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Actualizaciones en el análisis de los LÍQUIDOS BIOLÓGICOS

SESIÓN CLÍNICA LABORATORIO URGENCIAS. DEPARTAMENT 15 Hospital Verge dels Lliris ALCOY. AGÈNCIA VALENCIANA DE SALUT. Jueves, 27 de Noviembre de 2008. Actualizaciones en el análisis de los LÍQUIDOS BIOLÓGICOS.

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  1. SESIÓN CLÍNICA LABORATORIO URGENCIAS DEPARTAMENT 15 Hospital Verge dels Lliris ALCOY AGÈNCIAVALENCIANADE SALUT Jueves, 27 de Noviembre de 2008 Actualizaciones en el análisis de los LÍQUIDOS BIOLÓGICOS Dr. Enrique Ricart Álvarez Servicio Análisis Clínicos

  2. ÍNDICE • Conceptos básicos. • Volante de solicitud. • Recogida de la muestra. • Magnitudes biológicas. • Valores de Referencia, de Alarma y Críticos. • Referencias bibliográficas.

  3. CONCEPTO DE LÍQUIDO BIOLÓGICO • Son ultra filtrados del plasma que se producen a través de una membrana. • Son líquidos corporales diferentes de la sangre, plasma, suero, orina y semen.

  4. TIPOS DE LÍQUIDOS BIOLÓGICOS • LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO. • LÍQUIDOS SEROSOS: LA, LPL, LPC. • LÍQUIDO SINOVIAL.

  5. CONCEPTO DE LÍQUIDO BIOLÓGICO LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO • Es un líquido de aspecto claro, transparente que baña el encéfalo y la médula espinal, circulando por los ventrículos cerebrales y el canal medular. • Se forma en los plexos coroideos de los ventrículos laterales por ultrafiltración desde la sangre a través de la barrera hematoencefálica y por secreción activa. • Su función principal es actuar como colchón protector para el SNC; además, recoge los desechos y permite la circulación de nutrientes del mismo.

  6. CONCEPTO DE LÍQUIDO BIOLÓGICO LÍQUIDOS SEROSOS: Ascítico, Pleural, Pericárdico • Son líquidos corporales que derivan del ultra filtrado del plasma a través de la red capilar de las membranas serosas que delimitan diversas cavidades corporales. • Su formación es similar a la del líquido extravascular en cualquier otra parte del organismo, y en ella intervienen la presión hidrostática, la presión coloidosmótica y la permeabilidad capilar. • En condiciones fisiológicas, hay pequeña cantidad de líquido en cada una de estas cavidades corporales que permite el movimiento de las vísceras en cada uno de estos espacios potenciales.

  7. LÍQUIDO SINOVIAL CONCEPTO DE LÍQUIDO BIOLÓGICO • Se produce por diálisis del plasma a través de la membrana sinovial al que se le añade el ácido hialurónico secretado por las células B de dicha membrana.El ácido hialurónico le confiere su viscosidad característica, que le diferencia de otros líquidos biológicos. • En condiciones fisiológicas, todas las articulaciones diartroidales contienen sólo una pequeña cantidad de líquido en su interior. • Los trastornos de la membrana sinovial, la alteración en los elementos de sostén articular y la presencia de cuerpos extraños pueden producir acumulación de grandes cantidades de líquido sinovial en las articulaciones.

  8. ESTUDIO DE LOS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS • MAGNITUDES BIOLÓGICAS • VALORES DE REFERENCIA (VR) • DE ALARMA (VA) y • CRÍTICOS (VC).

