310 likes | 608 Views
MNS og Duffy blodtypesystemer. Abid Hussain Llohn abll@ahus.no. MNS blodtypesystem Historie. 1927: Landsteinar & Levine : anti-M & anti-N 1947: Walsh & Montgomery: anti-S 1951: Levine: anti-s MNS blodtypesystem 1953: Weiner: anti-U Består av 46 antigener nummerert MNS1-46
E N D
MNS og Duffy blodtypesystemer Abid Hussain Llohn abll@ahus.no
MNS blodtypesystemHistorie • 1927: Landsteinar & Levine : anti-M & anti-N • 1947: Walsh & Montgomery: anti-S • 1951: Levine: anti-s MNS blodtypesystem • 1953: Weiner: anti-U • Består av 46 antigener nummerert MNS1-46 • ISBT nummer: 002 1
MNS antigener • Antigenene uttrykkes av glykosylerte proteiner: glykoforiner (sialinsyrerike) Glykoforin A (GPA): CD235A Glykoforin B (GPB): CD235B 86% av erytrocytt-sialinsyre • GPA: 106 , GPB: 2 X 105 per erytrocytt • Blir spaltet av enzymer • Kun erytrocytter blant blodcellene har antigenene (MN antigener: også på endotelceller/epitelceller i nyrer) • Kan påvises tidlig i intrauterint liv; godt utviklet hos nyfødte • Viser doseeffekt 2
Glykoforiner M: Ser-Ser-Thr-Thr-Gly N: Leu-Ser-Thr-Thr-Glu S/s: Met/Thr 4
Glykoforin A molekyl GPA O-linked: O-glycan: 15 N-linked: N-glycan: 1 GPB O-glycan: 11 5
Effekt av enzymbehandling α-Chymotrypsin Trypsin Papain Sialidase: Endrer ladning og struktur av molekyler 6
MNS blodtypesystem • Veldig komplekst blodtypesystem • Antigenene kodet av to tett koblet homologe gener på kromosom 4 (4q28-q31) GYPA som koder for M og N antigener (GPA) GYPB som koder for S, s og U antigener (GPB) 7
Genomisk organisasjon 3´ GYPA 5´ A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 Ψ GYPB 5´ 3´ B1 B2 B3 B4 B5 B6 5´ UT, -19 til -8 -7 - 26 27-58 59-71 72-100 101-126 127-131, 3´ UT 5´ UT, -19 til -8 -7 - 26 27-39 40-71 72, 3´ UT Pseudoexon 8
MNS systemet, Mutasjoner • Punktmutasjoner ●M&N varianter: * Mg (MNS11) GPA1-5: Leu-Ser-Thr.Asn-Glu * Mc(MNS8) ●Punktmutasjoner mellom 6-72(44): * 17 antigener * Nya (MNS 18): GPA Asp27Glu 0,2% av norske, 1:30000 i mellom Europa • Delesjoner • Hybridisering 9
MNS systemet, delesjon GYPA GYPB A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 B1 B2 Ψ B4 B5 B6 E1 3´ 5´ En U MK 10
Hybridisering GYPA GYPB 5´ 3´ 5´ 3´ 5´ 3´ GYP (A-B) 5´ 3´ GYPA - GYP (B-A) - GYPB 11
Hybridisering 3´ GYPA 5´ A1 A3 A4 A5 A6 A7 A2 Ψ GYPB 5´ 3´ B1 B2 B3 B4 B5 B6 GYP(B-A-B) B3/A3 B4 B5 B1 B2 B6 12
Hybride gener • GYP(A-B) Hil(MNS20): GP(A1-58-B59-104) • GYP(B-A) Sta(MNS15): GP(B1-26-A27-99) • GYP(B-A-B) Mur(MNS10): GP(B1-48-A49-57-B58-103) • GYP(A-B-A) Hut(MNS19): GP(A1-27-B28-A29-131) M/N Hil s A3 A2 B4 B5 B6 N Sta B2 A4 A5 A6 A7 N Mur Hil s B2 B3 A3 B4 B5 B6 Hut A2 A4 A5 A6 A7 A3B3A3 ● Miltenberger serie 13
MNS blodtypesystemet Variant glykoforiner Fenotype Genotype Courtesy: Geoff Daniels. Human Blood Groups, second edition, 2002 14
MNS systemet: Antistoffer Anti-M • Naturlig forekommende av IgM klasse med reaksjonsoptimum ved 4oC • IgG anti-M også • Dose-effekt • Enzym behandling • pH og glukose-avhengighet 15
MNS systemet: Anti-M • Anti-M reaktive ved 37oC har klinisk betydning • Kan en Sjelden gang gi hemolytisk reaksjon • Også HDN Ødelegger erytroide celler • Auto-anti-M AIHA, CCHD 16
