1 / 29

Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo

Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo. Anita Herawati Permana 105 06 033 Dr. Fida Madayanti Waganegara. Agenda Presentasi. PENDAHULUAN STRATEGI PENELITIAN HASIL KESIMPULAN. Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan. PENDAHULUAN. Latar Belakang (1 dari 3).

lonna
Download Presentation

Lipase Termostabil dari Bakteri Termofilik Isolat Gedong Songo

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Lipase Termostabil dariBakteri Termofilik Isolat Gedong Songo Anita Herawati Permana 105 06 033 Dr. Fida Madayanti Waganegara Seminar Tugas Akhir

  2. Agenda Presentasi • PENDAHULUAN • STRATEGI PENELITIAN • HASIL • KESIMPULAN Seminar Tugas Akhir

  3. Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan PENDAHULUAN Seminar Tugas Akhir

  4. Latar Belakang (1 dari 3) • Aplikatif di Industri Seminar Tugas Akhir

  5. Latar Belakang (2 dari 3) PERMASALAHAN: Prosesindustriumumnya memerlukansuhutinggi!!! ENZIM TERMOSTABIL Seminar Tugas Akhir

  6. Latar Belakang (3 dari 3) Mampumempertahankanstruktur 3D disuhutinggi ENZIM TERMOSTABIL RING OF FIRE!!! MIKROORGANISME TERMOFILIK YTae-13 (Aminin, 2008) Seminar Tugas Akhir

  7. Ruang Lingkup (1 dari 2) • YTae-13 (Rizqi, 2009) YTae-1 YTae-13 Seminar Tugas Akhir

  8. Ruang Lingkup (2 dari 2) (Rizqi, 2009) Seminar Tugas Akhir

  9. Tujuan mengisolasi enzim lipase yang diekspresikan oleh YTae-13, dan mengarakterisasinya Seminar Tugas Akhir

  10. STRATEGI PENELITIAN Seminar Tugas Akhir

  11. Strategi Penelitian (1 dari 3) Isolat YTae-13 # Pembuatan Kurva Pertumbuhan # Pembuatan Kurva Produksi Enzim Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi Enzim # Penumbuhan Starter # Produksi Enzim # Isolasi Enzim (Panen) Ekstrak Kasar Enzim (EKE) Seminar Tugas Akhir

  12. Strategi Penelitian (2 dari 3) Ekstrak Kasar Enzim (EKE) # Fraksinasi Ammonium Sulfat # Dialisis EKE, Enzim Fraksi 0-20% jenuh, Enzim Fraksi 20-40% jenuh, Enzim Fraksi 40-60% jenuh, Enzim Fraksi 60-80% jenuh, Enzim Fraksi 80-100% jenuh # Uji Aktivitas Spesifik Fraksi Aktif Seminar Tugas Akhir

  13. Strategi Penelitian (3 dari 3) Fraksi Aktif # Elektroforesis Native-PAGE # Perlakuankejutpanas FraksiLebihMurni # Zimografi # Karakterisasi KarakterEnzim Seminar Tugas Akhir

  14. Mikroorganisme Mikroorganisme: Prokariot Eukariot Arkea Mesophilic (20-37oC) Pshycophilic (1-5oC) Hyperthermophilic (>> 120oC) Thermophilic (40 – 100oC) Seminar Tugas Akhir

  15. YTae-13 Seminar Tugas Akhir

  16. Fraksinasi dan Dialisis Seminar Tugas Akhir

  17. Aktivitas Spesifik • Aktivitas enzim per kadar protein Penentuan Aktivitas Enzim + Bradford (1 : 3) Penentuan Kadar Protein 595 nm + LIPASE, 15’, 65oC, pH 8 405 nm Seminar Tugas Akhir

  18. Native-PAGE dan Zimografi Elektroforesis Gel Poliakrilamid Ukuran besar, muatan positif tinggi Ukuran besar, muatan positif rendah Ukuran kecil, muatan positif tinggi Ukuran kecil, muatan positif rendah Seminar Tugas Akhir

  19. HASIL Seminar Tugas Akhir

  20. YTae-13 70oC 55oC Seminar Tugas Akhir

  21. Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi Enzim (Suhu 70oC) Seminar Tugas Akhir

  22. Kurva Pertumbuhan dan Kurva Produksi (Suhu 55oC) Seminar Tugas Akhir

  23. Isolasi Enzim Inkubasi 55oC, pH 6,5, 150 rpm (starter) YTae-13 OD 0,5-0,8 (sekitar 13 jam) Inokulasike media produksi, Inokulum 10% V/V, Inkubasi 17 jam Sentrifugasi Supernatan: Ekstrak Kasar Enzim (EKE) Seminar Tugas Akhir

  24. Aktivitas Spesifik Lipase Hasil Fraksinasi 0,753 0,277 0,206 Seminar Tugas Akhir

  25. Native-PAGE 40 - 60 80 - 100 60 - 80 0 - 20 20- 40 M Seminar Tugas Akhir

  26. Aktivitas Spesifik setelah Perlakuan Kejut-Panas Seminar Tugas Akhir

  27. YTae-13 dapat mengekspersikan lipase lebih dari satu kali selama fasa hidupnya. Setelah dilakukan fraksinasi dan dialisis terhadap enzim lipase puncak ketiga, aktivitas spesifik tertinggi ditunjukkan oleh fraksi ammonium sulfat 0-20% jenuh. Perlakuan kejut-panas membuat kemurnian enzim meningkat dengan tersingkirkannya enzim-enzim non-termostabil. KESIMPULAN Seminar Tugas Akhir

  28. REFERENSI • Lee, Dong-Woo, et. al.. 1999. Isolation and Characterization of a Thermophilic Lipase from Bacillus thermoleovorans ID-1. FEMS Microbiology Letters 179, 393-400. Seminar Tugas Akhir

  29. TERIMA KASIH Seminar Tugas Akhir

More Related