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MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol

MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol Universidad Nacional de San Luis Marzo 2014. PROCARIOTAS. Bacterias. Hongos y levaduras. www.profesorenlinea.cl. EUCARIOTAS. urbinavinos.blogspot.com. Cianobacterias. Protozoos.

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MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol

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  1. MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol Universidad Nacional de San Luis Marzo 2014

  2. PROCARIOTAS Bacterias Hongos y levaduras www.profesorenlinea.cl EUCARIOTAS urbinavinos.blogspot.com Cianobacterias Protozoos

  3. Clasificación de los microorganismos según la fuente de energía y carbono

  4. CONDICIONES QUÍMICAS • Elementos energéticos y constitutivos: • a) Macroelementos • Fuente de carbono • Fuente de nitrógeno • Fuente de fósforo • Fuente de azufre • Fuente de calcio, magnesio y potasio • Fuente de sodio • Fuente de Fe • b) Microelementos o trazas: Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni, • Au, Ag, Cd, Cr, Pb • c) Factores de crecimiento • 2. Agua • 3. Agentes solidificantes:agar, gelatina, agarosa, silicagel, albúmina

  5. Factores de crecimiento • A ---- B ---- C ----HistidinaNO es factor de crecimiento • A ---- B --X-- ….. ---- Histidina ?ES factor de crecimiento • Ejemplos: *vitaminas, como las del complejo B • *algunos aminoácidos • *purinas y pirimidinas

  6. Medios de cultivo • Por su origen: • Sintéticos o químicamente definidos: • *se conoce la fórmula exacta • Naturales o complejos: • *no se conoce su composición con exactitud

  7. -Naturales o complejos, las fórmulas de lab incluyen: 1. PEPTONAS Productos de la hidrólisis de proteínas: Peptona: mezcla de aa y péptidos. Proteína de origen vegetal o animal Hidrólisis ácida o enzimática Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS -Fuente de nitrógeno -Fuente de carbono y energía, cuando no hay azúcares en el medio de cultivo

  8. 2. EXTRACTOS • de carne: concentrado de componentes hidrosolubles de la carne. • de levadura: producto de lisis ácida o enzimática de levaduras • de malta:producto de cebada malteada, reemplaza al extracto de levadura • Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS • -aportan factores de crecimiento, especialmente vitaminas. Factores de crecimiento

  9. Agar nutritivo (para bacterias quimioorganotrofas) Peptona de carne ………….. 0.5 g Extracto de carne ………….. 0.3 g NaCl ………………………… 0.5 g Agar ……………………… 1.5 – 2 g Agua destilada ……………. 100 ml

  10. Medio de cultivo para fototrofos Sintético o químicamente definido (fórmula exacta) CO2 ………………… burbujeo continuo KNO3 ……………. 1 g/l MgSO4 …………… 0.5 g/l KH2PO4 …………… 0.035 g/l Trazas …………….. 10-4 - 10 -5 g/l (NaVO3, NiSO4, ZnCl2, H3BO3,….., etc) H2O ………………………… 1000 ml solidificante ?? SILICAGEL Exponer a la luz solar o artificial.

  11. Medio de cultivo sintético para quimioorganotrofos

  12. Para QUIMIOOGANOTROFOS Medio de cultivo AMedio de cultivo B (sintético o quimícamente (complejo o natural) definido) K2HPO4 ............ 7 g KH2PO4 ……… 2 g Extracto de carne ….. 3 g (NH4)2SO4…… 1 g Peptona ……………. 5 g MgSO4 ……… 0.1 g NaCl ………………… 5 g CaCl2 ……….. 0.02 g Agua dest. ……. 1000 ml Glucosa ……. 4-10 g Trazas: pH 7 Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo) …….... 2-10 µg c/u Agua destilada …….. 1000 ml pH 7

  13. CONDICIONES FÍSICAS • Temperatura • pH • Humedad • Luz • Requerimientos de O2

  14. Requerimientos de O2 • Aerobios estrictos • Anaerobios obligados • Anaerobios facultativos • Microaerófilos • Anaerobios aerotolerantes

  15. CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO -por origen: - sintético o químicamente definido fórmula química exactamente conocida - natural o complejo composición química no se conoce con exactitud -por consistencia: - líquido (sin agar) -sólido (con agar: al 0.3% semisólido al 1.5 – 2% sólido)

  16. -por su composición: - comunes: AGAR NUTRITIVO -peptona de carne -extracto de carne -NaCl -agar 2% -agua destilada - enriquecidos: AGAR SANGRE

  17. Por su función: -de transporte: - medio de Stuart - medio de Cary Blair Contiene buffer + sustancias criopreservantes (glicerol)

  18. Por su función: - de enriquecimiento (líq.) - selectivos (sólidos) Caldo Mac Conkey (inhibidor + lactosa + púrpura de bromocresol Agar Mac Conkey (inhibidor + lactosa + rojo neutro)

  19. Por su función: -diferencial Fermentación de. -glucosa ? -sacarosa ? -lactosa ? Producción de H2S ? El medio incluye los 3 azúcares, sal de Fe2+ y un indicador de pH (rojo neutro) Enterobacter Shigella Pseudomonas Proteus Agar triple azúcar hierro (TSI)

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