MNS system: Antistoffer Anti-N • Naturlig forekommende • Dose-effekt • Svært sjelden HTR eller HDN • Auto-anti-N AIHA 17
MNS system: Antistoffer Anti-S/anti-s • Forekommer hyppigere som immunindusert IgG klasse • Reagerer ved 37oC • Dose-effekt • Kan gi alvorlig HTR/HDN • Antigen negativt blod til pasienter med anti-S/s • AIHA 18
MNS systemet: Antistoffer Andre antistoffer • Svært sjeldne • Uventet uforlik resultat / HDN uten åpenbar årsak • Anti-U, anti Ena, anti-Vw, anti-Mg 19
Mulige Funksjoner • Sialinsyre: Negativ ladning, glycocalyx • Assosiasjon med band 3 protein (GPA) • Komplement regulator: GPA inhiberer dannelse/binding av C5b-7 • Reseptorer for patogener/toksiner: ● P. falciparum (GPA: O-glycan , GPB) ● Escherichia Coli: GPAM ● Influensa virus: GPA ● Hemolysin *E. coli: GPA * V. Cholerae: GPB 20
Duffy blodtypesystemHistorie • 1950: Cutbush et al: anti-Fya • 1951: Ikin: anti-Fyb • 1955: Sanger: Fy(a-b-) • Består av 6 antigener nummerert Fy1-6 • ISBT nummer: 008 21
Duffy blodtypesystem • Antigenene kodet av to kodominante alleler på kromosom 1 (1q21-q22) FYA FYB * FYBES (FY) * FYBWK (Fyx) 22
Duffy antigener • Antigene uttrykkes av glykoprotein (CD234) • Kan påvises tidlig i intrauterint liv (6. Uke), godt utviklet hos nyfødte • Distribusjon * Erytrocytter (ingen andre blodceller) * Epitelceller av nyre, lunge og thyreoide * Endotelceller * Nevroner (Purkinje celler) i cerebellum • Blir eluert fra erytrocytter under lagring • Blir spaltet av enzymer * Papain, ficin, bromelin, chymotrypsin, ZZAP * Trypsin og Sialidase har ingen effekt 23
Antistoffer: Anti FYa • Immunindusert IgG klasse • Påvises best med IAT • Kan aktivere komplement til C3 fase • HTR & HDN* • Autoantistoffer *Goodrick, M.J. Et al. Haemolytic disease of the fetus and newborn due to anti-Fya and the potential clinical value of duffy genotyping in pregnancies at risk. Transfusion Medicine, 1997;7:301-304. 26
Anti-Fyb • Immuninduserte antistoffer • Finnes ofte sammen med andre antistoffer • Finnes sjeldnere enn Fya • HTR og HDN • Autoantistoffer 27
Duffy antigener • Fy3 * Finnes på alle erytrocytter bortsett fra Fy (a-b-) * Blir ikke spaltet av enzymer * Anti-Fy3 kan forårsake HTR og HDN • FY5 * Ligner på Fy3 * Finnes ikke på Fy:3 Rhnull celler * Anti-Fy5 kan forårsake HTR • FY6 * Spesifisiteten ligner på Fy3 * Blir spaltet av enzymer • Fy4? * Assosiasjon med Fy(a-b-) 28
Mulige funksjoner • Duffy antigen receptor for chemokines (DARC) CXC og CC kjemokiner Fy(a-b-) binder ikke kjemokiner Fy(a-b+wk) kan binde kjemokiner • Fjerning av uønskete kjemokiner? • Transport av kjemokiner i endotelet* • Oppregulering av DARC ved nyresykdommer** • Malaria *Lee, Janet S. et al. Duffy antigen facilitates movement of chemokines across the endothelium in vitro and promotes neutrophil transmigration in vitro and in vivo. The journal of immunology, 2003, 170:5244-5251. **Liu X-H et al. Up-regulation of Duffy antigen receptor expression in children with renal disease. Kidney Int 1999;55:1491-500. 29
Duffy antigen og malaria • Plasmodium vivax • Fy(a-b-) er resistente (100% i Vest Afrika) • Fy6 er reseptor • P. vivax invaderer retikulocytter (50% mer FY6 på Retic.) 30