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Cours d'Hémato-cytologie DUT ABB. 2- Hémogramme. Auteur : Bruno Flamand, IUT de Dijon. CYTOLOGIE HEMATOLOGIQUE. L’HEMOGRAMME ou Numérations-Formule Sanguine (NFS) englobe: -les numérations des éléments figurés -le dosage de l’Hémoglobine -la mesure de l’Hématocrite
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Cours d'Hémato-cytologie DUT ABB 2- Hémogramme Auteur : Bruno Flamand, IUT de Dijon
CYTOLOGIE HEMATOLOGIQUE L’HEMOGRAMME ou Numérations-Formule Sanguine (NFS) englobe: -les numérations des éléments figurés -le dosage de l’Hémoglobine -la mesure de l’Hématocrite -les calculs des constantes érythrocytaires -l’établissement de la formule leucocytaire Prélèvement: sang veineux sur EDTA (ou si thrombopénie induite par EDTA, prélèvement sur citrate de Na), éventuellement sang capillaire
Numérations: GR (ou érythrocytes ou hématies) , GB (ou leucocytes) , Plaquettes (ou Thrombocytes) . • Valeurs et constantes: • -érythrocytaires: • -Taux Hémoglobine sanguin Hb • -Hématocrite Hte • -Volume Globulaire Moyen VGM • -Concentration Corpusculaire Moyenne en Hb CCMH • -Taux Corpusculaire Moyen en Hb TCMH • -Indice de Distribution des Rouges IDR • -plaquettaires: • -Thrombocrite THT • -Volume Plaquettaire Moyen VPM • Indice de Distribution Plaquettaire IDP
GR, Hb, Hte,VGM,TCMH,IDR: diagnostic des pathologies du GR, orientation du diagnostic des anémies • Plaquettes: diagnostic d’une anomalie de l’hémostase primaire • GB, FL: diagnostic des pathologies infectieuses, inflammatoires, hémopathies malignes (leucémies…) • L’Hémogramme est automatisé complètement ou partiellement dans les laboratoires
Anciennes unités Facteur x Unités internationales Globules rouges 106 par mm3 106 T/L (téra, 1012) Hémoglobine g/100 ml 0,621 mmol/L Hématocrite % ou dl/dl 0,01 L/L VGM µ3 F/L (femto,10-15) TCMH pg 0,062 fmol (femto,10-15) CCMH % ou g/100ml 0,062 mmol/L Globules blancs 103 par mm3 106 G/L (giga, 109) Plaquettes 103 par mm3 106 G/L (giga, 109)
Numération GR: Erythropénie < VN > Polyglobulie • Hématocrite: Hte% = (Vol. globulaire / Vol. sanguin total) x100 • Référence: paramètre mesuré en détermination manuelle par centrifugation en tube capillaire calibré • Hte= (h globulaire / h sang total) x 100 • Paramètre Calculé dans Automate: Hte = VGM x Num. GR • Hémodilution < VN > Hémoconcentration
Taux d’hémoglobine sanguin: Hb en g/dl • Dosage spectrophotométrique à 540 nm • Hb (Fe 2+) Hb (Fe 3+) Hb (Fe 3+) CN- • Echantillon sanguin total est lysé par Hexacyanofferrate III ([Fe(CN)6]3- , qui oxyde l’Hb en met-Hb • La metHb formée est complexée avec le cyanure de K+ (KCN) en Cyanmet-Hb, composé stable, dont l’absorbance est proportionnelle à la concentration. • Diminution de Hb: ANEMIE
Volume Globulaire Moyen: VGM en fl (10-15 L) • paramètre calculé (c’est une moyenne…), même sur automate, même si les automates mesurent le volume de chaque GR • VGM = (Hte % / GR 106/mm3) x 10 • Microcytose < Normocytose > Macrocytose • Taux Corpusculaire Moyen en Hb: TCMH en pg (10-12 g) • TCMH = (Hb g/dl / GR 106/mm3) x 10 • Hypochromie* < Normochromie
Concentration Corpusculaire Moyenne en Hb: CCMH en % (g/dl) • CCMH = (Hb g/dl / Ht %) x 100 • Hypochromie* < Normochromie • *La CCMH est considérée comme un indice moins sensible de l’hypochromie que la TCMH dans les anémies, en effet la TCMH diminue avant la CCMH dans l’installation d’un cas d’anémie • Indice de distribution des Rouges: IDR % • Coefficient (calculé par automate) de variation des volumes de la population de GR • IDR = (K x SD) / VGM • Augmentation de IDR : Anisocytose
Numération plaquettaire PLT: • Thrombopénie < VN > (Hyper)Thrombocytose • Thrombocrite: hématocrite plaquettaire • THT = VPM x Num. PLT • Volume Plaquettaire Moyen: VPM en fl • Augmentation du VPM: macrocytose plaquettaire • Indice de Distribution Plaquettaire: IDP % • Augmentation IDP: anisocytose plaquettaire
Numération GB: Leucopénie < VN > Hyperleucocytose • Formule leucocytaire: répartition des différentes sous-populations de leucocytes • -FL manuelle par lecture microscopique de frottis coloré au MGG (100 à 200 leucocytes répertoriés) • -FL automatisée (5000 à 10000 leucocytes répertoriés) • Les résultats sont rendus en valeur relative % et en valeur absolue par mm3mais l’interprétation n’est valable que sur les valeurs absolues • GN Neutropénie < VN > Polynucléose • GE (hyper)Eosinophilie > VN • GB Basocytose > VN • L Lymphopénie < VN > Hyperlymphocytose • M Monocytopénie < VN > Monocytose
*La CCMH est considérée comme un indice moins sensible de l’hypochromie que la TCMH dans les anémies, en effet la TCMH diminue avant la CCMH dans l’installation d’un cas d’anémie