  9. VOLANTE de SOLICITUD

  10. VOLANTE de SOLICITUD

  11. RECOGIDA DE LÍQUIDOS BIOLÓGICOS

  12. URGENCIAS CLÍNICAS VERSUS URGENCIAS TÉCNICAS RELACIÓN COSTE-EFICACIA ÓPTIMA • MAGNITUDES URGENTES: ASP, HE, LE, GLU, PT o ALB, pH • OTRAS MAGNITUDES: PUEDE DIFERIRSE EN FUNCIÓN DE LA ORGANIZACIÓN DEL LABORATORIO ANÁLISIS INICIAL ANÁLISIS DIFERIDO ASP, HE, LE, GLU, PT EN FUNCIÓN DE LOS RESULTADOS Y ORIENTACIÓN DIAGNÓSTICA Ejemplo: LACTATO LCR TRASUDADO (BIOQUÍMICO) NO HACE FALTA MÁS LPL EN FUNCIÓN DE LOS RESULTADOS Y ORIENTACIÓN DIAGNÓSTICA Ejemplo: CEA, ADA EXUDADO (BIOQUÍMICO) REALIZAR: ASP, HE, LE, GLU, AMI, pH 1º. ASP, HE, LE, ALB 2º. PT, GLU, LDH, AMI LA EN FUNCIÓN DE LOS RESULTADOS Y ORIENTACIÓN DIAGNÓSTICA Ejemplo: TG, COL, BT, CEA ASP, HE, LE GLU, CRISTALES EN FUNCIÓN DE LOS RESULTADOS Y ORIENTACIÓN DIAGNÓSTICA Ejemplo: PT, CH50 LS Rodríguez-Segade S. Líquido cefalorraquídeo. SEQC, Ed Cont Lab Clin 2006; 9: 49-56. Noguera A, Galán A, Guillén E, et al. Recomendaciones para el estudio de líquidos biológicos serosos en el laboratorio de urgencias. Quim Clin 2004; 23(3): 141-145. Padrós G, Galán A, Guillén E, et al. Recomendaciones para el estudio del líquido sinovial. Quim Clin 2004; 23(6): 434-438. Jiménez L, Montero F.J. Medicina de urgencias: guía diagnóstica y protocolos de actuación. Madrid, Harcourt S.A, 2ª ed, 2001.

  13. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR) ASPECTO MACROSCÓPICOALBÚMINA RECUENTO HEMATÍESCOCIENTE DE ALBÚMINA RECUENTO LEUCOCITOSINMUNOGLOBULINA G TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIAINDICE IgG (Índice de Link) GLUCOSAANTICUERPOS VIH PROTEÍNAS TOTALESVDRL LDH CLORO ADA pH LACTATO PCR DÍMERO D Beta 2 MICROGLOBULINA

  14. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO ASCÍTICO (LA) ASPECTO MACROSCÓPICO DÍMERO D RECUENTO HEMATÍES HEMATOCRITO RECUENTO LEUCOCITOS COLESTEROL TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIA TRIGLICÉRIDOS GLUCOSA BILIRRUBINA TOTAL PROTEÍNAS TOTALES ALFAFETOPROTEÍNA ALBÚMINACEA LDH CA 19.9 AMILASACA 125 ADA CA 15.3 LACTATO PCR pH

  15. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO PLEURAL (LPL) ASPECTO MACROSCÓPICO DÍMERO D RECUENTO HEMATÍES HEMATOCRITO RECUENTO LEUCOCITOS COLESTEROL TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIA TRIGLICÉRIDOS GLUCOSA BILIRRUBINA TOTAL PROTEÍNAS TOTALES ALFAFETOPROTEÍNA pH CEA LDH CA 19.9 ADA CA 125 AMILASA CA 15.3 LACTATO PCR COLINESTERASAFR ALBÚMINA ANA

  16. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO PERICÁRDICO (LPC) ASPECTO MACROSCÓPICO DÍMERO D RECUENTO HEMATÍES HEMATOCRITO RECUENTO LEUCOCITOS COLESTEROL TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIA TRIGLICÉRIDOS GLUCOSA BILIRRUBINA TOTAL PROTEÍNAS TOTALES ALFAFETOPROTEÍNA pH CEA LDH CA 19.9 ADA CA 125 AMILASA CA 15.3 LACTATO PCR COLINESTERASAFR ALBÚMINA ANA

