Utjecaj DNA fragmentacije na ishod IVF/ICSI

1. Utjecaj DNA fragmentacije na ishod IVF/ICSI Marijan Tandara KBC Split

3. 15-20%

4. UZROCI NEPLODNOSTI 10% 30% 30% 30% MUŠKI ŽENSKI MIJEŠANI NEPOZNATI

5. Etiologija muške neplodnosti • Varikocela(35-40%) • Infekcija(~10%) • Genetika(~10%) • Endokrinologija(<5%) • Imunologija(<5%) • Obstrukcija(<5%) • Kriptorhizam(<5%) • Idiopatski(25%) • Greenberg et al, J Urology 1978.

6. Analiza ejakulata Osnovni sjemeni parametri Koncentracija spermija Pokretljivost Morfologija Vitalnost Volumen pH Biokemijski parametri sjemene tekućine Cink Fruktoza Karnitin

7. 1992. Palermo UvođenjemICSI-aizazvao revoluciju u rješavanjumuškogfaktoraneplodnosti !

8. Potreba za boljim markerom potencijala muške plodnosti • Usavršavanjem MPO počelo se više razmišljati o kvaliteti spermija

9. Ispitivanje DNA fragmentacije ?

10. Pakiranje DNA spermija • Vezanje protamina (P1 i P2) za DNA zamjenjuje sve druge proteine (histone) • Formiranje prstenaste strukture ( svaki sadrži oko 50 Kbp DNA ) • Svaki spermij sadrži oko 50 000 prstenastih struktura • Balhorn, J Cell Biol1982.

11. Potencijalni uzroci DNA fragmentacije • Varikocela(Saleh, 2003; Fischer, 2003; Zini, 2000) • Kemoterapija i radioterapija(Chatterjee, 2000; Deane, 2004; Kobayashi, 2001) • Pušenje cigareta (Mak, 2000; Kunzle, 2003; Potts, 1999, Sun, 1993) • Leukocitospermija (de Laminrande, 1993; Zini, 1995, Twigg, 1998; Iwasaki, 1992; Zini, 1993) • Apoptoza(Baccetti, 1996; Sakkas, 2003) • Nedostatak protamina(Cho, 2003) • Testikularnahipertermija(Sailer J 1997,BanksReproduction 2005)

12. Etiologija oštećenja DNA spermija Intratestikularno Posttestikularno

13. Intratestikularno • Nedostatak protamina je važan uzrok oštećenja DNA spermija • (nađen kod 5-15% neplodnih muškaraca) • De Yebra et al, J BiolChem 1993; Bianchi et al, BiolReprod 1993; Kramer et al, Genet Test 1997, • Cho, 2003 • Mutacije u genima koje kodiraju sintezu protamina • Poremećaj topoizomeraze II i tranzicijskih proteina može biti • uzrok DNA oštećenja • Balhorn, J Cell Biol 1982; Kierzenbaum, Mol Reprod Dev 2001;Bissoneault, FEBS Lett 2002 • Apoptoza • Sakkas et al, Exp Cell Res 1999, Sakkas et al. ReprodBiomedOnline 2003

14. Posttestikularni • Reaktivne vrste kisika (ROS) u sjemenu 25% neplodnih muškaraca VARIKOKELA LIJEKOVI PUŠENJE ZAGAĐENJE INFEKCIJA • prostate • sjemenih vezikula • epididimisa KARCINOM Oxidativnistres NEZRELI/ABNORMALNI SPERMIJI Produženo zadržavanje spermija u epididimisu DNA oštećenje Oštećenjespermija NEPLODNOST • Aitken et al, BiolReprod 1998; • Irvine et al, J Androl2000.

15. Koncentracija i postotak spermija s fragmentiranom DNA kod neplodnih i plodnih muškaraca M. Sergerie i sur. Hum Reprod2005.

16. DNA fragmentacija kod plodnih muškaraca,neplodnih s normalnim sjemenim parametrima i neplodnih s lošim sjemenim parametrima A. Saleh i sur. FerilSteril2002.

17. Korelacija između DNA fragmentacije i sjemenih parametara A. Agarwal i sur Human Reprod2003.

18. ? ? ? ? Granična vrijednost DNA fragmentacije ? ? ? ?

19. M. Benchaib i sur Human Reprod2003.

20. DNA fragmentacija • Da li visoka razina oštećenja DNA spermija pogađa • fertilizaciju i rani razvoj embrija? • Da li visoka razina oštećenja DNA spermija povezana s uspješnost trudnoće i prijevremenim pobačajima?

21. Integritet DNA spermija postaje važan – ekspresija genoma embrija 2 pronukleusa blastocista 4 st embrio 8 stembrio 2 stembrio

22. W.Ombelet, ESHRE Campus,2007.

23. ICSI IVF

24. 37.3/47.9 33.7/29.0 A. Zini i sur, CMAJ 2006, M. Bungum i sur. Human Reprod2007.

26. Koji je onaj pravi ?

29. Sviljudipopriroditeže ka znanju. Štoznamo - nijemnogo, što ne znamo - neizmjerno je. Aristotel

30. HVALA!!!

31. “Napredak se postiže samo kad radimo više nego se od nas očekuje” Gary Ryan Blair