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RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS VIABLES Trabajo práctico N° 7. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MAR DEL PLATA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS MICROBIOLOGIA GENERAL 2012. INTRODUCCIÓN. TÉCNICAS. TECNICAS. Variación de condiciones. Composición del medio Gases de la atmósfera
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RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS VIABLESTrabajo práctico N° 7 UNIVERSIDAD NACIONAL DE MAR DEL PLATA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS MICROBIOLOGIA GENERAL 2012
TECNICAS Variación de condiciones • Composición del medio • Gases de la atmósfera • Tiempo y Temperatura de incubación
Leche • Evaluación de la calidad sanitaria del producto • Durabilidad del producto • Límite establecido por el CAA: 500.000 UFC/mL
Leche • Cuando la leche deja la ubre, comienza a contaminarse: • bacterias del estiércol • bacterias de la ubre o piel • agua • suelo • forraje • instalaciones Streptococcus Coliformes Termófilas Psicrófilas
Entonces…… Si el recuento de bacterias al ordeñe es alto, posiblemente se encuentren microorganismos psicrófilos y otros que resistan la pasteurización…
Otros productos • Inoculantes comerciales • Otros alimentos INDICADORES Calidad comercial Calidad higiénico-sanitaria
Recuento directo en placa • Una célula o un grupo de células dará origen a una colonia luego de la siembra e incubación. • Por lo general se evalúan muestras pequeñas y representativas, por lo que se pueden producir errores (necesidad de repeticiones) • Presencia de viables no cultivables (pH, temperatura, tiempo, medio de cultivo)
Técnicas de recuento directo • Siembra en superficie La muestra se inocula en la superficie de la placa de Petri que contiene el medio de cultivo adecuado. Microorganismos aerobios estrictos, facultativos • Siembra en placa vertida La muestra se inocula en el fondo de la placa de Petri estéril y vacía y luego se vierte el medio de cultivo adecuado. Microorganismos aerobios facultativos y anaerobios aerotolerantes
Técnica de diluciones seriadasMuestra líquida 9 ml sol fisiológica 10 -3 10 -4 10-5 10 -6 1 ml muestra 99 ml solución fisiológica 1 ml 10 -2
Recuento • En el caso de leche y alimentos, las placas se incuban por un período de 24 a 48 h a 37°C • Se cuentan las UFC en la placa en que se observen entre 30 y 300. • El número de UFC se multiplica por la inversa de la dilución donde se realizó la lectura. Ej. 80 UFC x 104 ( de la dilución 10-4) • El resultado se expresa en UFC / mLde muestra
Técnica de diluciones seriadasMuestra sólida 9 ml sol fisiológica 10 -2 10 -3 10-4 10-7 10 -5 10 g muestra 90 ml solución fisiológica 0,1 ml 10 -1
Recuento • En el caso de suelos y microorganismos relacionados a él, las placas se incuban por un período de 24h a 5-7 días, a 28°C • Se cuentan las UFC en la placa en que se observen entre 30 y 300. • El número se multiplica por la inversa de la dilución donde se realizó la lectura y se corrige por el factor de dilución (alícuota de siembra) Ej. 80 UFC x 104 (de la dilución 10-4) x 10 (volumen sembrado en placa 0,1 mL) • El resultado se expresa en UFC / g de muestra