  17. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO SINOVIAL (LS) ASPECTO MACROSCÓPICO DÍMERO D RECUENTO HEMATÍES HEMATOCRITO RECUENTO LEUCOCITOS COLESTEROL TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIA TRIGLICÉRIDOS GLUCOSA BILIRRUBINA TOTAL PROTEÍNAS TOTALES BETA 2 MICROGLOBULINA LDH FIBRINÓGENO MICROCRISTALES COMPLEMENTO ADAFR ÁCIDO ÚRICO ANA LACTATO pH ALBÚMINA

  18. MAGNITUDES BIOLÓGICAS LÍQUIDO DE ORIGEN DESCONOCIDO (LV) ASPECTO MACROSCÓPICO DÍMERO D RECUENTO HEMATÍES HEMATOCRITO RECUENTO LEUCOCITOS COLESTEROL TOTAL FÓRMULA LEUCOCITARIA TRIGLICÉRIDOS GLUCOSABILIRRUBINA TOTAL PROTEÍNAS TOTALES PREALBÚMINA LDH ALBÚMINA UREAAMILASA CREATININA pH ÁCIDO ÚRICO ANA LACTATO CLORO ADA MARCADORES TUMORALES

  19. MAGNITUDES BIOLÓGICAS OTROS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS GLUCOSA DIALIZADO PERITONEAL PROTEÍNAS TOTALES DIALIZADO PERITONEAL UREA DIALIZADO PERITONEAL CREATININA DIALIZADO PERITONEAL SODIO SUDOR POTASIO SUDOR CLORO SUDOR AFPAMNIÓTICO Β-hCGAMNIÓTICO SANGRE ASPIRADO GASTRICO ESTUDIO INFERTILIDAD SEMINAL

  20. ESTUDIO DE LOS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS • MAGNITUDES BIOLÓGICAS • VALORES DE REFERENCIA (VR) • DE ALARMA (VA) y • CRÍTICOS (VC).

  21. MAGNITUDES BIOLÓGICAS • RECUENTO DE CÉLULAS: • SE REALIZA EN CÁMARA HEMATOCITOMÉTRICA (NEUBAUER o FUCHS-ROSENTHAL). • SE PUEDE REALIZAR EN CONTADORES AUTOMÁTICOS HEMATOLÓGICOS, TIPO SYSMEX XE-2100L SI SE SUPERA EL LÍMITE DE DETECCIÓN DEL AUTOANALIZADOR (100 LEUCOCITOS/µL y 20000 HEMATIES/µL). SE DEBE TENER EN CUENTA REALIZAR UN BLANCO (BACKGROUND CHECK) PREVIO A LA MEDICIÓN DE LA MUESTRA. NO SE RECOMIENDA EL CONTAJE DEL LÍQUIDO SINOVIAL POR SU VISCOSIDAD. • ESTABILIDAD DE LA MUESTRA: LCR DEBE REALIZARSE ANTES DE 1 HORA (A LAS 2 HORAS A TEMPERATURA AMBIENTE SE HAN LISADO EL 40% DE LAS CÉLULAS). LÍQUIDO ASCÍTICO SU RECUENTO PUEDE DEMORARSE HASTA 24 HORAS SI SE CONSERVA A 4-8º C (LA DISMINUCIÓN DE CÉLULAS ESTÁ DENTRO DEL COEFICIENTE DE VARIACIÓN DE LA TÉCNICA). LÍQUIDO SINOVIAL EL RECUENTO PUEDE DEMORARSE 24h A 4º C, LOS CRISTALES MEJOR ANTES DE 4h. • BIOQUÍMICA: • AUTOANALIZADOR • COMENTARIO CODIFICADO EN EL INFORME DE UN LÍQUIDO BIOLÓGICO: • LOS INTERVALOS DE REFERENCIA NO ESTÁN ESTANDARIZADOS. • PARA EL CÁLCULO DE GRADIENTES Y/O COCIENTES SE PRECISA LA EXTRACCIÓN SIMULTÁNEA DE SANGRE.

