ADN en la ciencia forense: genes en tela de juicio

1. ADN en la ciencia forense: genes en tela de juicio UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO INTEGRANTES: TERAN CHILON,GUISELLA .S. MARÌN FUSTAMANTE,ANALUZ

2. objetivos • OBJETIVO GENERAL: • Conocer la importancia del ADN en la ciencia forense y los genes en tela de juicio. • OBJETIVOS ESPECÍFICOS • Lograr verificar en qué casos se utiliza el ADN en la ciencia forense. • Determinar qué casos resuelve el ADN en la ciencia forense.

3. INTRODUCCIÓN El ADN se ha convertido en una de las herramientas más precisas para la identificación de individuos y es utilizado por miles de laboratorios fundamentalmente en: La identificación de vestigios biológicos de interés en la investigación criminal de muy diversos delitos.La identificación de restos humanos, la investigación biológica de la paternidad y otras relaciones de parentesco. Obviamente, cuanto más baja es la probabilidad de encontrar otro perfil igual entre individuos no relacionados genéticamente, mayor es el poder de discriminación. Las cortes consideran esta como una buena evidencia en la cual basar sentencias .

4. ADN • Los biólogos Watson y Crick describieron primero a la estructura con dos cadenas del ADN • Veinticinco años después los biólogos Werner Arber, Daniel Nathans y Hamilton Smith descubrieron las enzimas de restricción • Diez años más tarde, en 1984, el genetista inglés Alec Jeffreys desarrolló un método para identificar visualmente las secuencias ubicadas entre genes, cuya configuración es diferente para cada individuo • Los pares de las bases se forman sólo juntando A con T y C con G.

6. Importancia del análisis forense de ADN TIEMPO QUE DEMORA UNA PRUIEBA DE ADN Puede tomar de tres semanas a tres meses para llevar a cabo una prueba de análisis de ADN. La sangre, el cabello, los fluidos corporales, el semen, fluidos vaginales y otras células de tejidos son recolectados como muestras. Dos tipos de muestras son recolectadas: una de la escena del crimen y otra del sospechoso. Estas muestras son procesadas y después al usar técnicas de biología molecular, el ADN es identificado y comparado en las dos muestras. Si la secuencia de ADN es la misma en las dos muestras, es una evidencia que las células son de la misma persona y por lo tanto, es la responsable del crimen.

7. La huella • El primer paso consiste en : • Obtener una célula con núcleo que contiene ADN, ya sea de la saliva, el semen, la raíz del pelo o el hueso. Cualquier parte del cuerpo que contiene una célula con núcleo contiene ADN. La muestra extraída se centrifuga con reactivos y solventes que separa el ADN de las proteínas. • El siguiente paso consiste en introducir las enzimas –proteínas que cortan el ADN en lugares específicos–  para obtener secciones de diversas longitudes. Estos fragmentos, amplificados, son introducidos en un gel, sometidos a una corriente eléctrica y se orientan con el extremo positivo a un lado y el negativo al otro, con lo cual los ordena por tamaños. • Una vez adheridos, los pedazos correspondientes de la muestra pueden ser visualizados directamente en el gel como rayas oscuras en las secciones identificadas. Allí se puede detectar las coincidencias, cuando las hay. A través de los años el proceso del doctor Jeffreys ha sido perfeccionado y automatizado: hoy en pocas horas se tiene los resultados. .

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9. Técnicas Dos técnicas usadas para estudiar el ADN en la ciencia forense Polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR

10. Polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) Jeffreys descubrió la existencia de unas regiones mini satélites hipervariables dispersas por el genoma humano que al ser tratadas con enzimas de restricción generaban fragmentos de longitud variable. Estudios posteriores realizados el mismo Jeffreys demostraron que las diferencias en el tamaño de estos fragmentos se debían a que estas regiones consistían en un determinado número de repeticiones en tándem de una secuencia central, el cual variaba de unos individuos a otros.   . De esta manera observaron fragmentos de más de 15 longitudes diferentes en una pequeña muestra de individuos. De manera que las diferentes longitudes de los fragmentos originados dependían del número de dichas repeticiones y se les denominó VNTR (“Variable Number of Tandem Repeat”).

11. Esta técnica consta básicamente de las siguientes etapas: • Digestión del ADN con enzimas de restricción tras conseguir extraer un ADN de alta molecularidad. • Separación de los fragmentos obtenidos por medio de una electroforesis en gel de agarosa. • Desnaturalización de los fragmentos separados y cortados. • Transferencia de las cadenas simples a una membrana de nitrocelulosa o nylon y fijación de las mismas por medio de calor (80ºC). • Prehibridación con sondas de ADN inespecífico para bloquear los lugares de unión inespecíficos que pudiera haber en la membrana. • Marcaje de la sonda con nucleótidos radioactivos (32 P normalmente). • Hibridaciónde la sonda marcada y desnaturalizada con los fragmentos de ADN fijados a la membrana, y lavado de la membrana para eliminar el exceso de sonda o aquellas que hayan hibridado mal. • Revelado en placa radiográfica e interpretación de los resultados.

13. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) La reacción tiene lugar en tres fases:  Desnaturalización: la plantilla o fragmento original de DNA se calienta hasta una temperatura de 90º a 95 ºC durante 30 segundos; esto provoca la separación de las dos cadenas. Templado: la temperatura de la mezcla se rebaja hasta 55 ºC durante 20 segundos para que los cebadores oligonucleotídicos se enlacen con el DNA escindido. Polimerización: la temperatura de la mezcla se eleva hasta 75 °C para que la polimerasa copie rápidamente la molécula de DNA.

