190 likes | 1.07k Views
UNIVERZITET U NOVOM SADU PRIRODNO MATEMATIČKI FAKULTET DEPARTMAN ZA BIOLOGIJU I EKOLOGIJU. FIZIOLOŠKE (BIOHEMIJSKE) KARAKTERISTIKE BAKTERIJA. mr Petar Knežević Novi Sad, 2007. IDENTIFIKACIJA BAKTERIJA. ČISTA KULTURA!!! MORFOLOŠKE KARAKTERISTIKE OSNOVNI I IZVEDENI OBLIK
E N D
UNIVERZITET U NOVOM SADU PRIRODNO MATEMATIČKI FAKULTET DEPARTMAN ZA BIOLOGIJU I EKOLOGIJU FIZIOLOŠKE (BIOHEMIJSKE) KARAKTERISTIKE BAKTERIJA mr Petar Knežević Novi Sad, 2007.
IDENTIFIKACIJA BAKTERIJA • ČISTA KULTURA!!! • MORFOLOŠKE KARAKTERISTIKE • OSNOVNI I IZVEDENI OBLIK • TINKTORIJELNE KARAKTERISTIKE • SPORE, FLAGELE, KAPSULA • KULTURELNE • T, KISEONIK, RAST U TEČNOJ PODLOZI, NA KOSOM I DUBOKOM AGARU; KARAKTERISTIKE KOLONIJE • FIZIOLOŠKE KARAKTERISTIKE
RAST NA TEČNOJ PODLOZI: • TALOG- zrnast, pahuljast, sluzav i sl. • ZAMUĆENJE • OPNA (PELIKULA, MEMBRANA) • KOMBINACIJE
POKRETLJIVOST • NATIVNI PREPARAT ILI POLUTEČNA PODLOGA- zasejavanje ubodom
KATALAZA TEST • DA LI BAKTERIJA IMA KATALAZE, KOJE RAZGRAĐUJU VODONIK PEROKSID? • 2H2O2 2H2O + O2 • KAP 3% VODONIK PEROKSIDA NA KOLONIJU- MEHURIĆI I PENA
OKSIDAZA TEST • DA LI BAKTERIJA IMA cytC OKSIDAZU? • cit cred.+ O2 + 2H+ cit cox. + H2O • cit cox.+ reagensred. cit cred. + reagensoks. • NA KOLONIJU SE STAVI FILTER HARTIJA I PRELIJE OKSIDAZA REAGENSOM- POJAVA LJUBIČASTE BOJE ZNAČI DA BAKTERIJA IMA cytC OKSIDAZU
RAZLAGANJE PROTEINA • DA LI BAKTERIJA IMA PROTEAZE? • DUBOKI AGAR SA 12% ŽELATINA • Želatinčvrst Peptidi i aminokiselinetečni • MPA SA 0.2% ŽELATINA; POSLE INKUBACIJE PRELIVANJE SA RASTVOROM HgCl2 • Želatintalog Peptidi i aminokis.nema taloga
RAZGRADNJA SKROBA • DA LI BAKTERIJA IMA AMILAZE? • SKROBNI AGAR; DOKAZIVANJE LUGOLOVIM RASTVOROM + Skrob maltoza i glukoza + Lugol-ov reagens • Skrob +Lugol-ov reagens INKLUZINON JEDINJENJE
RAZGRADNJA LIPIDA • DA LI BAKTERIJA IMA LIPAZE? • PODLOGA SA Tween80 I Ca2+ • LIPIDIGLICEROL I MASNE KISELINE • MASNE KISELINE+ Ca2+→ Ca SAPUNKRISTALI • PODLOGA TRIBUTIRIN- nema zamućenja
USVAJANJE CITRATA • DA LI BAKTERIJA MOŽE DA USVAJA CITRAT KAO JEDINI IZVOR UGLJENIKA? • SIMONS CITRATNI AGAR SA BROMTIMOL PLAVIM Na-Citrat piruvat + CO2 CO2 + Na+ Na2CO3- povećava pH
PRODUKCIJA INDOLA • DA LI BAKTERIJA PRODUKUJE INDOL IZ TRIPTOFANA? • TRIPTOZNI BUJON+KOVACH-ev REAGENS Trp NH3 + pirogrožđana kiselina + indol Indol + Kovach reagens kompleks crvene boje
FERMENTACIJA ŠEĆERA • TEČNA PODLOGA SA 1% ŠEĆERA ILI DR. FERMENTABILNOG SUPSTRATA, KISELO BAZNIM INDIKATOROM I Durcham-ovom CEVČICOM • PROMENA BOJE PODLOGE- KISELINA • GAS U Durcham-ovoj CEVČICI
KLIGLER-ova podloga- FERMENTACIJA GLUKOZE, LAKTOZE I PODUKCIJA H2S-a • H2S + FeSO4 FeS crne boje + H2SO4 • SULFITNI AGAR
METIL RED TEST • DA LI JE FERMENTACIJA MEŠOVITO KISELINSKA? • pH pada ispod 4,4 • Glukoza Piruvat mlečna, sirćetna i mravlja kis. • Organske kiseline + MR reagens crvena boja
VOGES PROSKAUER TEST • DA LI SE PRI FERMENTACIJI STVARA ACETOIN? • Glukoza Piruvat acetoin + α naftola crvena boja
DRUGI TESTOVI: • TEST HIDROLIZE UREE • TEST HIDROLIZE KAZEINA • REDUKCIJA NITRATA • RAST SA 40% ŽUČI • RAST SA 6.5% NaCl • HIDROLIZA ESKULINA • ITD, ITD.................................