  22. MAGNITUDES BIOLÓGICAS

  23. ABREVIATURAS Y SIGLAS A ADULTOS AV ADULTOS VARONES AM ADULTOS MUJERES AFP ALFAFETOPROTEÍNA AR SANGRE ARTERIAL (DE GASOMETRÍA) CA 125 ANTÍGENO CARBOHIDRATO (TUMORAL) 125 CA 15.3 ANTÍGENO CARBOHIDRATO (TUMORAL) 15.3 CA 19.9 ANTÍGENO CARBOHIDRATO (TUMORAL) 19.9 CEA ANTÍGENO CARCINOEMBRIONARIO EOSLEUCOCITOS EOSINÓFILOS LMNLEUCOCITOS LINFOMONONUCLEARES N NIÑOS (<12 AÑOS) NEUVIRUS NEUROTROPOS OLIGO BANDAS OLIGOCLONALES PBE PERITONITIS BACTERIANA ESPONTÁNEA PMN LEUCOCITOS POLINUCLEARES PREM NIÑOS PREMATUROS RN NIÑOS RECIÉN NACIDOS (<1 MES) S SUERO VA VALORES DE ALARMA VC VALORES CRÍTICOS VRVALORES DE REFERENCIA

  24. LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR)

  25. LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (LCR)

  26. NOTAS AL LCR: • ASP TURBIO: si LE >200, HE >400, PT > 150 ó >100000 UFC/mL. • ASP XANTOCRÓMICO: si HSA, PT >150 ó BT suero >10. • LCR HEMÁTICO: CÁLCULO DE LASPTREALES:Restar 1 mg/dL por cada 1000 hematíes. • LCR HEMÁTICO: CÁLCULO DE LOSLEUCOCITOS REALES: Restar 1 Leucocito por cada 700-1000 hematíes. • INDICE AA (COCIENTE ALB LCR/SUERO): <40a: <4.0, aumenta 1 unidad cada década, >80a: <9.0. • OTROS PARÁMETROS DEL PERFIL EM: OLIGO, NEU, MT (PCR micobacterias), Ac (HS, HU, RI, YO). • MENINGITIS BACTERIANA: Líquido turbio, >10 LE, >50% PMN, PT >100 mg/dL, GLU <50 mg/dL o GLULCR/GLUs <0.3. • MENINGITIS VÍRICA: Líquido claro, >10 LE, >50% LMN, PT <100 mg/dL, GLULCR/GLUs >0.5. • MENINGITIS TBC, ó LISTERIA, ó PARCIALMENTE TRATADA: Líquido claro, >10 LE, >50% LMN, PT >100 mg/dL, GLULCR/GLUs <0.5. • OTROS PARAMETROS: ANTÍGENOS CAPSULARES, HERPES, CRIPTOCOCO (Tinta China), PROTEÍNA 14.3.3 (P1433; Enf. Creutzfeldt-Jakob), Ac GM1 (gangliosido monosialico glicolipídico).

  27. LÍQUIDO ASCÍTICO (LA)

  28. LÍQUIDO ASCÍTICO (LA)

  29. NOTAS AL LÍQUIDO ASCÍTICO (LA): • ASP TURBIO: si LE >50000 ó TRI >110 (OPALESCENTE). • ASP LECHOSO: si TRI >200. • ASP VERDE: si BT >6 Perforación biliar o intestinal. • ASP HEMÁTICO: si HE > 20000. • HTO: >0.5 Hemático. • LE CORREGIDOS: restar 1 PMN y 1 LMN por cada 250 HE. • GLU: <50 Perforación intestinal. • LDH: Cociente LA/Suero 0.4 Cirrosis. Si 0.85 PBE (Peritonitis Bacteriana Espontánea). • PT: >2.5 Exudado. Cociente LA/Suero >0.5 Exudado. Si cociente >1.0 Perforación intestinal. • pH: <7.25 PBE. Gradiente AR/LA >0.10 PBE. • ALB: Gradiente Suero/LA >1.1 Hipertensión Portal. (ALB es el 60-75% de las PT del líquido). • AMI: Cociente LA/Suero <1 Cirrosis. Si 5.0 Pancreatitis. • LAC: >35 PBE. • FAL (FOSFATASA ALCALINA): >>>> Neoplasia ovario. • MARCADORES TUMORALES: Cociente LA/Suero >1.2 Neoplasia. • CHE: <600 U/L Cirrosis con ascitis estéril. >600 Ascitis no cirrótica (neo).

