180 likes | 366 Views
J. Kalenská, M. Tomšová, S. Štipl FÚP, FN Hradec Králové. Cytologie v tenké vrstvě. Cytodiagnostika. Diagnostická metoda pro téměř každý lékařský obor – k odlišení maligních změn od benigních a hodnocení účinku léčby Morfologická vyšetřovací metoda
E N D
J. Kalenská, M. Tomšová, S. Štipl FÚP, FN Hradec Králové Cytologie v tenké vrstvě
Cytodiagnostika Diagnostická metoda pro téměř každý lékařský obor – k odlišení maligních změn od benigních a hodnocení účinku léčby Morfologická vyšetřovací metoda Vychází z poznatků histologie a patologie (rozdíl: vyšetřuje jednotlivé buňky natřené na sklíčku – dochází ke ztrátě kontinuity tkáně) Vztah ke klin. oborům - gynekologie, pneumologie, urologie, mammologie
Historie 19. století – urologie- Lambl 40. léta 20. st. – gynekologie – G. Papanicolau (metodika barvení nátěrů) Po II. svět. válce – rozvoj gynekol. cytologie u nás – J. Trampl, O. Nyklíček, F. Luksch, J. Herold, Z. Lojda a další Nedůvěra odborné veřejnosti k diagnostice malignit z cytologických nátěrů - ještě v roce 1947 (patologové i gynekologové)
Gynekologická cytologie Po II. sv. válce se využívá poševní cytologie jako neorganizované screeningové metody (tj. vyšetření žen bez příznaků) Vhodnost jednoduché a rychlé metody pro hromadná vyšetření žen Usnadnění volby pro histologickou verifikaci Význam v dětské endokrinologii – metoda posouzení hormonálních poruch Největší význam: dg. prekanceróz a ca děložního hrdla
Cervikální karcinom Jedna z nejčastějších malignit u nás 2x vyšší incidence u nás oproti západní Evropě a USA Cytodiagnostika v gynekologii vedla k dramatickému snížení malignity v této oblasti
Standardní způsob provedení nátěrů Podmínky správné diagnostiky: 1)gynekologem kvalitně provedený nátěr (z odpovídajícího místa, v dostatečném množství, správně provedený nátěr na sklíčko) – až 50 % falešně negativních cytologií díky nesprávnému odběru 2) kvalitní vyhodnocení nátěru screenérkou – až 30% falešně pozitivních výsledků (pacientku neohrožují –mohou však vést ke zbytečným operačním výkonům a psychickému stresu vyšetřované ženy)
Kritické momenty Nekvalitní nátěr (příměs hlenu, krve nebo špatné nanesení stěru na sklíčko) – vede až k nediagnostickému závěru Nemožnost použít specifické markery pro dysplastické buňky
Výhody cytologie v tenké vrstvě Vyšší senzitivita oproti běžným stěrům (není kontaminace hlenem, krví a zánětlivými elementy, nejsou přítomny netrasparentní silné a nehodnotitelné partie) Redukce problémů s nízkou kvalitou odběru a fixace (zaschnutí preparátů vede k eozinofilii a ke vzniku artefaktů, zejména jaderných) Možnost využít stejný vzorek k dalším vyšetřením
Další testace Imunocytochemická vyšetření – p 16: vysoce senzitivní a specifický marker pro dysplastické dlaždicové i žlazové bb, nepřímá imunocytochemická metoda za použití primární protilátky Molekulárně patologická vyšetření (in situ hybridizační metody – CISH – chromogen in situ hybridizace) – využití genových sond značených chromogenem, velmi senzitivní metoda, identifikuje 1-2 kopie HPV DNA v jádře infikované bb
Nevýhody cytologie v tenké vrstvě Finanční nákladnost (1 kit cca 50Kč + přístrojové vybavení: homogenizační zařízení, měřící jednotka, speciální centrifuga = cca 150 000,-Kč) Technicky a časově náročnější zpracování v laboratoři (+ zaučení personálu) Při malém množství odebraných nádorových bb se nemusejí dostat na sklo – nutnost opakování centrifugace
Cytologie v tenké vrstvě na FÚP Cílem bylo zejména využití k dalším vyšetřením Průkaz onkoprotein p-16 Detekce DNA high risk HPV pomocí chromogen in situ hybridizace (CISH) V případech opakovaných hraničních nálezů (ASC-US a ASC-H - u pacientek nad 35 let – další terapeutické rozhodování) nebo při sledování pacientek ( min. 1 rok) po výkonu pro dysplazii (dochází k perzistenci HPV infekce?)
Naše zkušenosti Nepovažujeme za nutné tuto metodu používat při rutinním screeningu (finanční nákladnost) Za významné pokládáme možnost použití imunohistochemie nebo molekulárních metod v indikovaných případech FÚP jediná laboratoř v ČR využívající standardně tuto metodu pro všechny pacientky vyšetřené v poradně pro cervikální patologii a expertní kolposkopii Porodnicko-gynekologické kliniky FN HK