15. La reacción tiene lugar en tres fases: 

16. MEDICINA FORENSE (IDENTIFICACION DE CADÁVERES Determina la causa de la muerte a través de un examen de un cadáver. METODOS Dactiloscopia Manchas de sangre Odontología Osteologia

17. DACTILOSCOPIA

18. DACTILOSCOPIA Huellas latentes recogidas de la escena del crimen. El ADN mitocondrial (mtADN) es un pequeño genoma localizado dentro de las mitocondrias que es heredado por vía materna. Por otro lado, su mayor ventaja es que se encuentra en un gran número de copias en cada célula (hay entre 100 y 1000 copias de mtADN por una de genoma nuclear) y, por tanto, se puede detectar en muchos casos en los que no es posible la obtención de ADN nuclear (p.ej: tallos de pelos, restos óseos antiguos). Consiste en extraer la información genética de las mitocondrias que contiene el citoplasma de la célula.

19. Odontología • Se utiliza en la identificacíon de cadáveres en sutuaciones desastres. Consiste en la comparación de las fichas dentarias conocidas de una persona con los dientes recuperados o hallados en restos óseos de origen desconocido.

20. v • Odontología Para ello las agruparemos por: 1.Sexo2. Edad2.6. más de 55 años3.0. desdentado total hasta 3.32. dentición definitiva completa4. Piezas con caries5. Piezas con restauraciones6. Si es o tiene signosde haber sido portador de prótesis7. Condición7.0. Control de búsqueda por ficha aportada al sistema por interesados7.1. Identoestomatograma en vivo7.2. Identoestomatograma en cadáver7.3. Identoestomatograma en restos óseos8. FechaBastará con los dígitos correspondientes a la década. Ante la ausencia de la mayoría de los datos identifica torios tradicionales que nos permiten un ordenamiento normal, se hace imprescindible crear una forma para poder ordenarlos de tal manera que podamos encontrar las fichas lo más rápido Lo importante del sistema es que nos permite el ingreso de la cantidad de datos que consigamos, a fin de lograr una identificación positiva.

21. Osteología En los tejidos blandos de los cuerpos en descomposición El ADN se degrada rápidamente como consecuencia inmediata del crecimiento bacteriano y la influencia de factores medio ambientales. La protección del medio externo que la matriz ósea brinda al ADN ,hace del hueso el último recurso para obtener información genética. Es verdaderamente complicado extraer el ADN del hueso. La estimación de la estatura a partir de los huesos largos de las extremidades, así como la estimación de sexo, edad y afinidad biológica  en series esqueléticas, son fundamentales en toda investigación. Para estimar la estatura en restos óseos humanos.Se miden las longitudes máximas de los huesos largos (húmero, ulna, radio, fémur, tibia y fíbula)

22. Manchas de sangre • El análisis del ADN ha dotado a la criminalística de la posibilidad de estudiar indicios mínimos que, con otros métodos, sería imposible analizar. Este tipo de muestra plantea una mayor dificultad en la detección de la mancha. El líquido que se utiliza para encontrar estas manchas, en ocasiones, no visibles a la vista, es Luminol.

23. Manchas de sangre • CLASIFICACION DE LAS MANCHAS DE SANGRE • Según la clasificación de Herbertson • Para este investigador, primero se encuentran las manchas de sangre  • clase 1. Estas son las manchas cuyo diámetro oscila entre los 1.5 y los 2.2 cms. (15 a 22 mm.). Este tipo de manchas indican que la velocidad de un cuerpo al golpear con su soporte fue lenta lo que casi siempre por causa de la gravedad y cuando dicho cuerpo golpea en superficies lisas que no son capaces de absorber impactos. • clase 2 que son las manchas cuyo diámetro oscila entre los 3 y los 10 mm. Estas manchas implican que, el impacto que la produjo lo hizo a una velocidad moderada habiéndose aplicando en dicho impacto una fuerza mayor a la fuerza de la gravedad. • clase 3 que son manchas de menos de 1 mm y que son consecuencia de impactos con armas de fuego e incluso con elementos contundentes. Después de estas aparecen las manchas de clase 4 que son manchas de charco o transparencia y que son el resultado de cualquier procedimiento de limpieza hecho en la escena del crimen.

24. Manchas de sangre

25. ¿QUIÉNESESTAN AUTORIZADOS PARA HACER ESTAS PRUEBAS? Policía judicial Se denomina Policía judicial a aquella que presta servicios al poder judicialy al ministerio público, para la investigación de delitosy ejecución de sentencias.También suele practicar notificaciones y otras actuaciones que estos les encomienden. LABORATORIO AUTORIZADO PARA HACER ESTE TIPO DE PRUEBAS : LA ZONA DEL NORTE/NORESTE – CAJAMARCA,  DR. CARLOS LOAYZA PALOMINO  - Laboratorios Loayza

26. Razones por las cuales no se ejecutan estas pruebas Los mayores problemas en la utilización de las pruebas de DNA radican: 1. En los precios de las pruebas. Sus altos costos, la necesidad de recurrir a laboratorios competentes y en el exterior, los escasos recursos que en los tribunales se asigna a las pruebas periciales y la baja condición socioeconómica de los acusados en su mayoría dificultan su utilización.  2. Para que la prueba tenga una alta confiabilidad se requiere conocer el genoma de la población comparativa. Un estudio de esta magnitud cuesta varios millones de dólares. 3. La incorrecta manipulación de las muestras y las condiciones mismas de su degradación dificultan su utilización. Por último, la aceptación de estas pruebas depende del conocimiento y características básicas de los test de DNA por parte fiscales, jueces y abogados, para no ser rebasados por la complejidad del tema.

28. GRACIAS POR SU ATENCIÓN