  30. LÍQUIDO PLEURAL (LPL)

  31. LÍQUIDO PLEURAL (LPL)

  32. NOTAS AL LÍQUIDO PLEURAL (LPL): • ASP TURBIO: si LE >50000 ó TRI >110. • ASP LECHOSO: si TRI >200. • ASP VERDE: si BT >6 Perforación biliar o intestinal. • ASP HEMÁTICO: >100000 Hematíes. Realizar HTO, si es superior al 50% del HTO en sangre, sospecha de Hemotórax.Si HTO >1% en LPL: neo, trauma, TEP. • EXUDADO (CRITERIO CLÁSICO): PT >3.0. • CRITERIOS DE LIGHT: EXUDADO: PT LPL/S >0.5; LDH LPL/S >0.6 y LDH >2/3 del límite superior normal en suero. En caso de TRASUDADOS que se comportan como Exudados (Ej.: ICC tratada con diuréticos) los criterios de EXUDADO se pueden ampliar a: ALB S-LPL <1.2 g/dL; BT LPL/S >0.6; COL LPL >60 o COL LPL/S >0.3. • ALB: Es el 60-75% de las PT del líquido. • CHE: >>> 200 TBC. • ÁCIDO HIALURÓNICO: VR: 0.0 – 0.8 g/dL. Está >>>> en Mesotelioma. • TRI: >110 Quiloso (y COL normal o bajo). <50 excluye Quiloso. TRI alto o normal y COL >200 Pseudoquilotorax. • MARCADORES TUMORALES: Cociente LPL/Suero >1.2 Neoplasia. • COMPLEMENTO: Petición opcional. En suero: - C3: 88-201 mg/dL - C4: 16-47 mg/dL - CH50: 80-160 unidades C.A.E • FR: Petición opcional. En suero: 0-14 U/mL. • ANA: Petición opcional. En suero: NEGATIVO.

  33. LÍQUIDO SINOVIAL (LS)

  34. LÍQUIDO SINOVIAL (LS)

  35. NOTAS AL LÍQUIDO SINOVIAL (LS): • ASP TURBIO: si LE >20000. • ASP HEMÁTICO: si HE >10000 Hemartros. • HTO: <3% Punción Traumática. • LE: <2000 No inflamatorio; <50000 Inflamatorio; >50000 Séptico. • PT: <3.0 No inflamatorio; >3.0 Inflamatorio. • ALB: Es el 60-75% de las PT del líquido. • GLU: <50 Artritis Séptica • ÁCIDO HIALURÓNICO: VR: 0.0 – 0.4 g/dL. • PARÁMETROS HABITUALES: ASP, LE, HE, FO, GLU, PT, β2M y COMPLEMENTO.

