651 likes | 1.87k Views
MEDŽIAGŲ PERNEŠIMAS PRO BIOLOGINES MEMBRANAS. Dr. doc. J. Kadziauskas ,VU. KAIP PRO TOKIĄ PRAEITI??. Pernaša pro membranas. Fosfolipidinis dvisluoksnis nelaidus hidrofilinėms medžiagoms Fosfolipidinis dvisluoksnis praleidžia hidrofobines medžiagas. Pernaša per biologines membranas.
E N D
MEDŽIAGŲ PERNEŠIMAS PRO BIOLOGINES MEMBRANAS Dr. doc. J. Kadziauskas,VU
Pernaša pro membranas • Fosfolipidinis dvisluoksnis nelaidus hidrofilinėms medžiagoms • Fosfolipidinis dvisluoksnis praleidžia hidrofobines medžiagas
Pernaša per biologines membranas • Pagal mechanizmą skirstoma: • paprasta difuzija • palengvinta difuzija • Pagal energetinius kriterijus skirstoma: • pasyvi pernaša • aktyvi pernaša
Pasyvi difuzija • Nereikalingi specialūs baltymai • Medžiagos ištirpsta fosfolipidiniame dvisluoksnyje ir pasiskirsto abiejose membranos pusėse
Palengvinta difuzija • Dalyvauja specialūs baltymai • Yra slopikliai, kurie lėtina pernešimą
Palengvintos difuzijos metu medžiagos yra pernešamos • 1. Pro kanalus
Palengvintos difuzijos metu medžiagos yra pernešamos • 2. Nešiklių pagalba
Medžiagos juda prieš jų koncentracijos gradientą Pernešimui panaudojama energija Pernešime dalyvauja specialūs baltymai Energijos panaudojimo ir pernašos sistemos yra susijusios Aktyvi pernaša
Pirminės aktyvios pernašos metu panaudojami šie energijos šaltiniai • 1. ATP • 2. Saulės šviesos energija • 3. Oksidacijos redukcijos reakcijos metu išsiskyrusi energija
Nešikliai Valinomicinas
Jonų kanalai GRAMICIDINAS A
Jonų kanalai • 1890m. Ostwald – elektriniai reiškiniai ant ląstelių membranų susiję su jonų pernešimų per membranas • 1925m. Michaelis pasiūlė siaurų jonų kanalų buvimą • ~1950m. Hodgkin ir Huxley tyrė jonų pernašą kalmaro gigantiškuose aksonuose, pasiūlė potencialo valdomų Na+ ir K + kanalų buvimą
Jonų kanalai • Nervinio impulso perdavime • Raumenų susitraukime • Ląstelių susiliejimo procesuose • Ląstelės osmotiškumo palaikyme
2003m. Nobelio premija chemijos srityje “jonų kanalų struktūros ir mechanizmų tyrimai” Roderic MacKinnon g. 1956m Berlingtone JAV • Hovardo Hughes Medicinos Institutas • Molekulinės Neurobiologijos ir Biofizikos laboratorija • Rokfelerio Universitetas, Niujorkas, JAV
Kalio jonų Vandens kanalas kanalas
Kalio jonų kanalai • 1998m. MacKinnon nustatė erdvinę KcsA K+ kanalo išskirto iš Streptomyces lividans struktūrą • Keturi subvienetai • Polipeptidinė grandinė 2 TM • Reguliuojamas pH
Selektyvumo filtras Hidrofobinis kanalas Neigiamai įkrautos aminorūgštys
Selektyvumo filtras
Selektyvumo filtras • Katalizuoja • Dehidrataciją • Pernešimą • Hidrataciją Laikas 10ns
Potencialo valdomi kanalai“gyvieji tranzistoriai” • Kanalas KvAP iš termofilinių bakterijų Aeropyrum pernix • Polipeptidinė grandinė 6TM segmentai • Įtampos sensorius S4 • Selektyvumo filtras • Kanalas sudarytas iš 4 subvienetų
Shaker šeimos K kanalas Kv1.2 • Žinduolių kanalo struktūra nustatyta 2005 • Skiriamoji geba 2,9 A • Smegenų K kanalas ekspresuotas mielėse
Kv1.2 kanalas /Shaker/ T1 Domenas Subvienetai NADP Nature,309,5August, 2005
Atidarytas Uždarytas
Vandens kanalai • Vandens kanalų buvimas postuluotas 19a. viduryje (Brucke, Ostwald, Pfeffer) • 1988m. P.Agre iš eritrocitų membranų ir inkstų kanalėlių išskyrė nežinomos funkcijos baltymą CHIP28 • Genetinė ir baltyminė analizė parodė, kad tai gali būti ieškomas vandens kanalas akvaporinas AQP • 1992m. Baltymą ekspresavo Xenopus oocituose • 1992m. Baltymą įjungė į liposomas, inhibavo Hg2+ • 2000-2001 nustatyta 3D struktūra
2003m. Nobelio premija chemijos srityje “vandens kanalų atradimą’’ Peter Agreg. 1949m Minesota JAV • Johns Hopkins Universitetas, • Medicinos mokykla • Baltimorė JAV2005.11.10
Vandens kanalai • Žmogaus organizme minimum 11 AQP • Augaluose apie 35 AQP • Funkcijos • Inkstuose vandens reabsorbcijai • Eritrocituose • Augalų šaknyse
Vandens poros struktūra Hg His Gly Nature,407, October 2000
Nature,407, October 2000 Ile60(II) Val176(V) Phe24(I) Leu149(IV) Asn76 Asn192
Nature,407, October 2000 Spiralė HE Asn Spiralė HB
Aktyvi pernaša • ATPazės • Pompos • Siurbliai
P tipo ATPazės • Na+/K + ATPazė • Ca2 + ATPazė • H +/K + ATPazė
P tipo ATPazės • Pernešimo metu fosforilinama Asp aminorūgštis • Fermentas turi du būvius E1 ir E2 • Būviai turi skirtingą giminingumą jonams • ATP hidrolizės energija naudojama fermento konfomacijai pakeisti • Baltymas joną paima vienoje membranos pusėje, o atiduoda kitoje
Projektas Inovatyvūs mokymo(si) metodai ir naujausios technologijos gamtos mokslų bakalaurų rengimui Projektą finansuoja Europos Socialinis Fondas Projekto vykdytojai Vytauto Didžiojo Universitetas Lietuvos Miškų Institutas