2O, motilidad frenética y de corta duración  1´ • Tiempo motilidad  caract. Diluyente: * osmolaridad • * comp. iónica Grado de dilución con diluyente y composición. Determina la presencia o no de activación y el tiempo de motilidad

  15. Manipulación: • Aumento de volumen: Facilita utilización cuando hay poco. • usar diluyentes que no activen  usar semen después • Ssf: 0,7 – 1,0% NaCl activan pero prolongan • [espermat.]  106 – 109/ml  diluir 10 veces • Sp grado de mad. B) Prolongación de motilidad Incrementar 20 – 60 veces mejorando la tasa de fertilización Son  para H2O dulce y salada También para evitar aglutinación Sol. Carbomida: 3% NaCl + 4% úrea

  16. C) Conservación a corto plazo • No diluido a T° amb: 0,5 – 1,5h • No diluido a 4°C : 3h – 3d • Con antibiótico a 4°C: 3 – 12d • Con diluyente (D) energético, c/antibióticos a 4°C: hasta 30d (D:e =1:1) • No debe estar activado D: 5 ml yema 5ml citrato de Na 3,1% 80 ul(50mg/l de sulfato de gentamicina) 55mg de piruvato de Na

  17. Valoración espermática • Motilidad: Indicador de eficiencia. Al microscopio con diluyente • (D:E) = 4:1 5”  • No usar laminillas. Porque ocasiona asfixia • Se anota como una estimación %. Desechar movimientos previos • b) Coloración diferencial: diferenciar espermatozoides vivos de muertos. Láminas preparadas. Indica viabilidad Índice de la eficiencia del esper Tipo diluyente y grado de dilución > 4:1

  18. c) [esperma]: * Conteo * Neubauer * Espermatocrito: centrífuga * espectofotómetro: 420nm Raramente es problema para la valoración espermática d) Fertilización: Medida más cierta es la tasa de fertilización

  19. PROCESO ARTIFICIAL • Fecundación: • En seco: • En húmedo: • Sol. Salina: • Sol. Carbomida: NaCl 0,4% + úrea 0,3% (10 – 20 % vol huevos) • Requerimientos esperma: calidad de huevos • Turbot: 1500 huevos gupi :50000 – 10000 • Trucha: 20000 – 30000 catfish: 40000 • Carpa: 13000 – 300000 • Lucio: 26000 - 700000

  20. Fecundación artificial Calidad del H2O: manantial T° : 25°C Conductividad 40 umhos.cm O2: 6 ppm CO2 L : debe ser 0,0; pero H2O manantial tiene 12 ppm ¡cuidado! NH3: 0,35 ppm DoMg: 1,00 DoCa: 19,00 pH: 5,6 ¡cuidado! Niveles menores de 5,5 presentan [CO2] que se adhieren al huevo como burbujas

  21. >O2 al inicio de incubación, Colossoma requiere más que otros peces Demanda de O2 en mg/100000 larvas • 10000 huevos 2500 mg O2 rep durante desarrollo que dura 50 h  • 100000 huevos gamitana 2500 mg 12 – 14 h • Insuficiente 4 mg/L [ ] influye en la velocidad de difusión. Causa deformaciones (10-35%) y eclosión prematura • T°: >res de 31°C fatal para mayoría

  22. Incubadoras • Aguas frías • Aguas calientes • Flujo: 0,6 – 0,1L/seg en incubadoras de 60 L • 2L/min. Brasil 600 ml de ovas • Carga: 30 – 50g ovas (30000 – 50000)

  23. CRITERIOS DE UNA BUENA INCUBACIÓN • Incubadora de material neutral • Flujo corriente H2O. Ingreso con tubo angular • Retiro continuo de CO4 NH3 • Movimiento suave de H2O • Desborde de H2O con filtro