  36. LÍQUIDO DESCONOCIDO (LV)

  37. LÍQUIDO DESCONOCIDO (LV)

  38. LÍQUIDO DESCONOCIDO (LV)

  39. NOTAS AL LÍQUIDO DESCONOCIDO (LV): • NO ESTÁN CODIFICADAS EN EL OMEGA LAS PT (UCSF) NI LA ALB (MAU). Tampoco la TRANSFERRINA DEFICIENTE EN CARBOHIDRATOS. • IDENTIFICACIÓN DEL ORIGEN DEL LÍQUIDO COMO LCR (RINORREA-Fístula nasal/OTORREA–Fístula ótica): • PREALBÚMINA (LCR = 17.3 mg/dL (15-20); Rinorrea = indetectable)). • TRANSFERRINA DEFICIENTE CARBOHIDRATOS (β2-TRANSFERRINA o DESIALIZADA): Específica del LCR. Electroforesis de proteínas con inmunofijación con transferrina: LCR = presenta 2 bandas isoformes (banda Tau o β2); Rinorrea = no tiene 2ª banda)). • EL ANÁLISIS DE RTO y FO, GLU, PT, CLORO ES POCO DETERMINANTE. • IDENTIFICACIÓN DEL ORIGEN DEL LÍQUIDO COMO ORINA (LÍQUIDO DRENAJE ABDOMINAL): • ÁCIDO ÚRICO. • UREA. • CREATININA. • ANORMALES EN ORINA (TIRA REACTIVA). • LACTATO (ORINA: INDETECTABLE). • TRIGLICÉRIDOS Y COLESTEROL (ORINA: INDETECTABLE). • COLINESTERASA (ORINA: INDETECTABLE). • IDENTIFICACIÓN DEL ORIGEN DEL LÍQUIDO COMO LÍQUIDO AMNIÓTICO(ORINA MATERNA): Características del Líquido amniótico: • CÉL. EPITELIALES ESCAMOSAS. • PH: 7.00 – 7.25. • DENSIDAD: 1025 - 1050. • PT: 0.2 – 1.7 g/dL. • UREA: Igual a suero (10 – 50). • CREATININA: Igual a suero (0.4 – 1.2). • ÁCIDO ÚRICO: 1.9 – 9.0 mg/dL. • OSMOLALIDAD: 240 – 280 mOsm/kg. • IDENTIFICACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN FECAL DE LA ORINA (FÍSTULA INTESTINAL-VEJIGA): • SEDIMENTO URINARIO: RESTOS FECALES. • EJEMPLO DE INFORME DE LÍQUIDO DESCONOCIDO: “Basado en las características organolépticas, citológicas y bioquímicas (ej.: UREA 55 mg/dL) se sospecha que la muestra de líquido remitida es de origen … (ej.: RENAL) “.

  40. BIBLIOGRAFÍA: 1. Rodríguez-Segade S. Líquido cefalorraquídeo. SEQC, Ed Cont Lab Clin 2006; 9: 49-56. 2. Hernández E, Nuñez C. Estudio del líquido cefalorraquídeo. Rev Diagn Biol 2005; 54(1): 45-50. 3. Fernández F.J, Coperías J.L, Cava F, et al. Determinación de la concentración del lactato en líquido cefalorraquídeo: valor diagnóstico y pronóstico en meningitis bacteriana. Quim Clin 2005; 24(6): 448-453. 4. Juliá M.L, Ricart E, Gilabert M, et al. Validez de la determinación de Dímero D en líquido cefalorraquídeo. XIV Congreso Nacional de Laboratorio Clínico, Alicante 2005. 5. Cabrera C. Líquido cefalorraquídeo y la punción lumbar en el siglo XXI. Rev Postrado de la VIª Cátedra de Medicina 2003; 128: 11- 18. 6. SECQ. Recomendaciones para el estudio de las proteínas en líquido cefalorraquídeo. Quim Clin 2002; 21(2): 83-90. 7. Blanco F, Romero A, Cuadrado M.A. Análisis y aplicaciones diagnósticas del estudio de los líquidos biológicos. AEBM, Taller de Residentes, CFC, 2007. 8. Morgues J. Análisis de los líquidos biológicos serosos de la cavidad pleural, pericárdica y peritoneal. FC AEFA 2006; 7: 1-20. 9. Marín J.L, Merino A, Vila J. II Curso de Citología de líquidos biológicos. Barcelona, Hospital Clínic, 2004. 10. Noguera A, Galán A, Guillén E, et al. Recomendaciones para el estudio de líquidos biológicos serosos en el laboratorio de urgencias. Quim Clin 2004; 23(3): 141-145. 11. Trapé J. Utilidad diagnóstica de los marcadores tumorales en los derrames serosos. SEQC, Ed Cont Lab Clin 2003; 6: 30-36. 12. Salazar M.I, Díez J, Morales J. Trasudado y exudado: evaluación de criterios bioquímicos diferenciales. Rev Diagn Biol 1993; 42: 380-383.

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  43. gracias

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