1 / 5

MLPA MULTIPLEX LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION

MLPA MULTIPLEX LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION. Kolektiv Laboratoře molekulární biologie Onkologické centrum J. G. Mendela Nový Jičín. komplementární sekvence k univerzálnímu primeru Y. Stuffer sekvence. komplementární sekvence k univerzálnímu primeru X.

matsu
Download Presentation

MLPA MULTIPLEX LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. MLPAMULTIPLEX LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION Kolektiv Laboratoře molekulární biologie Onkologické centrum J. G. Mendela Nový Jičín

  2. komplementární sekvence k univerzálnímu primeru Y Stuffer sekvence komplementární sekvence k univerzálnímu primeru X specifická hybridizačnísekvence SCHÉMA KONSTRUKCE PÁRŮ SOND

  3. ds DNA DENATURACE (98°C) ss DNA ss DNA HYBRIDIZACE (98°C) Ligáza-65 LIGACE (54°C) inaktivace ligázy při 98°C PCR F R použití univerzálních primerů fragmentová analýza SEPARACE SCHÉMA PRINCIPU MLPA

  4. A B C 1 2 4 3 DETEKCE DELECÍ A) NORMÁLNÍ HOMOZYGOT B) DELETOVANÝ HOMOZYGOT 1 2 3 4 1 3 4 1 2 3 4 1 3 4 2 2 C) HETEROZYGOT 1 2 4 3 1 3 4 2

  5. “Stuffer”sequence EcoRV XbaI SphI PCR primer sequence BsmI (vector: blue plaques) “Stuffer”sequence EcoRV XbaI SphI BsmI Hybridizing sequence (clone: white plaques) EcoRV BsmI “Stuffer”sequence PCR primer sequence Hybridizing sequence

More Related