  24. EMBRIOGÉNESIS EN PECES

  25. EMBRIOGENESIS • A) Segmentación o clivaje: División  blastómeros  cigoto se convierte en un embrión multicelular  blástula Crecimiento hacia espacio perivitelino Segmentación meroblástica Disco de unas células de espesor (hoja plana) (la polaridad está relacionada con los ejes del futuro cuerpo)

  26. La segmentación se inicia con la división del núcleo luego la del citoplasma. • Contracciones oscilatorias causan migración del citoplasma cortical periférico hacia el polo animal, donde se forma el blastodisco. • Dos pequeñas marcas en el blastodisco sirven para identificar la localización del surco de segmentación. • El plano de esta primera división es generalmente vertical. La célula se divide en dos células hijas. (blastómeros).

  27. Las gotas de aceite migran hacia el polo vegetativo y coalescen aumentando de tamaño. • La segunda división es vertical y atraviesa al eje principal formando ángulos rectos con el primer plano de segmentación. • El plano de la tercera división forma ángulos rectos con los dos primeros planos y el eje principal del huevo

  28. De los ocho blastómeros, cuatro se sitúan encima de los otros cuatro, igualmente superpuestos. • Los cuatro primeros blastómeros incluyendo el hemisferio animal del huevo y los restantes en el hemisferio vegetativo. • El plano de la cuarta división celular es paralelo al de la segunda división y divide las dos filas de blastómeros en cuatro blastómeros cada una, formándose 16 blastómeros. La quinta división celular da origen a 32 blastómeros.

  29. Células en contacto con vitelo  región vegetal • La segmentación origina: • Blastódérmicas: son diferentes. • Periblásticas: entre vitelo y blastodérmis cubriendo la masa vitelina. Se origina de los blastómeros exteriores y más marginales. Se vuelven sincitiales y son responsables de la movilización del vitelo. • Cav. Segmentación: o blastocele, está entre el blastodermo exterior y el periblasto. • Áreas pre – destinadas: tracto digestivo, notocorda, células neurales y epidérmicas, la región del mesodermo potencial.

  30. Blastula – Gastrula • No es típica • El embrión se transforma en un estadío con 2 capas • Exterior o epiblasto  ectodermo • Interior o hipoblasto  mesodermo – endodermo • Se establece eje antero – posterior, la gástrula se alarga y las zonas formadoras de órganos se extienden • Borde inferior de blastodisco se engruesa  borde germinal, se le agrega el anillo germinal (capa interna células) Engrosamiento en el borde int. Más grueso en la parte caudal  escudo embrionario

  31. Se abre el blastoporo • Las células endodérmicas del escudo pasa por debajo del blastodermo  región endodérmica del hipoblasto • Células de la placa precordal y de la notocorda establecen eje embrionario. • Células mesodérmicas potenciales, se acomodan por si solas al lado del eje por debajo del ectodermo  región mesodérmica del hipoblasto • Ocurre una proliferación y laminación de los componentes ectodérmicos y mesodérmicos se organizan para formar primordios de los sist. orgánicos internos.

  32. Células del anillo germinal y ectodérmicos que no participan en la involución, crecen cubriendo por completo la masa vitelo  epiblasto  el periblasto y epiblasto al cubrir el vitelo forman el saco vitelino. la presunta placa neural, precursora de SNC se transforma en crestacubierta por epidermis Se hace tubular  TUBO NEURAL • Gastrulación termina: • Masa y células vitelo se ha desarrollado • Mesodermo se organiza en SOMITES • Se distinguen embrión de saco vitelino Período de segmentación y de faringulación

  33. El período de faringulación, embrión presenta morfología con simetría bilateral, se ve alargado, la cola se distingue claramente y crece.

  34. Períododeeclosión El embrión comienza el movimiento fuerte y avanza en forma rectilínea, para alcanzar la eclosión.

  35. Desarrollo embrionario de Xenomelaniris brasiliensis. A) Quinta división celular, B) Mórula, C) Blástula, D) Gástrula, E) Néurula temprana.

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